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干貨|RAW264.7細(xì)胞傳代攻略

作者:上海中喬新舟生物科技有限公司 2024-07-18T00:00 (訪問量:60545)

免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)人體的各種生理過程。因此,提高機體免疫力,增強免疫功能,對于預(yù)防疾病的發(fā)生,恢復(fù)健康至關(guān)重要。活化的巨噬細(xì)胞可直接或間接參與免疫系統(tǒng)的免疫反應(yīng),通過吞噬作用清除抗原異物、衰老細(xì)胞和細(xì)胞碎片,進(jìn)而分泌活性氧、活性氮和促炎因子。

巨噬細(xì)胞(Macrophages)屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。小鼠巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞系RAW264.7是醫(yī)學(xué)研究中最常用的小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞系,RAW264.7細(xì)胞株是約30年前從生長在BAB/14小鼠體內(nèi)的腫瘤中獲得的,這是一種BALB/c IgH同源株,接種了Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)。

巨噬細(xì)胞的形態(tài)會隨著細(xì)胞活性、功能、環(huán)境和藥物的改變而改變。例如,相關(guān)研究顯示一種低分子量肽(NJP)處理引起RAW264.7細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,胞體增大呈圓形和不規(guī)則形狀,偽足擴張,而正常對照組巨噬細(xì)胞呈圓形,形態(tài)正常。很多實驗者發(fā)現(xiàn)在RAW264.7細(xì)胞正常培養(yǎng)中,細(xì)胞也會出現(xiàn)多邊形和不規(guī)則形狀,并伴有許多偽足的生成,細(xì)胞貼壁能力超強。圖片

據(jù)了解,實驗者甚至用0.25%的胰酶消化30min,結(jié)果細(xì)胞仍“無動于衷”。

經(jīng)過本公司技術(shù)員不斷探究,

總結(jié)出了關(guān)于RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)的若干注意事項,

希望可以幫到大家。

 

 

培養(yǎng)注意事項

1. 該細(xì)胞傳代時不需要用胰酶消化。傳代時,吸走部分培養(yǎng)液,留下少許培養(yǎng)液(如T25培養(yǎng)瓶留下7-8ml),用無菌細(xì)胞刮刮拭培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,吹打后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)。

2. 該株巨噬細(xì)胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞密度較大時,細(xì)胞會輕微脫落變圓或者許多細(xì)胞堆在一起,有些細(xì)胞甚至脫落漂浮,這些漂浮的細(xì)胞是存活的,在傳代時應(yīng)收集起來離心,細(xì)胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。

3. 血清質(zhì)量差異可能引起細(xì)胞貼壁能力變化,應(yīng)選用高質(zhì)量的胎牛血清。

4. 培養(yǎng)條件、運輸、環(huán)境變化等因素會影響此細(xì)胞的狀態(tài),因此收到細(xì)胞后需要調(diào)整一段時間,請耐心培養(yǎng)。

5. 強烈推薦使用本公司對應(yīng)的培養(yǎng)基,減少細(xì)胞培養(yǎng)過程的變因。

 

相關(guān)培養(yǎng)基推薦

名稱:Raw264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基

貨號:ZM0098

規(guī)格:125ml*4/500ml  

圖片

 

Raw264.7細(xì)胞專用培養(yǎng)基成分包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、雙抗等細(xì)胞生長需要的其他添加物。

由中喬新舟技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,可保持細(xì)胞良好的生長狀態(tài)。

 

名稱:RAW264.7細(xì)胞破骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基

貨號:PCM-1-006

規(guī)格:100ml/200ml

該培養(yǎng)基包括促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞向破骨方向分化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,細(xì)胞因子以及青鏈霉素。

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