細胞培養(yǎng)是每個實驗人員都會使用的技術(shù)，其準確性和可重復性對于實驗結(jié)果的可靠性至關(guān)重要。然而，支原體污染作為一種常見且隱蔽的威脅，對細胞培養(yǎng)的影響不容忽視。
支原體是什么？
支原體是目前已知一類能在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小的原核細胞微生物，無細胞壁，直徑為0.1-0.3μm，且形態(tài)易變，極易通過除菌過濾器。大部分支原體繁殖速度比細菌慢，細胞培養(yǎng)過程中遇到的支原體95%都來自于以下四種支原體：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾支原體，其中萊氏無膽甾支原體為牛源性。
采用常規(guī)的顯微鏡無法直接觀察到支原體，當細胞（特別是傳代細胞）被支原體污染后，細胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變，而細胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響，因而細胞被支原體污染一般難以察覺。因此細胞都需要定期（如每個月）進行支原體污染的檢測。
支原體對細胞培養(yǎng)的危害：
1. 細胞生長抑制
支原體通過與細胞競爭營養(yǎng)資源、產(chǎn)生毒素或干擾細胞信號傳導，顯著抑制細胞的生長速率和增殖能力。這導致實驗所需細胞數(shù)量不足或細胞狀態(tài)不佳，影響實驗的進行和結(jié)果的準確性。
2. 基因表達異常
支原體感染能誘導細胞產(chǎn)生氧化應激反應，影響DNA修復機制，導致基因表達模式發(fā)生變化。這種基因表達的異常會干擾對特定基因功能的研究，使得研究結(jié)果失真。
3. 蛋白質(zhì)合成干擾
支原體污染可能改變細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成與降解平衡，影響蛋白質(zhì)的功能和細胞間的相互作用，進而影響實驗結(jié)果的可靠性。
4. 細胞凋亡增加
支原體感染可觸發(fā)細胞凋亡程序，導致細胞死亡。這不僅減少了可用于實驗的活細胞數(shù)量，還可能混淆對細胞存活和凋亡機制的理解。
5. 實驗結(jié)果的不可重復性
支原體污染導致的細胞生理狀態(tài)變化，使得實驗結(jié)果難以在不同實驗室或不同時間點重復，嚴重阻礙了科學研究的進展。
在實驗室的日常研究，為了確保科研工作順利進行，定期檢測細胞培養(yǎng)物是否存在支原體污染是很重要的。
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