DEAH-box helicase 9 (DHX9)是 DEAH-box RNA 解旋酶家族的重要成員。作為一種 ATP 依賴性 RNA 解旋酶，DHX9 可解旋 RNA 或 DNA 雙鏈體，以及 DNA：RNA 雜交體 （R-loops），使其成為 DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的重要蛋白質(zhì)。DHX9 與多種細(xì)胞過程有關(guān)，包括轉(zhuǎn)錄、翻譯、mRNA 衰變和 RNA 轉(zhuǎn)運(yùn).此外，DHX9已成為腫瘤發(fā)生的重要參與者感染和自身免疫性疾病。
人DHX9基因位于染色體1q25上的前列腺癌易感位點(diǎn)，假基因DHX9P定位于染色體13q22。該活性基因由29個(gè)外顯子組成，編碼1270個(gè)氨基酸，蛋白大小為140 kDa（見圖1）。DHX9包含一個(gè)由8個(gè)基序組成的解旋酶核心結(jié)構(gòu)域。核心區(qū)域?yàn)閮蓚€(gè)RecA樣結(jié)構(gòu)域，基序I-III位于結(jié)構(gòu)域1中，基序IV-VI位于結(jié)構(gòu)域2中。DHX9 N末端包含2個(gè)雙鏈RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（dsRBD）。最小反式激活結(jié)構(gòu)域（MTAD）是RNA聚合酶 II （PolII） 相互作用的位點(diǎn)。解旋酶相關(guān)結(jié)構(gòu)域2（HA2）位于解旋酶核心結(jié)構(gòu)域的C末端附近。在DHX9的C末端有一個(gè)寡核苷酸/寡糖結(jié)合折疊（OB-fold），重疊的核定位/輸出信號(hào)，以及一個(gè)能夠結(jié)合單鏈核酸的富含甘氨酸的RGG盒。
產(chǎn)品及服務(wù)
1.人DHX9 重組蛋白
2.DHX9 抑制劑篩選：兩種方法可選擇，ADP-Glo 和 Unwinding 實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)原理
DHX9 ADP-Glo實(shí)驗(yàn)原理見圖2, DHX9解螺旋需要消耗ATP，ATP轉(zhuǎn)化成ADP,使用試劑盒檢測(cè)ADP的生成量來反應(yīng)DHX9的酶活性，加入試劑盒中的第一個(gè)試劑可以將實(shí)驗(yàn)中未反應(yīng)的ATP消耗掉，第二個(gè)試劑加入后會(huì)將實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的ADP轉(zhuǎn)化為ATP，并且里面含有熒光素酶的底物，最后使用酶標(biāo)儀的化學(xué)發(fā)光模塊檢測(cè)信號(hào)值。Unwinding實(shí)驗(yàn)原理見圖3，底物是由一段Cy5標(biāo)記的RNA序列，BHQ2標(biāo)記的DNA序列，同時(shí)與RNA互補(bǔ)鏈進(jìn)行退火得到的。正常情況下Cy5和BHQ2相互靠近Cy5的熒光可以被BHQ2淬滅掉；當(dāng)加入DHX9后，開始進(jìn)行解鏈，Cy5標(biāo)記的一段被解鏈后遠(yuǎn)離BHQ2，其熒光可在酶標(biāo)儀Ex/Em：620/685nm處被檢測(cè)到。
數(shù)據(jù)展示
1.DHX9 蛋白表達(dá)
1.DHX9 ADP-Glo 實(shí)驗(yàn)
DHX9 protein(150-1150)
