表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）是一種光學(xué)物理現(xiàn)象。當(dāng)偏振光以臨界角入射到兩種不同折射率的介質(zhì)界面（比如玻璃表面的金或銀鍍層）時(shí)，可引起金屬薄膜內(nèi)自由電子的共振，使反射光在一定角度內(nèi)大大減弱。其中，使反射光在一定角度內(nèi)完全消失的入射角稱為SPR角。可以通過(guò)監(jiān)測(cè)生物反應(yīng)過(guò)程中SPR角的動(dòng)態(tài)變化，得到生物分子之間結(jié)合和相互作用的特異性信號(hào)。
利用SPR表面等離子共振這種特殊的物理現(xiàn)象，將一種生物分子（靶分子）偶聯(lián)在生物傳感器表面，再將含有另一種能與靶分子產(chǎn)生相互作用的生物分子（分析物）的溶液注入并流經(jīng)傳感器表面。分子間的結(jié)合引起傳感器表面質(zhì)量增加，導(dǎo)致折射指數(shù)按同樣的比例增強(qiáng)，生物分子間反應(yīng)的變化即被監(jiān)測(cè)到。通過(guò)不同濃度梯度和溫度梯度的分析物的注入，即可觀察到分析物與靶分子的相互作用在分析物濃度或溫度變化后引起的SPR角改變，進(jìn)而可以繪制出兩種分析物相互作用的SPR分子互作動(dòng)力學(xué)曲線，計(jì)算出KD穩(wěn)態(tài)與平衡常數(shù)。SPR分子互作動(dòng)力學(xué)技術(shù)已經(jīng)成為目前定性和定量監(jiān)測(cè)兩種不同分子間結(jié)合程度的標(biāo)準(zhǔn)方法。
丨 SPR分子互作儀器設(shè)備
Biacore™ T200是一個(gè)高靈敏度、無(wú)標(biāo)記的分子互作系統(tǒng)：
Biacore™ S200是一種非標(biāo)記相互作用分析系統(tǒng)：
Biacore™ 8K是一款高通量、高靈敏度的 SPR 系統(tǒng)：
丨 SPR分子互作技術(shù)特點(diǎn)
1. 通過(guò)傳感芯片可實(shí)時(shí)、原位和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)生物分子間的相互作用過(guò)程，適用于各類生物體系的測(cè)定，小分子-蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)，DNA-蛋白質(zhì)，DNA-DNA等；
2. 研究抗原-抗體特異性、配體-受體相互作用、蛋白復(fù)合物；
3. 樣品無(wú)需標(biāo)記，通過(guò)檢測(cè)SPR角度變化，獲得分析物的濃度、親和力、動(dòng)力學(xué)常數(shù)和特異性等信息；
4. 對(duì)復(fù)合物的定量測(cè)定不干擾反應(yīng)的平衡，確保檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定可靠性；
5. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法靈活，提供高通量、高質(zhì)量的分析數(shù)據(jù)。
丨 實(shí)測(cè)案列賞析
案列：Nat Commun；2024年；IF=14.7
