解旋酶是一類能解開核苷酸雙鏈的酶，解旋酶SF2中的RecQ解旋酶亞家族在核酸代謝過程中起了關(guān)鍵的作用，人們發(fā)現(xiàn)在人體中存在RECQ1、BLM、WRN、RECQ4和RECQ5五種RecQ解旋酶。WRN解旋酶在基因組維持中具有多種作用，如復(fù)制、堿基切除修復(fù)、重組，DNA損傷反應(yīng)和轉(zhuǎn)錄。這些過程經(jīng)常被發(fā)現(xiàn)在人類癌癥中上調(diào)，其中許多癌癥顯示W(wǎng)RN水平升高。WRN和微衛(wèi)星不穩(wěn)定(microsatellite instability, MSI)之間存在合成致死關(guān)系，MSI源于DNA錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair, MMR)的缺陷，并有助于形成多種癌癥類型，包括結(jié)腸癌，子宮內(nèi)膜癌，胃癌和卵巢癌。在MSI模型中，剔除WRN會(huì)誘導(dǎo)雙鏈DNA斷裂并選擇性地促進(jìn)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期停滯，MSI癌癥模型需要WRN的解旋酶活性，但不需要它的核酸外切酶活性。綜上，定向抑制這種RecQ解旋酶可能有益于選擇性癌癥治療。
愛思益普?qǐng)F(tuán)隊(duì)已成功表達(dá)和純化出高純度的WRN(500-946)，WRN(517-1238)和WRN(1-1432，fulllength)三種蛋白并構(gòu)建了各自對(duì)應(yīng)的unwinding和ADP-Glo兩種方法篩選抑制劑。為防止抑制劑與底物結(jié)合導(dǎo)致假陽性，同時(shí)構(gòu)建了DNA SYBR green intercalation assay，該實(shí)驗(yàn)?zāi)軝z測(cè)化合物與DNA的結(jié)合情況。同時(shí)完成了RECQ家族其他蛋白R(shí)ECQ1, BLM, RECQ4, RECQ5的體外酶學(xué)方法構(gòu)建，以助力WRN藥物的靶點(diǎn)選擇性研發(fā)工作。
