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博奧龍純化填料——用的酣暢淋漓,分得干干凈凈

作者:蘇州博特龍免疫技術有限公司 2022-04-12T16:13 (訪問量:11838)

親和層析介質

高效+簡單+快速

親和層析是應用生物高分子與配基可逆結合的原理,將配基通過共價鍵牢固結合于載體上而制得的層析系統。這種可逆結合的作用主要是靠生物高分子對它的配基的空間結構的識別。常用的生物親和關系有酶-底物、底物類似物、抑制劑、激活劑、輔因子,抗體-抗原,激素-受體蛋白、載體蛋白,外源凝集素-多糖、糖蛋白、細胞表面受體,核酸-互補核苷酸序列、組蛋白、核酸結合蛋白等,具有高效、簡單、快速的優點,是當前最為理想的分離純化蛋白的方法。

博奧龍純化填料

高效+簡單+快速

蛋白純化是一項復雜的過程,包括粗分離、初步純化和精細純化等多個步驟。實驗方法包括抽提、沉淀、離心、層析等多種手段。博奧龍純化填料純化方式主要采用親和層析方式,它是以高度交聯的瓊脂糖凝膠為基質,通過化學偶聯方式或在天然蛋白的基礎上進行生物加工獲得穩定配體,此層析介質(基質+配體組成)具有高流通、高載量、特異性優良、耐壓等特點,可以在相對較高的流速下對目的蛋白進行純化。目前,博奧龍擁有蛋白A、蛋白G、蛋白L、YFP標簽、RFP標簽、MYC標簽、HA標簽、HIS標簽、離子交換、抗原親和等純化填料可供選擇,如下表所示:


純化填料測試效果

高效+簡單+快速


實驗小貼士

在對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解,可嘗試幾種不同的純化方法:

一、使用最通用的凝膠過濾方法,選擇分離范圍廣泛的介質如Superose、Sephacryl HR根據分子量將樣品分成不同組份。
二、用含專一配體或抗體的親和層析 介質結合目標蛋白。也可用各種活化偶聯介質偶聯目標蛋白的底物、受體等自制親和介質,再用以結合目標蛋白。一部即可得到高純度樣品。
三、大體積的樣品、常使用離子交換層析 加以濃縮及粗純化。高鹽洗脫的樣品,可再用疏水層析純化。疏水層析利用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理,洗脫樣品又可直接上離子交換等吸附性層析。兩種方法常被交替使用于純化流程中。

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