血清是基礎培養基中極為重要的細胞生長和粘附因子、激素、脂質和礦物質來源。此外,血清還可調節細胞膜通透性,并可作為向細胞內運送脂質、酶、微量營養素和微量元素的載體。牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。
胎牛血清( Fetal Bovine Serum)是通過無菌手術剖腹后取胎,穿刺心臟采血制成。胎牛血清中所含的對培養細胞有害的成分(抗體等)最少,故質量最高。
血清原料
母牛在懷孕五至八月齡胎 時,將胎牛取出并進行心臟 穿刺取血。穿刺取血可較大 程度的避免外界的污染。
血清用途
是細胞培養中重要的天 然培養基,含有豐富的細胞 生長必須的營養成份,常用 于動物細胞的體外培養。
血清獲得量
一個3月齡的胎牛可產生 150mL左右的血清,6月齡 和9月齡的胎??煞謩e產生 350mL和550mL左右的血清。
血清獲得量
一個3月齡的胎牛可產生 150mL左右的血清,6月齡 和9月齡的胎??煞謩e產生 350mL和550mL左右的血清。
胎牛血清供應商與牛肉加工商簽訂 合同,在特定時間收集胎牛血,因母牛 的妊娠周期影響,血清原料來源每年只 能獲得兩次。
作為畜牧業的副產品,產量十分有限, 受到天然環境、食物衛生、經濟條件及 疫情等各種因素的影響,優質的胎牛血 清就更加稀有。
胎牛血清 生產工序
1、原料采集
對懷孕8個月左右的 母牛進行剖腹產,因子 宮收縮極快,故在胎牛 取出的同時要快速縫合, 然后進行心臟穿刺采血。
2、原料加工
將采集好的原血盡 快放入冷凍離心機中, 離心后收集血清,凍 存。
3、質量檢測
做好原血清解凍工作, 熱風均勻循環解凍后過 濾,避免病原微生物的 污染。此過程會對血清 檢測和定級。
4、分裝運輸
無菌過濾的血清立即 無菌裝瓶,成品血清分 裝貼標后需迅速儲存在 -20℃以下快速冷凍24 小時以上。
胎牛血清檢測標準
1、外觀觀測
人眼目測品質優良的血清通常 會偏棕黃色或是琥珀黃,澄清透 明,輕搖無沉淀。
2、微生物檢測
牛血清制品應過濾除菌后制 成,不能含有牛腹瀉病毒,不能 含有噬菌體、支原體、真菌污染。
3、總蛋白含量
測量血清中蛋白質總含量可確認動 物的年齡及符合產品的規格,血清中 蛋白質含量應該在3.5%~5%(w/V)。
4、 內毒素
內毒素會因為啟動補體活性而 產生細胞毒性,血清中細菌內毒 素含量不應高于5EU/ml.
5、 血紅蛋白
血紅蛋白含量不高于20mg/dl, 決定血清色澤的因素是血紅蛋白和 膽紅素,前者含量高,則呈現偏紅 的顏色,后者高則呈現為金黃色。
6、 滲透壓
胎牛血清滲透壓的檢測一般采 用冰點法,滲透壓摩爾濃度 (mOsmol/kg):280-360之間。
7、免疫球蛋白
免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡 情況,好的胎牛血清不含IgM,IgG的含量也較低。 可以通過血清蛋白電泳SDS檢測。
8、其他
不管是國產還是進口血清,都是不測抗生素的 (無四環素胎牛血清除外),若抗生素血清中殘 留很高,對細胞培養極為不利,血清質量也不好。
