維真生物可為您提供Cre/loxP系統(tǒng)控制的各種熒光蛋白，光遺傳，化學遺傳等多種工具載體以及慢病毒、腺病毒和AAV產(chǎn)品，并提供Cre/loxP系統(tǒng)控制的基因表達、shRNA載體構建及定制病毒包裝服務。
?
維真Cre/LoxP重組系統(tǒng)的AAV載體構建和病毒包裝服務
01 依賴Cre重組酶誘導表達的FLEX-ON系統(tǒng) 結合組織特異性的啟動子和不同的AAV血清型，維真提供的FLEX-ON系統(tǒng)能幫您獲得更精準的組織特異性控制和時間控制。 在FLEX-ON系統(tǒng)中，目的基因反方向位于啟動子下方，兩側分別連接兩個“頭對頭”的loxP。Cre重組酶不存在時，目的基因不能表達；當Cre重組酶存在時，可以誘導目的基因的“翻轉”，從而表達。 圖1. 維真提供依賴Cre的FLEX-ON系統(tǒng)示意圖(左); ? 02 依賴Cre重組酶反式剪接系統(tǒng) —— 輕松擁有“表達大基因的AAV” 較小的包裝能力（小于5kb）使得AAV應用受到限制。維真為您提供依賴Cre的反式剪接系統(tǒng)，讓您輕松擁有“表達大基因的AAV”。 多個重組AAV的共轉染效率高達90%，維真將較大基因分為兩部分構建于兩個AAV載體上。通過ITR的重組、mRNA剪接和Cre/LoxP消除ITR對轉錄的抑制作用，實現(xiàn)目的蛋白的表達。相比于單個載體，維真提供的依賴Cre的反式剪接系統(tǒng)的表達效率約20%。 圖2. 維真生物提供依賴Cre的反式剪接系統(tǒng)示意圖(左); ?維真Cre/LoxP重組系統(tǒng)成功案例分享 ? 01 “A cortico-basal ganglia-thalamo-cortical channel underlying short-term memory”（點擊查看原文） ? 病毒產(chǎn)品 AAV9-EF1a-DIO-eArch3.0-EYFP AAV9-EF1a-DIO-hChR2(H134R)-mCherry 實驗動物 Gad2-IRES-Cre 小鼠 注射部位 SNr或TRN區(qū) 注射量 100 nL 注射速率 10 nl/min ? 研究者首先確立了基底節(jié)系統(tǒng)對STM的重要性。在延遲反應任務中，小鼠的胡須在采樣區(qū)間接受兩種不同的擾動，在短暫的延遲后小鼠需要根據(jù)胡須刺激的強弱有選擇性地舔左邊或右邊的水嘴來獲取獎賞。在采樣區(qū)間，既沒有感覺信息的輸入也沒有運動信息的輸出，因此該時間段編碼了短時記憶。研究者采用光遺傳技術，將CRE依賴的AAV9-EF1a-DIO-hChR2(H134R)-mCherry和AAV9-EF1a-DIO-eArch3.0-EYFP先后注入Gad2-IRES-Cre轉基因小鼠基底節(jié)輸出核團黑質(zhì)網(wǎng)狀部SNr，通過光纖照射丘腦VM（腹內(nèi)側）區(qū)在短時記憶區(qū)間特異性地激活或抑制SNr到VM的投射。同時發(fā)現(xiàn)光遺傳操控特異地影響小鼠的選擇偏好性，激活左半腦的投射產(chǎn)生對同側的偏好性，抑制則產(chǎn)生對對側的偏好性，說明基底節(jié)系統(tǒng)對工作記憶有重要作用。 圖3. SNr-丘腦通路對短時記憶至關重要 ? 02 “Multi-omics analysis identifies FoxO1 as a regulator of macrophage function through metabolic reprogramming”（點擊查看原文） ? 巨噬細胞是宿主防御機制的中樞效應細胞，可以吞噬和消化雜質(zhì)、死亡細胞和病原體，在先天性和適應性免疫反應的協(xié)調(diào)中發(fā)揮重要作用。巨噬細胞是一種具有可塑性和多能性的細胞群體，可以根據(jù)生物能量或生物合成的需要在M1型和M2型兩種表型之間切換。已知巨噬細胞中的代謝通路變化調(diào)節(jié)其表型和功能。然而，巨噬細胞代謝重編程的轉錄機制尚不清楚。