【Biodragon小課堂】如何制備單抗-商家動(dòng)態(tài)-資訊-生物在線

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【Biodragon小課堂】如何制備單抗

作者:蘇州博特龍免疫技術(shù)有限公司 2022-09-06T18:14 (訪問量:15845)


單克隆抗體生產(chǎn)技術(shù)于1975年由K?hler和Milstein發(fā)明。作為功能分子的單克隆抗體不僅可用于基礎(chǔ)科學(xué),還可用于藥物、測試藥物、生物傳感器等領(lǐng)域。近年來,以單抗為主的藥物在中小藥品銷售中占主導(dǎo)地位,預(yù)計(jì)到2023年底,市場收入將達(dá)到2189.7億美元左右。

單克隆抗體有兩種類型:一種是識(shí)別初級(jí)蛋白結(jié)構(gòu)的線性表位的抗體,另一種是識(shí)別二級(jí)、三級(jí)和更高結(jié)構(gòu)的抗體。在生命科學(xué)研究中,使用識(shí)別線性表位的抗體包括ELISA和Western blot方法。然而,使用這類抗體的應(yīng)用有限,而結(jié)構(gòu)識(shí)別抗體有廣泛的應(yīng)用,如免疫沉淀,免疫染色等。

實(shí)驗(yàn)流程簡圖

單克隆抗體是由一個(gè)產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交廇細(xì)胞經(jīng)無性繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的,所以它的免疫球蛋白屬同一類型,質(zhì)地純一,而且它是針對(duì)某一抗原決定簇的,因此特異性強(qiáng),親合性也一致。

一、免疫鼠的制備?

可溶性抗原的免疫原性較弱,一般需要通過添加佐劑來提高免疫效果。佐劑可以先于抗原或與抗原混合后注入動(dòng)物機(jī)體內(nèi)來增強(qiáng)抗原免疫原性,同時(shí)可以延緩抗原在體內(nèi)的降解以及增強(qiáng)免疫應(yīng)答。

常用的佐劑有弗氏佐劑、鋁佐劑、水溶性佐劑等。一般情況下,免疫效果會(huì)因?yàn)樾∈髠€(gè)體差異和實(shí)驗(yàn)人員的操作而存在偏差,所以一般選擇同時(shí)免疫多只小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

備注:

本文將主要闡述弗氏佐劑和水溶性佐劑的兩種免疫方法。

1.1 實(shí)驗(yàn)用材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

免疫鼠制備時(shí)通常選用6-8周齡的Balb/c雌鼠。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均需皮毛光亮,精神狀態(tài)良好;維持21~27℃的恒溫飼養(yǎng)且每日提供光照/黑暗環(huán)境12/12h循環(huán)。

1.1.2 主要試劑

1、弗氏佐劑

2、QuickAntibody-Mouse 5W 水溶性佐劑

1.2 方法

1.2.1 免疫鼠的制備

1.2.1.1 方法一:傳統(tǒng)免疫法

弗氏不完全佐劑由礦物油(石蠟油)、乳化劑(羊毛脂)組成;弗氏完全佐劑額外添加了卡介苗或殺死的分枝桿菌。免疫時(shí)將弗氏佐劑與抗原按體積比 1:1混合,完全乳化形成油包水結(jié)構(gòu)后即可用于免疫注射。

備注:

注意低溫操作,以防摩擦產(chǎn)生的熱量導(dǎo)致部分抗原失活。

1.2.1.2 方法二:水溶性佐劑免疫

用生理鹽水將抗原稀釋到 2 倍最終濃度,無菌條件下將水溶性佐劑QuickAntibody-Mouse 5W與抗原按體積比 1:1 迅速上下顛倒混勻,兩條后小腿肌肉注射免疫小鼠,每只小鼠注射 100μl體積。

備注:

使用前應(yīng)充分混勻佐劑,與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象,抽入針管后應(yīng)盡快注射,建議整體實(shí)驗(yàn)流程控制在10min之內(nèi)。

1.2.2 尾尖血測效價(jià)

1、最后一次免疫小鼠間隔2周后,取各免疫鼠尾尖血100~200μl,12000rpm,4℃,離心15min取上層血清,梯度稀釋后用間接ELISA法檢測血清內(nèi)的抗體效價(jià);

