在細胞生物學(xué)領(lǐng)域，快速、準確地區(qū)分活細胞與死細胞至關(guān)重要。Arcegen推出的Calcein-AM/PI活死細胞雙染試劑盒，依托先進的熒光標記技術(shù)，為細胞活死檢測提供更直觀、更高效的分析工具。
檢測原理
Calcein-AM：一種活細胞染色試劑，發(fā)綠色熒光（Ex=490 nm, Em=515 nm）。 在傳統(tǒng)的Calcein（鈣黃綠素）基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基團，增加了疏水性，可自由進入細胞，在活細胞內(nèi)部，被水解為具有強綠色熒光的Calcein，該產(chǎn)物無法透出細胞膜，從而在活細胞內(nèi)積累并發(fā)出明顯綠色熒光。細胞毒性極低，是活細胞標記的理想選擇。
碘化丙啶（PI）：一種細胞核染色試劑，在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光（Ex=535 nm, Em=617 nm）。不能通過活細胞膜，可通過死細胞或受損細胞的細胞膜，與細胞核DNA結(jié)合并產(chǎn)生紅色熒光，從而特異性地標記死細胞。
兩種染料均可被490nm光激發(fā)，可在熒光顯微鏡下同時觀察活細胞（綠色）與死細胞（紅色），實現(xiàn)細胞活死狀態(tài)的快速判別。
產(chǎn)品特點
高特異性
Calcein-AM僅能被活細胞內(nèi)的酯酶水解，生成Calcein，產(chǎn)生的綠色熒光信號直接反映活細胞數(shù)量；PI無法透過完整細胞膜，嚴格標記死細胞。兩者互補性強，背景信號低，不會彼此干擾。
毒性極低
Calcein-AM為活細胞染料，毒性極低，常規(guī)工作濃度對細胞增殖、趨化性、線粒體功能均無明顯抑制，也不影響后續(xù)轉(zhuǎn)染或流式分選。
兼容性強
適用于多種貼壁或懸浮細胞類型，檢測結(jié)果不會受到細胞種類的影響。
使用便捷
每次檢測僅需在清洗過細胞后將配制好的染色液加入細胞中孵育即可，隨后通過熒光顯微鏡或酶標儀觀察結(jié)果。
應(yīng)用廣泛
可應(yīng)用于細胞增殖與毒性分析、抗癌藥物或化合物篩選、細胞凋亡與壞死研究、免疫細胞活性檢測等多種實驗場景。
檢測效果
對A375膠質(zhì)瘤細胞進行Calcein-AM/PI活死染色（Calcein-AM=2μM，PI=4.5μM），染色時間15min，結(jié)果顯示活死細胞可清晰區(qū)分，merge后無重疊部分，兩種染料檢測效果良好且互不干擾。
A：Calcein-AM染色圖；B：PI染色圖；C：Merge圖
使用建議
為獲得最優(yōu)結(jié)果，建議根據(jù)細胞類型和密度優(yōu)化染料濃度及孵育時間。
Calcein-AM/PI活死細胞雙染試劑盒是一種經(jīng)過充分驗證的細胞活力分析工具，無論是基礎(chǔ)研究還是藥物開發(fā)，均是進行細胞活性評估的優(yōu)質(zhì)選擇。
產(chǎn)品推薦
| 產(chǎn)品應(yīng)用 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
| 細胞活死鑒別 | C331308 |