“黑膠蟲”是近十幾年才發現的一種細胞污染物，“黑膠蟲”的分類目前尚無鑒定確認。
“黑膠蟲”可寄生于動物細胞，也可以生存于培養基中，依靠細胞和培養基中的營養為生，并隨細胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細胞競爭性生長，開始時對細胞并沒有什么影響，但當黑膠蟲的數量多到一定程度的時候， 細胞生長就會受到影響直至死亡，嚴重影響了科研活動的開展和進行。所以“黑膠蟲”的污染常在培養條件改變、細胞接種密度降低、細胞狀態不佳時顯現并使實驗中斷，尤其在凍存細胞復蘇時可造成大量細胞死亡。
目前比較公認的觀點認為“黑膠蟲”是一種微生物，增殖緩慢但對細胞有損害，數量達到一定程度可引起細胞死亡，其來源可能是細胞本身的污染或從動物取材時污染造成的。該污染在全世界細胞實驗室中普遍存在，解決該問題是一個世界性難題。
關于是什么的問題的討論
A. 玻璃培養瓶中的類似氧化硅的東西（曾經有文獻報道過）
B. 據說這是黑膠蟲，又有人說是原生動物，好象也沒個統一的說法
C. 據病毒所和軍科院鑒定是一種寄生于牛血清內的一種原蟲，似乎和草履蟲和變形蟲有類似之處，然而由于課題經費不夠而不能繼續進行下去。
D. 有人說是納米級的細菌
其他的特點
（1）形態上有些像細菌，直徑約在0.5~1微米，
（2） 在400X倒置顯微鏡小，有典型的布朗運動（不規則的原地小距離抖動）。
（3） 細胞內好像也有存在，
（4） 但并不引起培養液混濁
（5） 時間稍長，細胞狀態明顯惡化，并最后死亡
大家的處理：
1.換好一點的血清（我覺著和血清的關系不大）。
2.如果是貼壁細胞的話，可用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。若是懸浮的話，就不太好處理拉，可以向其中少加一點滋養細胞（從小鼠腹腔內取的巨噬細胞，這種細胞不分裂，過一陣就死掉了，做抗體雜交瘤融合的同志肯定知道）。加滋養細胞對有黑膠蟲的剛復蘇的細胞很有效！還有就是實驗環境要注意好，保持細胞間整個環境的潔凈度。
3.換用進口的一次性塑料培養瓶。
4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按首次使用無菌室做，細胞重新復蘇。
5. 在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打，沖洗干凈后再加入培養液，堅持天天洗，傳代時加生理鹽水再離心一次，接種密度稍大一些，一段時間后，蟲子就會大大減少，對細胞的生長也不會有大的影響。
6.有材料稱minocycline具有一定的作用，可以和換液結合起來使用。
在細胞培養實驗中，人們遇到的黒膠蟲并不都是一樣的，有像細菌的、有像支原體的、有像原蟲的、有像真菌的，還有像細胞碎片的。在國內個實驗室的器材條件參差不齊，而且實驗人員的操作質量也不盡相同，同一種現象也可能有些許差異，當用描述出來的現象的差異可能變大也可能變小。所以很多人看到細胞被細菌污染了，不好處理，而卻描述出來的現象和流傳的黑膠蟲類似，就會把培養失敗的原因歸結到無法處理的黒膠蟲污染，甚至可能說它發現的是真正的黑膠蟲。這樣的事情多了，黑膠蟲就會人為的變種，像什么的都有。黑膠蟲是否存在，還有待于科學的發展。但有一點可以肯定的，大部分人發現的“黒膠蟲”并不是真正那個未知的黒膠蟲，而是不很常見的細菌、真菌、原蟲等微生物污染。
森貝伽-Biochannel 為您提供了以下幾種產品來解決：
1、青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液（100×）
兩性霉素B（Amphotericin B），為多烯類抗真菌藥物。對本品敏感的真菌有新型隱球菌、皮炎芽生菌、組織胞漿菌、球孢子菌屬、孢子絲菌屬、念珠菌屬等。
2、鹽酸環丙沙星溶液（20mg/mL）
環丙沙星(Ciprofloxacin)屬于一種高效廣譜抗生素，CAS號為85721-33-1，分子量為331.35。環丙沙星抑菌原理在于抑制細菌DNA解旋酶，阻止細菌復制，所以快速降低細菌繁殖，是殺菌型抗菌藥。環丙沙星作用方式特殊，除喹諾酮類外，與其它任何抗生素不同。因此，環丙沙星對青霉素類，頭孢菌素類，氨基糖甙類和四環素類耐藥菌珠均顯較高抗菌能力。
3、支原體清除試劑
成分：分別是大環內酯類抗生素和四環素類衍生物。
|
|