2、根據(jù)ELISA結(jié)果選擇血清抗體效價(jià)較高的1~2只小鼠于融合實(shí)驗(yàn)前3天進(jìn)行沖擊免疫,采取腹腔注射抗原溶液。

備注:

1、若免疫效果不理想可以再通過腹腔注射(傳統(tǒng)免疫法)或后小腿肌肉注射(水溶性佐劑法)再次免疫,間隔2~3周后重復(fù)檢測血清抗體效價(jià);

2、沖擊免疫可能會(huì)造成小鼠死亡,因此建議選擇~2只小鼠同時(shí)進(jìn)行沖擊免疫。

二、雜交瘤細(xì)胞融合?

正常小鼠通過免疫抗原的長期刺激,脾臟內(nèi)的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)可以產(chǎn)生針對(duì)于抗原的特異性抗體,但B細(xì)胞不具備在體外長期存活的能力。為了獲取在體外可以長期生存,并且具有產(chǎn)生抗體能力的細(xì)胞,早期人們通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)將免疫鼠的脾細(xì)胞與可無限培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合后可以獲得既可以分泌特異性抗體,又具有無限增殖能力的雜交瘤細(xì)胞。

2.1 實(shí)驗(yàn)用材料

2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及細(xì)胞

用于細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)的是與免疫動(dòng)物屬于同一品系的SP2/0骨髓瘤細(xì)胞,這樣細(xì)胞融合效率較高,也便于接種雜交瘤在同一品系小鼠腹腔內(nèi)產(chǎn)生富含大量單克隆抗體的腹水。

2.1.2 主要試劑

1、50%PEG1450即用型溶液

2、HAT選擇性培養(yǎng)基 50X

3、HT選擇性培養(yǎng)基 50X

4、胎牛血清

5、Hybridoma Feeder添加因子

2.2 方法

2.2.1 骨髓瘤細(xì)胞SP2/0的準(zhǔn)備

骨髓瘤細(xì)胞SP2/0細(xì)胞應(yīng)大小均一透亮,形態(tài)渾圓,聚集呈葡串狀。用含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期時(shí)才可以用于細(xì)胞融合。

細(xì)胞融合前1~2天,根據(jù)細(xì)胞生長狀況和密度進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)(一般融合一只免疫鼠的脾臟細(xì)胞需要3~4個(gè)10mm培養(yǎng)皿的SP2/0細(xì)胞,細(xì)胞密度~80%)。

備注:

1、SP2/0細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,生長速度較快,應(yīng)及時(shí)換液和傳代;

2、SP2/0狀態(tài)的好壞將直接影響后續(xù)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,所以調(diào)整好細(xì)胞狀態(tài)是極其關(guān)鍵的一步。

2.2.2 融合準(zhǔn)備

在一些細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,單個(gè)或少數(shù)分散的細(xì)胞不易生長繁殖,若加入其它活細(xì)胞,則可促進(jìn)這些細(xì)胞的生長繁殖,所加入的這種細(xì)胞數(shù)被稱為飼養(yǎng)細(xì)胞。常用的飼養(yǎng)細(xì)胞有:小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、小鼠脾臟細(xì)胞或胸腺細(xì)胞,也有人用小鼠成纖維細(xì)胞系3T3經(jīng)放射線照射后作為飼養(yǎng)細(xì)胞。此外,也可以選擇添加特殊的細(xì)胞培養(yǎng)因子試劑完全代替飼養(yǎng)層細(xì)胞的使用,實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)操作。

在單抗制備實(shí)驗(yàn)中,融合時(shí)會(huì)選擇小鼠腹腔巨噬細(xì)胞做飼養(yǎng)層,克隆化時(shí)則選擇脾臟細(xì)胞做飼養(yǎng)細(xì)胞。

備注:

1、飼養(yǎng)細(xì)胞的量為一般為2×10^4或10^5 cell/well;

