單克隆抗體的生產
大量生產單克隆抗體的方法主要有三種:1、大量培養雜交瘤細胞,從細胞培養上清液中獲取單克隆抗體,一般細胞培養液內的抗體含量為10~60μg/ml;
2、將對數生長期的雜交瘤細胞按1~3×10^7/ml接種于小鼠皮下,每處注射0.2ml,每只注射2~4個點,待10~20天左右即可進行采血,從血清中獲得的單克隆抗體的含量可達1~10mg/ml;
3、小鼠腹腔注射適量佐劑后,將雜交瘤細胞按照1~2×10^6cell/只的量打進腹腔。在小鼠瀕死時收集腹水,一般一只小鼠可獲得5~10ml腹水,腹水中單克隆抗體含量可達5~10mg/ml。
腹水制備實驗流程
1、將佐劑注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3~0.5ml處理腹腔15天左右(一般12-18天)。然后將篩選出來的雜交瘤細胞株進行擴大培養后接種到Balb/c小鼠腹腔內, 建議每只注射80萬-100萬個細胞。腹水會比普通佐劑晚出1.5~2天,但通常情況下腹水的量是普通佐劑出量的 1.5~2倍,且單抗腹水效價不變;
2、將篩選出來的雜交瘤細胞株進行擴大培養后接種到Balb/c小鼠腹腔內, 建議每只注射80~100萬個細胞;
3、注射細胞7天左右小鼠腹部會開始腫脹,此時每日都應進行觀察,以防小鼠突然死亡,當小鼠出現進食困難,行走不便,毛色暗沉時將小鼠處死,進行一次性腹水的提取;
4、小鼠脫頸椎處死,于75%酒精浸泡消毒5min;
5、用手術剪將小鼠腹部剪開一個小口,剝離周圍皮膚露出腹腔,隨后將腹腔剪開一個小口,將膠頭滴管伸入腹腔內將積液吸取至干凈的15ml離心管內;
6、3000rpm,10min離心,無色透明的中間層即為腹水。
備注:離心后可以將腹水轉移至新的離心管內-20℃凍存(上層為礦物油層,下層為細胞層),也可與滅菌甘油等比混勻后放于-20℃冰箱長期保存。
博奧龍特色腹水佐劑
| 貨號 | 規格 | 價格 |
| KX0210048-10 | 10ml | 100 |
| KX0210048-500 | 500ml | 3160 |
備注:大批量采購可享受梯度優惠價格
使用方法:
將佐劑注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml處理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射雜交瘤細胞, 建議每只注射80萬-100萬個。腹水會比普通佐劑晚出1.5天-2天,但通常情況下腹水的量是普通佐劑出量的 1.5-2倍,且單抗腹水效價不變。
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博奧龍是一家由留學歸國人員創辦的生命科學領域技術研發型企業,專業從事新型生化試劑的研發和銷售。公司理念是通過自主創新的品牌產品改變傳統實驗模式,使生命科學研究變得更輕松、更高效。
公司成立八年多來推出了上萬種自主品牌產品,其中包括QuickAntibody?免疫佐劑、QuickShuttle?轉染試劑、QuickFreezing?細胞凍存液、QuickVerification?膠體金檢測卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗體等多種獨特的自主知識產權產品。秉承“專業、創新”的理念,公司將繼續在擅長專業領域做強做大,為客戶提供更多的創新產品和服務,力爭成為國際知名的品牌生化試劑公司。
公司主要產品有抗體制備全套產品、病毒包裝相關產品、2萬多種科研用抗原抗體、近300種病理級抗體、近3000余種病毒蛋白及病毒抗體,另有WB、IHC、ELISA、細胞培養相關試劑及諸多特色產品和特色技術服務。
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