一、細胞概述
HacaT(人永生化角質形成細胞),該細胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚,角蛋白、角化細胞交聯外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
二、細胞培養條件
三、細胞培養建議
1、細胞復蘇:將含有1ml細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5ml培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心3min,棄去上清液,補加4-6ml完全培養基吹勻。然后將細胞懸液加入培養瓶中過夜,第二天檢查細胞密度并換液。
2、細胞傳代:當細胞密度達到80%-90%,即可進行傳代培養。
2.1棄去培養液上清,用不含鈣、鎂離子的PBS BC-BPBS01潤洗細胞2次。
2.2加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-EDTA)BC-CE-005于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化3-5min,鏡下觀察細胞大部分圓縮并脫落,肉眼觀察細胞培養瓶上部細胞呈掛線狀滑落,迅速拿回操作臺,于手心輕敲幾下培養瓶,可見細胞呈沙粒狀滑落,加5ml以上含10%血清的完全培養基終止消化。
2.3輕輕吹打細胞,完全脫落分散后吸出,在1000RPM條件下離心3min,棄去上清液,補加1-2ml吹勻。
2.4按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞重
四、細胞圖片