2、本文將闡述制備飼養(yǎng)層細(xì)胞和添加細(xì)胞培養(yǎng)因子試劑兩種實(shí)驗(yàn)方法。

2.2.2.1 方法一:融合用飼養(yǎng)層細(xì)胞制備

腹腔巨噬細(xì)胞來源方便并且制備簡單,最重要的是其中的巨噬細(xì)胞具有清除死亡細(xì)胞和吞噬細(xì)胞碎片的能力,因此一般融合時(shí)會(huì)選擇腹腔巨噬細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞。腹腔巨噬細(xì)胞于融合前1天進(jìn)行準(zhǔn)備。一只鼠的腹腔巨噬細(xì)胞可以制備2塊96孔的飼養(yǎng)層細(xì)胞板,一只免疫鼠的脾臟可用于融合4塊96孔板。

1、取7~8周齡Balb/c雌鼠脫頸椎處死,于75%酒精浸泡消毒5min;

2、超凈工作臺(tái)內(nèi)用無菌手術(shù)剪將小鼠腹部剪開一個(gè)小口,鑷子剝離周圍皮膚以便露出腹腔;

3、手術(shù)剪將腹腔剪開一個(gè)小口,用一次性無菌膠頭滴管將預(yù)冷的不完全培養(yǎng)基注入腹腔內(nèi),沿著腹腔壁多次吹洗,將腹腔內(nèi)的細(xì)胞充分懸起后轉(zhuǎn)移至新的50ml離心管,重復(fù)3~4次;

4、1000~1200rpm,~5min離心,棄上清,加入適量預(yù)冷的不完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000~1200rpm,~5min離心,洗滌細(xì)胞2~3次;

5、棄上清,加入1ml完全1640培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,然后稀釋至所需用量體積,100μl/well加入96孔板;

6、37℃,5%CO2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng),備用。

2.2.2.2 方法二:添加細(xì)胞培養(yǎng)因子

1、融合和亞克隆階段:10%(v/v)Hybridoma Feeder添加因子加入到完全培養(yǎng)基中;

2、細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)和復(fù)蘇階段:2.5%-5%(v/v)Hybridoma Feeder添加因子加入到完全培養(yǎng)基中

備注:

添加因子只作為細(xì)胞培養(yǎng)添加劑使用,不可代替血清。

2.2.3 免疫鼠脾細(xì)胞的準(zhǔn)備

細(xì)胞融合當(dāng)天取三天前沖擊免疫過的小鼠作為免疫脾細(xì)胞的來源,一般情況下免疫小鼠的脾臟體積大小是正常小鼠的兩倍。

1、免疫小鼠脫頸椎處死,于75%酒精浸泡消毒5min;

2、在超凈工作臺(tái)內(nèi)用高壓滅菌好的手術(shù)剪將小鼠胸腔左下側(cè)開一個(gè)小口;

3、用鑷子摘取脾臟后放于含3~5ml不完全培養(yǎng)基的皿中,剔除周圍結(jié)締組織;

4、將脾臟轉(zhuǎn)移至潤濕的0.4目篩網(wǎng)中用研磨棒輕柔研磨,加入適量預(yù)冷的不完全培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,1000~1200rpm,~5min離心;

5、棄上清,適量不完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000~1200rpm,~5min離心,洗滌細(xì)胞2~3次;

6、適量不完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)后備用。

備注:

研磨脾臟時(shí)需要保證篩網(wǎng)濕潤且研磨力度不能過大,全程注意無菌操作。

2.2.4 融合

準(zhǔn)備~25ml不完全培養(yǎng)基作為融合終止液與配置好的PEG溶液提前放于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱進(jìn)行預(yù)熱。融合前用槍將SP2/0細(xì)胞從培養(yǎng)皿底吹下懸起,收集于50ml離心管內(nèi),1000~1200rpm,~5min離心,洗滌細(xì)胞2~3次,再加入10ml不完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)后備用。

1、分別將1×10^8小鼠脾細(xì)胞和2×10^7骨髓瘤細(xì)胞重懸于25ml無血清培養(yǎng)基中(用50mL一次性離心管);

備注:

融合時(shí)將骨髓瘤細(xì)胞SP2/0和免疫鼠脾細(xì)胞比例調(diào)至1:5~1:10的融合效果最好

2、200~400g,離心5~10 min,棄去上清;

