原代細胞一般是指機體的組織經過蛋白酶消化或者是其他的方法獲得單個細胞并在體外鏡下模擬機體培養的細胞，我們統稱為原代細胞。
原代細胞的培養相較于細胞系的培養要更加繁瑣和復雜化操作，同時也會更容易出現細胞的分化老化以及死亡和雜細胞污染等等情況，但是由于課題的選擇不同，我們需要選擇進行原代細胞提取培養時我們就需要逐步摸索出原代細胞最好的提取方法，Biochannel特地針對原代細胞的提取乃至培養做了一系列的實驗，致力于為大家的科研之路鋪路搭橋。
準備工作
1、將豚鼠處死后浸泡在75%的乙醇中進行小鼠表皮消毒，時間控制在5min左右；
2、提前配置1%P/S的PBS或Hank’s溶液作為清洗溶液；
3、胰蛋白酶、D/F12培養基水浴鍋中37℃預熱。
原代提取
1、取出豚鼠腎臟
2、將1%雙抗的PBS倒入培養皿中，清洗掉腎臟表面包裹的油脂
3、繼續使用1%雙抗的PBS進行清洗，盡可能的將其表面油脂清洗干凈，一般重復清洗三次
4、把胰酶倒入培養皿中，用剪刀將腎臟在胰酶中剪碎（或研磨器），剪成肉泥狀最佳
5、轉移至新的50mIEP管中，后將胰酶倒入其中，一般5-6倍的胰酶，37°C消化45min-60min，每5min進行震蕩一次
6、先把培養基(D/F12) 倒入新的50ml離心管中，再將胰酶混懸液通過細胞篩過篩入培養基中
7、將其混勻之后用1000rpm離心5min，棄去上清，用5ml完全培養基重懸至T25瓶中放置在培養箱中培養，次日觀察是否有細胞貼壁。
細胞培養過程
細胞過篩分離為單個細胞后，采用生航的DMEM/F12培養基和生航的特級胎牛血清BC20230426批次配制成的完全培養基（DMEM/F12+10%FBS）培養，在二氧化碳培養箱放置平衡到第三天后，有明顯的貼壁細胞呈現：
細胞在培養至第五天，傳代一次，更換為生航的DMEM高糖和10%的生航特級胎牛血清繼續培養，細胞生長狀態良好，已凍存保種。