細胞污染是我們在培養時最不愿意遇到卻又或多或少無法避免的問題，今天我們就來聊 -聊細胞的污染類型。
細胞污染其實是一個廣義的說法，我們認為只要是混入細胞的培養環境中會對細胞生存,
有害的成分以及造成我們細胞培養不純的異物都應該被視作污染。
細胞污染一般不能夠被完全消除，
但我們能夠通過我們的操作等外理減少細服污染發生的頻率和降低細胞污染后果的嚴重性。
支原體污染
1. 大小0.1~0.3um左右，一般肉眼顯微鏡難以觀察；
2. 結構簡單，需要依附宿主細胞，可與細胞共存；
3. 無細胞壁，一般抗生素作用不了。
支原體污染后變化
1. 多數細胞在形態上少有明顯變化
2. 培養液中碎片增加
3. 細胞生長緩慢，易聚團
4. 鏡下觀察有不動的小黑點培養液不變渾濁，但很快變為黃色
支原體污染電鏡圖
（正常的牛源細胞系MDBK）
（受到支原體污染的MDBK細胞）
支原體污染檢測方法
- CR檢測法
- 受到支原體污染的MDBK細胞法
- 支原體培養法
- 相差顯微境檢測
- 支原體檢測試劑盒
細胞污染處理辦法
細菌污染
預防細菌污染一般用雙抗生素；
污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規培養液，此法在污染早期有效。
真菌污染
預防真菌污染一般是培養體系中加入三抗；
污染后建議丟棄細胞，徹底消毒滅菌細胞房和CO2培養箱，扔掉可能被污染的培養基，對用過的實驗器材進行滅菌。
支原體污染
1. 細胞營養馴化→優質細胞群的篩選→細胞清洗→反復離心洗滌。
2. 根據支原體對熱敏感的特點，將受支原體污染的細胞放在 41℃作用 4~5 小時，最長不超過18小時，以殺滅支原體。但高溫對細胞生長本身有影響。
3. 建議在實驗前先用少量細胞摸索最適合的溫度和時間，盡可能保證殺滅支原體而細胞本身又不受損傷。
4. 使用支原體清除試劑
毒性低：選用天然抗生素，對細胞毒性小，不影響后續細胞實驗；
操作簡單：只需將產品添加至支原體污染的培養基中孵育即可；
起效快、周期短：最快3天即可見效，一個周期（大約7天）即可清除干凈；
穩定性強：-20℃試劑能較長時間保存并保持高效用；
去除范圍廣：幾乎能去除所有類型的支原體。
在任何情況下，完全去除細胞中的微生物污染是及其困難的!過度使用抗生素可能產生更強抗性的菌株，撤藥后極易復發。
對于易重新獲得的細胞株，建議直接處理培養物，防止污染擴散！同時重新以新批次細胞進行實驗，節約時間，減少風險。