備注:

盡量去除干凈,避免稀釋PEG影響融合效果

3、輕拍管底,充分打散沉淀,將1ml經(jīng)過37℃預(yù)熱的50% PEG 1450勻速加入離心管中(用1ml的移液器,1 min內(nèi)加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;

4、持續(xù)緩慢的用槍頭攪拌1~2分鐘;

5、勻速加入1ml經(jīng)過37℃預(yù)熱的不完全培養(yǎng)基(1 min內(nèi)加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;

6、再勻速加入3ml經(jīng)過37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基(3 min內(nèi)加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;

7、再加入10ml經(jīng)過37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基。37℃孵育5 min,200~400g離心~5分鐘取細(xì)胞;

8、棄上清,加入10ml完全培養(yǎng)基輕輕懸起融合的細(xì)胞后再稀釋至所需用量(融合4塊96孔板,需加至42ml);

9、將融合好的細(xì)胞加入到完全培養(yǎng)基中種入昨日提前準(zhǔn)備好的96孔細(xì)胞板中,100μl/well,37℃,5%CO2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng);

10、融合后24小時(shí)內(nèi)補(bǔ)加含HAT的選擇性補(bǔ)液培養(yǎng)基,50μl/well;

11、補(bǔ)液兩天后進(jìn)行第一次半換液,每孔吸出50~80μl的培養(yǎng)基,第一次半換液培養(yǎng)基內(nèi)HAT含量減半,50μl/well;

12、再過兩天后進(jìn)行第二次半換液,每孔吸出50~80μl培養(yǎng)基,換成含HT的培養(yǎng)基,50μl/well。

備注:

左圖為融合后圖片,大而圓形透亮的細(xì)胞為融合成功細(xì)胞;右圖為篩選培養(yǎng)后的圖片,圓形透亮的為篩選培養(yǎng)成功的雜交瘤細(xì)胞。

三、雜交瘤細(xì)胞克隆化?

雜交瘤細(xì)胞的克隆化一般是指針對(duì)于抗體陽性孔的克隆化。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)操作中,會(huì)有數(shù)個(gè)或者更多的克隆,其中可能包括所需的抗體分泌細(xì)胞,抗體非分泌細(xì)胞,及其他無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。克隆化的原則是,對(duì)于檢測抗體陽性的雜交克隆盡早進(jìn)行克隆化。因?yàn)榉强贵w分泌細(xì)胞的生長速度比抗體分泌細(xì)胞的生長速度快,抗體分泌細(xì)胞的生長就會(huì)被抑制,最終二者的競爭結(jié)果會(huì)造成抗體分泌細(xì)胞的丟失。

一般通過使用有限梯度稀釋法對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行多次克隆化篩選,在細(xì)胞群體中選育出遺傳穩(wěn)定的同源細(xì)胞系。該細(xì)胞系是可以穩(wěn)定分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。

3.1 實(shí)驗(yàn)用材料

主要試劑:

1、胎牛血清

2、HT選擇性培養(yǎng)基 50X

3.2 方法

有限稀釋法克隆化

第一次克隆化時(shí),融合后的雜交瘤細(xì)胞狀態(tài)還很脆弱,所以我們使用含HT和20%胎牛血清的完全1640完全培養(yǎng)基進(jìn)行克隆化。后續(xù)可以使用正常的含10~20%血清的完全培養(yǎng)基進(jìn)行克隆化。克隆化時(shí)選擇脾臟細(xì)胞做飼養(yǎng)細(xì)胞,具體實(shí)驗(yàn)操作步驟如上。

1、把挑選出來的陽性孔內(nèi)的細(xì)胞完全吹懸后鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù),在5ml青霉素小瓶或離心管內(nèi)用完全1640培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋;

2、每一濃度梯度的細(xì)胞懸液加入96孔脾細(xì)胞飼養(yǎng)層板中,100μl/well,同一濃度梯度種2~3列細(xì)胞孔,一般一個(gè)陽性孔我們會(huì)選擇有限梯度稀釋后克隆化半塊或者一塊96孔板,相應(yīng)的稀釋3~4個(gè)濃度梯度;

