在細胞培養實驗中,作為細胞培養的主力軍,培養基是細胞培養的基礎,它提供了細胞所需的營養物質、生長因子以及適當的環境條件。還有另一種用于支持微生物生長和繁殖的營養的培養基,就是微生物培養基。
微生物培養基的故事始于16世紀末,簡易的顯微鏡在荷蘭誕生,這為人類與微生物的相識創造了條件。17世紀80年代,列文虎克用自制顯微鏡觀察了多種物質,發現了許多“活的小動物”,從此打開了人類對微生物研究的大門。常見的有血瓊脂平板培養基、巧克力瓊脂培養基、麥康凱瓊脂培養基(MAC)等。
血平板血平板作為常用的細菌培養基,廣泛應用于細菌的分離、培養和特性鑒定。其主要成分包括脫纖維羊血或兔血、普通營養瓊脂(如哥倫比亞瓊脂),以及一些營養物質如酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物等。主要用途有以下幾種:
細菌培養:血平板適用于各類細菌的生長,特別是需要較高營養條件的細菌。
溶血試驗:血平板常用于觀察細菌的溶血特性,例如鏈球菌的α、β溶血現象。
抗生素敏感性測試:血平板可用于檢測細菌對抗生素的敏感性。

巧瓊脂培巧克力瓊脂培養基是一種用于分離和培養嗜酸菌和嗜血桿菌的非選擇性培養基,是通過加熱至80°C使紅細胞破裂并釋放其內容物,賦予培養基巧克力棕色,并富含對某些細菌生長至關重要的血紅蛋白、血素(X因子)和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD或V因子)。制備原料有牛肉浸出液、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、無菌脫纖維馬血、羊血或兔血等。

在臨床微生物實驗中一般用于分離和鑒定導致嚴重感染的人類細菌,以及進行這些細菌的質量控制和敏感性測試。巧克力瓊脂培養基可能允許正常菌群或污染物過度生長,影響目標細菌的分離。因此,在使用時需結合其他生化和/或血清學測試來確認微生物的身份及其對抗生素的敏感性。
麥康凱瓊脂培養基(MAC)
麥康凱瓊脂培養基(MacConkey Agar,簡稱MAC)是一種選擇性培養基,主要用于分離和鑒別革蘭氏陰性桿菌,特別是腸桿菌科細菌,如大腸埃希菌、沙門氏菌和志賀氏菌等。其主要成分包括牛肉蛋白胨、乳糖、膽鹽、氯化鈉、中性紅、結晶紫和瓊脂。
制備時將牛肉蛋白胨、乳糖、膽鹽、氯化鈉、中性紅、結晶紫和瓊脂等成分按比例混合,加入蒸餾水溶解。加熱煮沸后,調節pH至7.2±0.2(25℃)。在121℃下高壓滅菌15分鐘。冷卻至45-50℃后,傾注平板備用。主要用途有以下幾種:
食品檢測:用于食品中腸道致病菌的分離和鑒定。
臨床檢驗:用于糞便樣本中腸道桿菌的分離和鑒定。
化妝品和藥品檢測:用于檢測化妝品和藥品中的腸道致病菌。

我國在20世紀50年代末開始研制干燥培養基,近年來我國培養基事業近年來有了飛速發展,大大縮短了與發達國家的差距。商品培養基正逐步被微生物學工作者所接受,微生物培養基在微生物學研究、醫學診斷、環境監測、食品工業、藥物研發和基因工程等領域均有著重要的應用。
