最近和好多實驗室的小伙伴交流，大家普遍吐槽的一個點就是——公共細胞房的污染問題！辛辛苦苦養的細胞，說污染就污染，真的太讓人抓狂了。
其實很多污染，都藏在我們容易忽略的細節里。讓我們拋開復雜的理論，直接聊聊那些每天都要打交道的設備器材，看看怎么用幾個小方法，把污染風險降到最低！
小編將分為幾篇給大家仔細介紹細胞培養室各個器材使用時需要注意的事項。
第一彈：細胞培養的存放“溫室”
二氧化碳培養箱
二氧化碳細胞培養箱主要由箱體、溫控系統、濕度控制系統、氣體控制系統和過濾系統等部分組成，旨在為細胞提供穩定的生長環境。作為細胞培養的存放“溫室”培養箱內的污染主要來自細菌、真菌（霉菌和酵母菌）和支原體。其滋生根源可歸結為“高溫、高濕、營養豐富”的環境，而這恰恰是細胞培養所需的條件。在使用過程中需要注意的小細節有哪些呢？
1. 水盤——污染的“萬惡之源”
隱患：培養箱底部的加熱水盤為了維持濕度，提供了持續的液態水和恒定的溫度（37°C），這簡直是微生物繁殖的“完美溫泉”。一旦污染，污染源會通過水蒸氣循環擴散至整個箱體。
· 污染原因：
使用非無菌水：直接加入自來水或普通超純水，自帶大量微生物。
長期不更換：水盤成為微生物的溫床，細菌、真菌
清潔不徹底：只換水，不擦拭水盤和內壁，殘留的微生物會迅速再生。
· 預防手段：
使用無菌水，在無菌水中加入消毒劑或者抑菌劑（森貝伽BC-BA02-100mL），定期更換水盤中的液體，更換時注意清洗擦拭水盤。
圖1 培養箱水盤換液 圖片來源網絡
圖2 森貝伽 培養箱安全衛士
2. 空氣循環系統——污染的“擴散器”
隱患：即使只有一個樣本發生污染，其釋放的微生物氣溶膠會被培養箱內的循環風扇吹到各個角落，導致交叉污染，全軍覆沒。
· 污染原因：
HEPA過濾器失效或未安裝：HEPA過濾器是阻擋外界和內部顆粒的關鍵。過濾器過期或未定期更換，則形同虛設。
風扇攪動：雖然保證了溫濕度均勻，但也加速了污染物的傳播。
· 預防手段：
選擇培養箱時注意是否安裝HEPA過濾器，注意細胞培養無菌操作確保放進培養箱的細胞無問題。
開關培養箱時注意隨開隨關，避免長時間開放培養箱同時減少開關頻率。
3. 內膽結構與表面——污染的“藏身之所”
隱患：灑落的培養基、血清等營養物質會殘留在擱架、內壁角落、門封條等處，為微生物生長提供“養料”。
· 污染原因：
設計缺陷：舊式培養箱內部的縫隙、螺絲孔、不平整的焊接點容易積聚污垢。
清潔死角：日常清潔無法觸及所有角落，導致污染持續存在。
· 預防手段：
每月進行一次到兩次培養箱整體消殺，消殺時用酒精擦拭培養箱內壁、擱架、門的內部面。
將細胞轉移到培養箱時注意培養瓶外部擦拭，酒精棉擦拭或酒精噴壺噴灑，培養液的用量確保無液體溢出。
培養箱切勿傾斜放置，培養箱周圍不要有噪音劇烈震動劇烈器材避免培養箱傾斜晃動影響培養瓶的靜置培養。
4. 用戶操作——污染的“引入者”
隱患：用戶是最大的污染變量。
· 污染原因：
未消毒的手套和物品外表面：將未經酒精徹底擦拭的培養瓶、試劑瓶放入箱內。
頻繁或長時間開門：導致內部環境劇烈波動，并引入外界不潔空氣。
物品堆放過密：影響空氣流通，造成局部微環境差異，并增加物品碰撞、灑漏的風險。
· 預防手段：
合理規劃培養箱內部空間，避免“頂格”“靠邊”“手拉手”。頂格：培養瓶壘的過高，這樣的話不易拿取容易導致培養瓶傾倒；靠邊：不要緊靠培養箱內壁，培養箱內壁有空氣循環進出口靠邊放置容易導致二氧化碳進入培養瓶影響培養液ph值；手拉手：培養瓶放置時可以豎向堆疊，一摞一摞間保持間隙方便拿取也保證培養箱內部空氣循環的流通。
減少培養箱開門時間和頻率。
圖3 拿取細胞時用酒精進行噴灑，培養箱門隨開隨關
培養箱的污染防控是一個系統工程，而非單點任務。 其核心在于：
切斷水源：嚴格管理水盤，杜絕微生物在水盤中得到溫養。
凈化空氣：依靠有效的HEPA過濾器。
消除營養：通過徹底清潔，清潔掉培養箱內的培養液溢出和水蒸氣污漬。
規范操作：實驗人員嚴格遵守無菌操作
最有效的策略是：將“日常維護”作為鐵律，并將“高溫滅菌”作為最終的、定期的保障手段。 只有這樣，才能為珍貴的細胞提供一個真正安全、穩定的“家”。