3、37℃,5%CO2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng),第5~6天后鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),適當(dāng)補(bǔ)加培養(yǎng)基,同時(shí)可用記號(hào)筆在板底圈出單/少個(gè)雜交瘤細(xì)胞團(tuán)生長的細(xì)胞孔,方便后續(xù)檢測使用;

4、當(dāng)標(biāo)記孔內(nèi)的雜交瘤細(xì)胞布滿1/10底面積時(shí),可用間接ELISA法檢測細(xì)胞上清中的抗體含量。

備注:

1、圖為單個(gè)雜交瘤細(xì)胞團(tuán);

2、每次克隆化檢測后,優(yōu)先挑選細(xì)胞上清中抗體效價(jià)高,孔內(nèi)單/少個(gè)克隆細(xì)胞生長,形態(tài)良好的細(xì)胞孔以進(jìn)行下一次的克隆化。并根據(jù)細(xì)胞生長狀況盡快進(jìn)行下一次克隆化;

3、第一次克隆化時(shí)為了確保雜交瘤細(xì)胞能夠穩(wěn)定生長,可在克隆化時(shí)將每孔內(nèi)的細(xì)胞密度稀釋至5、2、1個(gè)細(xì)胞。后續(xù)克隆化時(shí)為了保證可以逐漸形成單克隆細(xì)胞株,可將每孔內(nèi)的細(xì)胞密度調(diào)至2、1、0.5個(gè)細(xì)胞。

四、抗體亞型鑒定及腹水制備?

不同亞型的抗體在結(jié)構(gòu)上有所區(qū)別,其免疫源性與在體內(nèi)發(fā)揮的作用存在差異,在生物體內(nèi)具有不同的功能效應(yīng),因此在篩選雜交瘤時(shí)需要確定高表達(dá)量的陽性克隆是否是所需要的亞型分子;而且,明確抗體的亞型有助于選擇更加適合的抗體純化方法,從而獲得更高的抗體獲得率;對(duì)抗體進(jìn)行進(jìn)一步的細(xì)分,并進(jìn)行抗體亞型鑒定,對(duì)于疾病作用機(jī)理的研究和抗體藥物的開發(fā),均有重要意義。

大量生產(chǎn)單克隆抗體的方法主要有三種:(1) 大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中獲取的抗體含量為10~60μg/ml;(2) 將對(duì)數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞按1~3×10^7/ml接種于小鼠皮下,每處注射0.2ml,每只注射2~4個(gè)點(diǎn),待10~20天左右即可進(jìn)行采血,抗體的含量可達(dá)1~10mg/ml;(3)小鼠腹腔注射適量佐劑后,將雜交瘤細(xì)胞按照1~2×10^6cell/只的量打進(jìn)腹腔。在小鼠瀕死時(shí)收集腹水,一般一只小鼠可獲得5~10ml腹水,抗體含量可達(dá)5~10mg/ml。

4.1 實(shí)驗(yàn)用材料

4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

腹水制備時(shí)通常選用10~11周齡的Balb/c雌鼠,所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均皮毛光亮,精神狀態(tài)良好。維持21~27℃的飼養(yǎng)溫度且每日提供光照/黑暗環(huán)境12/12h循環(huán)。

4.1.2 主要試劑

1、小鼠單抗Ig類/亞類鑒定用ELISA試劑盒(IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\ IgM\IgA\Kappa\Lambda)

2、腹水專用佐劑

4.2 方法

4.2.1 抗體亞型鑒定

抗體是在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的“Y”構(gòu)型的免疫球蛋白,基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異,可細(xì)分為重鏈和輕鏈。重鏈可分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE5類,其相應(yīng)的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類的Ig具有不同的特征,即使是同一類的Ig,因其鉸鏈區(qū)氨基酸組成和重鏈二硫鍵的數(shù)量、位置不同,又可將同類Ig分為不同的亞類。輕鏈可分為κ鏈和λ鏈兩類,根據(jù)λ鏈恒定區(qū)個(gè)別氨基酸的差異,又可將λ鏈分為λl、λ2、λ3和λ4四個(gè)亞型。

