一、細(xì)胞凍存
細(xì)胞凍存是生物實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常使用的方式，也是細(xì)胞保存的主要方法之一。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳突變，已經(jīng)建立好的特定細(xì)胞系對(duì)研究人員來說是非常寶貴的，還有對(duì)于來不及篩選的陽性雜交瘤細(xì)胞等等，細(xì)胞的凍存存儲(chǔ)都是十分必要的。常規(guī)細(xì)胞凍存技術(shù)將細(xì)胞用凍存液重懸后，經(jīng)過一定方式的梯度降溫，最后置于液氮中超低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。
1、細(xì)胞凍存中的問題
細(xì)胞這一微小生命體的主要成份是液態(tài)的水，其結(jié)構(gòu)精巧復(fù)雜，內(nèi)部任何的物理損傷對(duì)于它都是十分嚴(yán)重的。低于零度的條件下水會(huì)結(jié)冰。懸浮在純水中的細(xì)胞，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞，從而引起細(xì)胞死亡，這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度的降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。若細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，在復(fù)溫時(shí)，大量水分會(huì)因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇一般采用“慢快融”的方法，該方法能較好地保證細(xì)胞存活率。細(xì)胞凍存的原則是慢凍，主要是防止細(xì)胞在冷凍過程中形成冰晶，對(duì)細(xì)胞造成損害，慢凍一般是分別經(jīng)過4度，-20度，-80度過夜，再轉(zhuǎn)移到液氮的梯度降溫；復(fù)蘇細(xì)胞的原則是快融，在復(fù)蘇時(shí)，一般以很快的速度升溫，1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫，細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶，也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時(shí)間，從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生，凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。
2、常規(guī)細(xì)胞凍存方式的缺點(diǎn)
常規(guī)細(xì)胞凍存液包含了細(xì)胞凍存所需的所有組分，主要成分是DMEM、胎牛血清及二甲基亞砜（DMSO）等，DMSO是常用的細(xì)胞冷凍保護(hù)劑，其分子量小、溶解度大、細(xì)胞膜通透性好，能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，降低冰點(diǎn)、延緩凍存過程，同時(shí)提高細(xì)胞膜通透性，提高細(xì)胞內(nèi)離子濃度，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少細(xì)胞損傷達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。（1）傳統(tǒng)4℃、-20℃、-80℃過夜、轉(zhuǎn)液氮罐的手動(dòng)梯度降溫方式，操作步驟多，耗時(shí)耗力。
（2）程序性降溫盒價(jià)格高，占用-80℃冰箱空間，且一般含有異丙醇，難清理。
（3）細(xì)胞最后需要轉(zhuǎn)移到液氮罐中保存，液氮罐一般有專人管理，放樣取樣多有不便。
（4）傳統(tǒng)凍存液含有血清成分，存在微生物污染風(fēng)險(xiǎn)，且批次不穩(wěn)定。
二、QuickFreezing 細(xì)胞凍存液
Biodragon研發(fā)的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的特色產(chǎn)品：QuickFreezing細(xì)胞凍存液，具有諸多優(yōu)勢：
（1）無需繁瑣耗時(shí)的程序性降溫，可以直接放于-80℃冰箱，可長期保存
（2）無血清，無蛋白，化學(xué)組成明確，批次穩(wěn)定
（3）不會(huì)引入造成細(xì)胞污染的外源因子
（4）使用常規(guī)含血清凍存液容易聚團(tuán)的細(xì)胞，如293細(xì)胞等，非常適合用本產(chǎn)品
為了方便客戶更好的使用，北京博奧龍公司還對(duì)產(chǎn)品的包裝規(guī)則進(jìn)行了特別的設(shè)計(jì)：
（1）包裝設(shè)計(jì)為10ml×5，無需再次分裝，在使用過程中不易造成不同使用者或不同細(xì)胞間的交叉污染。
（2）特別為使用96孔板等凍存細(xì)胞的客戶，提供QuickFreezing-2×M細(xì)胞凍存液規(guī)格，其為普通細(xì)胞凍存液兩倍濃度，客戶可直接從96孔板中置換一半體積的凍存液進(jìn)去，即可直接放入-80℃冰箱凍存，簡便快捷。
說明：若-80℃冰箱開閉頻繁，會(huì)導(dǎo)致冰箱局部溫差，影響細(xì)胞凍存效果，保存時(shí)間超過半年以上或珍貴細(xì)胞種子樣品，建議由-80℃冰箱轉(zhuǎn)移到液氮存儲(chǔ)！
| 貨號(hào) | 名稱 | 特點(diǎn) | 規(guī)格 |
| KX0310041 | QuickFreezing-M | 常規(guī)哺乳動(dòng)物專用 | 5×10ml |
| KX0310041-30 | 30ml | ||
| KX0310041-100 | 100ml | ||
| KX0310042 | QuickFreezing-2×M | 整板凍存專用 | 5×10ml |
| KX0310042-30 | 30ml | ||
| KX0310042-100 | 100ml | ||
| KX0310043 | QuickFreezing-I | 昆蟲細(xì)胞專用 | 5×10ml |
| KX0310043-100 | 100ml |
三、公司簡介
Biodragon是一家由留學(xué)歸國人員創(chuàng)辦的生命科學(xué)領(lǐng)域高新技術(shù)企業(yè)，專業(yè)從事新型生化試劑的研發(fā)和銷售。公司理念是通過自主創(chuàng)新的品牌產(chǎn)品改變傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑股茖W(xué)研究變得更輕松、更高效。公司成立八年多來推出了上萬種自主品牌產(chǎn)品，其中包括QuickAntibody?免疫佐劑、QuickShuttle?轉(zhuǎn)染試劑、QuickFreezing?細(xì)胞凍存液、QuickVerification?膠體金檢測卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗體等多種獨(dú)特的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)產(chǎn)品。秉承“專業(yè)、創(chuàng)新”的理念，公司將繼續(xù)在擅長專業(yè)領(lǐng)域做強(qiáng)做大，為客戶提供更多的創(chuàng)新產(chǎn)品和服務(wù)，力爭成為國際知名的品牌生化試劑公司。
公司主要產(chǎn)品有抗體制備全套產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗體、近300種病理級(jí)抗體、近3000余種病毒蛋白及病毒抗體，另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
四、聯(lián)系我們
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