轉錄因子叉頭盒蛋白1(FoxO1)是叉頭盒蛋白家族的一員，在炎癥、代謝、信號轉導等一系列細胞過程中發(fā)揮著重要作用，已有研究表明，F(xiàn)oxO1在調(diào)節(jié)巨噬細胞功能中起著關鍵作用，F(xiàn)oxO1可以通過上調(diào)主要組織相容性復合體II（MHC-II）表達，調(diào)節(jié)感染中的巨噬細胞極化，并促進腫瘤相關巨噬細胞（TAMs）的抗腫瘤功能，但對其在巨噬細胞代謝和功能中的作用知之甚少。 本研究中，作者確定了FoxO1是通過代謝重編程調(diào)節(jié)巨噬細胞功能的。首先通過培養(yǎng)FoxO1敲除（FoxO1mKO）小鼠及其同窩小鼠的骨髓源性巨噬細胞（BMDMs），并利用轉錄組學和蛋白質(zhì)組學進行分析，發(fā)現(xiàn)缺乏FoxO1導致巨噬細胞呈M2樣表型，同時炎癥反應和遷移相關基因的表達降低。進一步利用高通量篩選分析技術發(fā)現(xiàn)FoxO1缺失的巨噬細胞遷移速度減緩、抗腫瘤功能受損。此外，基因富集分析顯示FoxO1缺失的巨噬細胞糖酵解相關基因表達減少，與M2樣巨噬細胞表達模式相似；進一步研究發(fā)現(xiàn)FoxO1缺失的巨噬細胞糖酵解被抑制，導致其功能改變和腫瘤抑制能力降低，表明FoxO1通過代謝調(diào)節(jié)巨噬細胞功能。本研究表明FoxO1在代謝和巨噬細胞功能之間起橋梁作用。 ? 病毒產(chǎn)品 Ad5-CMV-Cre-GFP 感染細胞 小鼠骨髓源性巨噬細胞BMDMs MOI 400 ? 如下圖所示，使用腺病毒Ad5-CMV-Cre-GFP感染FoxO1fl/fl 小鼠巨噬細胞，成功使FoxO1基因表達受限，同時糖酵解關鍵基因PKM2、HK2、Glut1、Eno1等表達均降低，糖酵解活性下降，并與M2巨噬細胞糖酵解基因表達模式相似。 ? 03
地 址： 高新區(qū)港源四路416號 聯(lián)系人： 展經(jīng)理 電 話： 400-077-2566 傳 真： 0531-88896821 Email：market@wzbio.cn
IF 16.2！浙大梁平/復旦唐逸泉團隊《Circulation Research》發(fā)文：TMC6是心肌肥厚治療新靶點，AAV基因治療潛力顯著
(2026-05-11T00:00 瀏覽數(shù):7008)
IF 21.1 線粒體“黑化”啟動骨關節(jié)炎軟骨鈣化？空軍軍醫(yī)大學牛麗娜、焦凱教授團隊揭示骨關節(jié)炎早期病變新機制
(2026-05-06T00:00 瀏覽數(shù):6609)
重磅合作！維真生物獲信念醫(yī)藥頂尖基因治療AAV血清型獨家授權
(2026-04-27T00:00 瀏覽數(shù):9597)
Neuron重磅：拯救“記不住”與“忘不掉”！清華大學鐘毅教授團隊發(fā)現(xiàn)記憶調(diào)控的雙引擎機制
(2026-04-20T00:00 瀏覽數(shù):11593)
Autophagy：突破自噬認知！張琳/趙曉輝團隊揭示肝病治療的潛在新靶點—ATG9A-PLA2G6軸
(2026-04-13T00:00 瀏覽數(shù):12363)
Cell Res(IF 25.9)南方醫(yī)科大學周偉杰團隊揭秘結直腸癌如何“逃過”免疫系統(tǒng)追殺（腺病毒感染類器官）
(2026-04-07T00:00 瀏覽數(shù):13075)
突發(fā)心梗為何兇險？齊魯醫(yī)院陳玉國/徐峰團隊揭示靶向TRIM21/ALDH2可逆轉心梗后心臟不良重構
(2026-03-30T00:00 瀏覽數(shù):16710)
IF16.2！南科大顧東風/白波團隊在 Circulation Research 發(fā)表動脈粥樣硬化新成果
(2026-03-23T00:00 瀏覽數(shù):14416)
子宮腺肌病不孕新突破！浙大邵逸夫醫(yī)院張松英/戴永東團隊解鎖 SLC7A11-G6PD軸的 “抗氧化守護”
(2026-03-16T00:00 瀏覽數(shù):16755)
Nature子刊：重慶醫(yī)科大學聯(lián)合中山大學揭示NPM1 乳酸化驅動鐵死亡機制，破解腎移植DGF難題
(2026-03-09T00:00 瀏覽數(shù):17326)
維真FLEX-ON實驗圖(右)
維真生物的依賴Cre的反式剪接系統(tǒng)實驗圖
山東維真生物科技有限公司
商家主頁
相關咨詢