常規(guī)小鼠單抗Ig類/亞類鑒定用ELISA試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類。

4.2.2 腹水制備

1、將佐劑注射Balb/c小鼠腹腔,每只0.3~0.5ml處理腹腔7~15天左右,將篩選出來的雜交瘤細(xì)胞株擴(kuò)大培養(yǎng)后接種到Balb/c小鼠腹腔內(nèi);

2、注射雜交瘤細(xì)胞7天左右小鼠腹部會(huì)開始腫脹,此時(shí)每日都應(yīng)進(jìn)行觀察,以防小鼠突然死亡,當(dāng)小鼠出現(xiàn)進(jìn)食困難,行走不便,毛色暗沉?xí)r將小鼠處死,進(jìn)行一次性腹水的提取;

3、小鼠脫頸椎處死,于75%酒精浸泡消毒5min;

4、用手術(shù)剪將小鼠腹部剪開一個(gè)小口,剝離周圍皮膚露出腹腔,隨后將腹腔剪開一個(gè)小口,將膠頭滴管伸入腹腔內(nèi)將積液吸取至干凈的15ml離心管內(nèi);

5、3000rpm,10min離心,無色透明的中間層即為腹水。

備注:

離心后可以將腹水轉(zhuǎn)移至新的離心管內(nèi)-20℃凍存(上層為礦物油層,下層為細(xì)胞層),也可與滅菌甘油等比混勻后放于-20℃冰箱長期保存。

實(shí)驗(yàn)相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)產(chǎn)品
KX0210041QuickAntibody-Mouse 5W
BDXB-0001SP2/0骨髓瘤細(xì)胞
BF08003X50%PEG1450即用型溶液
BF08001HAT選擇性培養(yǎng)基 50X
BF08002HT選擇性培養(yǎng)基 50X
BF08005-500胎牛血清(雜交瘤細(xì)胞專用)
CM-2001 Hybridoma Feeder添加因子
BF16001小鼠單抗Ig類/亞類鑒定用ELISA試劑盒(含輕鏈)(IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\ IgM\IgA\Kappa\Lambda)
KX0210048-500腹水專用佐劑

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KX0210042QuickAntibody-Mouse 3w
KX0210043QuickAntibody-Mouse 2w
KX0210045QuickAntibody-Rabbit 8w
KX0210044Quick CTL細(xì)胞免疫佐劑
KX0210049新型乳劑(佐劑)
KX0210046-10弗氏完全佐劑
KX0210047-10弗氏不完全佐劑
BF06210-10小鼠IgG(Fc片段)快速檢測卡
BF06124-2Elisa通用試劑盒(HRP標(biāo)記抗小鼠,TMB顯色反應(yīng))
BF06126-2Elisa通用試劑盒(生物素標(biāo)記抗小鼠,HRP標(biāo)記親和素,TMB顯色反應(yīng))

更多產(chǎn)品信息請(qǐng)點(diǎn)擊:雜交瘤融合篩選

關(guān)于我們

博奧龍是一家由留學(xué)歸國人員創(chuàng)辦的生命科學(xué)領(lǐng)域技術(shù)研發(fā)企業(yè),專業(yè)從事新型生化試劑的研發(fā)和銷售。公司理念是通過自主創(chuàng)新的品牌產(chǎn)品改變傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)?zāi)J剑股茖W(xué)研究變得更輕松、更高效。

公司成立八年多來推出了上萬種自主品牌產(chǎn)品,其中包括QuickAntibody?免疫佐劑、QuickShuttle?轉(zhuǎn)染試劑、QuickFreezing?細(xì)胞凍存液、QuickVerification?膠體金檢測卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗體等多種獨(dú)特的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)產(chǎn)品。秉承“專業(yè)、創(chuàng)新”的理念,公司將繼續(xù)在擅長專業(yè)領(lǐng)域做強(qiáng)做大,為客戶提供更多的創(chuàng)新產(chǎn)品和服務(wù),力爭成為國際知名的品牌生化試劑公司。

公司主要產(chǎn)品有抗體制備全套產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗體、近300種病理級(jí)抗體、近3000余種病毒蛋白及病毒抗體,另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。

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