很多培養細胞的同學都反映在培養過程中出現了黑色點狀，條狀物質，經驗較少的同學就會很驚慌，覺得是不是就是一些污染，是不是染菌了，但是經驗豐富的老炮都知道，這里面的門道有多深！
“黑點”分類
1、非污染物的黑點物質——培養體系里不穩定的內含物沉淀，死亡細胞的碎片，細胞的分泌物等。
圖1 MGC-803人胃癌細胞
圖1中的紅色方框框出來的黑色點狀物就是上面所說的非污染物的“黑點”物質
2、自主快速游動的黑點物質——外來的不明微生物，細菌污染物等
Ncm460大量不明游動黑點
“黑點”問題的改善措施
1. 離心分離：對于懸浮細胞，可以通過離心（300-600 rpm，5-6分鐘）去除細胞碎片和上清液，然后更換新的培養瓶。對于貼壁細胞，可以使用PBS潤洗2-3次，輕輕拍打培養瓶以去除貼壁不牢的碎片和顆粒，再進行消化處理。
2. 控制傳代時機：掌握細胞傳代的最佳時機，避免細胞老化或過度生長，減少血清凍融次數，以降低黑點的產生。
3. 優化培養基條件：確保培養基的pH值適宜，避免過高或過低影響細胞生長。此外，選擇高質量的血清，并根據需要調整血清濃度。
4. 防止污染：定期檢測和篩查污染，保持環境清潔和無菌操作，使用75%乙醇消毒培養基和其他試劑瓶子的外表面。如果懷疑是微生物污染，可以使用抗生素處理。
5. 多次傳代：對于原代細胞中的雜質，多次傳代可以消除這些小黑點。
6. 更換培養基和條件：如果上述方法無效，可以考慮更換培養基和培養條件。
如果是污染風險去除措施
BC-BA04-1mL黑膠蟲清除試劑
“黑膠蟲”是一種在細胞培養中常見的污染物，其具體身份和來源在學術界存在爭議。一些研究認為黑膠蟲是一種微生物，可能是細菌、真菌或原蟲等。例如，有研究通過16S rDNA鑒定技術將黑膠蟲歸類為短波單胞菌屬的新菌株，命名為Brevundimonas sp. GYBL3（如視頻）。然而，也有觀點認為黑膠蟲可能并非真正的生物體，而是無機物，如玻璃培養瓶中的硅顆粒。
黑膠蟲污染通常表現為細胞培養基中出現黑色顆粒，這些顆粒在顯微鏡下會進行布朗運動。這種污染會對細胞生長產生不利影響，導致細胞狀態變差、生長緩慢甚至死亡。因此，清除黑膠蟲污染是實驗室中的一項重要任務。森貝伽&生航黑膠蟲清除試劑（BC-BA04）可以有效的控制和殺滅血清、培養基、細胞中的大部分種類“黑膠蟲”，幾乎不影響細胞本身的生長增殖，同時對常見的細菌也有一定的清除作用，保證細胞實驗的順利進行。