細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位，在目前醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和生物學(xué)等領(lǐng)域，細(xì)胞都是科研實(shí)驗(yàn)中的重要組成環(huán)節(jié)，細(xì)胞學(xué)相關(guān)延伸在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用已經(jīng)遍布了各個(gè)領(lǐng)域。無(wú)論是藥物研究、基因表達(dá)還是疾病表現(xiàn)等等方面，都需要細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證展示。
細(xì)胞培養(yǎng)操作，會(huì)因?yàn)閷?shí)驗(yàn)人員的操作與整體實(shí)驗(yàn)環(huán)境的不同而受到較大的影響，兩株相同的細(xì)胞在不同環(huán)境下通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)人員的操作，所生長(zhǎng)表現(xiàn)出的形態(tài)也會(huì)出現(xiàn)截然不同的反饋。在細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)中，每一個(gè)步驟都會(huì)有許多細(xì)節(jié)需要注意到，而正是這些細(xì)枝末節(jié)的問(wèn)題，就會(huì)導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的潰敗。南京森貝伽生物深耕于細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)線，今天干貨鴨就會(huì)將眾多細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中匯總出的細(xì)胞培養(yǎng)整理成《細(xì)胞培養(yǎng)操作指南》分享給大家，希望能夠讓各位科研同學(xué)的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助。
細(xì)胞培養(yǎng)疑問(wèn)匯總
新獲得細(xì)胞處理
細(xì)胞獲得途徑主要有留存、購(gòu)買、轉(zhuǎn)贈(zèng)等途徑，在得到新細(xì)胞的第一件事就是觀察外觀，首先需要確認(rèn)培養(yǎng)瓶是否破損漏液，整體封口膜是否完好，如果是凍存細(xì)胞則需要觀察凍存管是否有裂縫，整體是否保存完好。
新細(xì)胞的培養(yǎng)條件
每一款細(xì)胞都會(huì)有不同的培養(yǎng)體系，部分細(xì)胞可能會(huì)適配多種培養(yǎng)體系，但是不能直接更改，因?yàn)榧?xì)胞在傳代過(guò)程中都是經(jīng)過(guò)該培養(yǎng)體系進(jìn)行馴化的，如果臨時(shí)更改，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞大面積死亡。
外購(gòu)細(xì)胞的錯(cuò)誤處理
在外部購(gòu)買細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活率低、不貼壁乃至死亡，可能導(dǎo)致的原因可能會(huì)有：沒(méi)有繼續(xù)使用配套培養(yǎng)體系或者自用配套產(chǎn)品品質(zhì)不達(dá)標(biāo)；血清濃度選擇錯(cuò)誤；細(xì)胞解凍時(shí)間過(guò)久；懸浮細(xì)胞/未貼壁細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；二氧化碳培養(yǎng)箱故障；細(xì)胞收貨后放置在-80℃冰箱太久。
凍存管細(xì)胞注意事項(xiàng)
在用鑷子或止血鉗取凍存管時(shí)用力不當(dāng)或者是凍存管質(zhì)量不佳容易導(dǎo)致凍存管破裂。從液氮中取出后封口膜會(huì)變脆，需要更加注意瓶蓋松動(dòng)或脫落。