腺病毒載體能感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞,適用于體內(nèi)和體外基因傳遞,轉(zhuǎn)染效率高,對外源基因瞬時表達(dá)量高。但相對于其他病毒載體系統(tǒng),腺病毒載體在靶細(xì)胞中具有相對較高的免疫原性。那么什么情況下,可以優(yōu)先考慮腺病毒載體?
1.目的基因較大
腺病毒較慢病毒和腺相關(guān)病毒一個很大的優(yōu)勢在于,載體容量大,可以插入7.5kb以下的基因片段,因此,當(dāng)待研究的外源基因較大時,可以考慮使用腺病毒載體。
2.需縮短實驗周期
腺病毒感染效率高,在理想感染條件下,在很多細(xì)胞株中的效率可以達(dá)到99%,可直接進(jìn)行后續(xù)實驗,節(jié)約經(jīng)濟(jì)成本和時間成本。
3.目的細(xì)胞較難感染,且后續(xù)實驗不需要建立穩(wěn)定細(xì)胞株
原代細(xì)胞較傳代細(xì)胞等細(xì)胞系難轉(zhuǎn)染,而腺病毒能感染幾乎所有的細(xì)胞類型,相較于慢病毒和腺相關(guān)病毒更適合原代細(xì)胞的感染。對于那些慢病毒感染難度較大,且不需要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株時,可以選擇滴度更高的腺病毒,不僅可以提高感染效率,也能節(jié)約成本。
4.需進(jìn)行動物實驗
用于動物實驗的病毒需具有較高的滴度,才能達(dá)到使用小體積注射的目的。目前,慢病毒能達(dá)到的較高的有效滴度通常在108TU/mL左右,較腺病毒和腺相關(guān)病毒更低,而大體積的注射量對于動物是有害的。在這種情況下可以根據(jù)實驗?zāi)康暮透腥静课贿x擇腺病毒,因為腺病毒的滴度通常可達(dá)1011PFU/mL,在應(yīng)用動物實驗時,注射體積量更小。不僅如此,腺病毒可進(jìn)行擴(kuò)增純化,從而避免重新包裝,以節(jié)約經(jīng)濟(jì)成本和時間成本。
合適的病毒載體是進(jìn)行病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗的關(guān)鍵,下面是病毒載體選擇小技巧,供大家參考:


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