實驗室里又開始忙碌起來,培養箱里嗷嗷待哺的細胞,給還沉浸在暑假生活的你添了一份真實,又要開始操心細胞的生長啦。順利的時候,細胞乖乖的,長勢喜人,可是不順利的時候,就會出現各種各樣的問題,細胞污染啦、生長緩慢啦、形態看著不對勁啦、死細胞漂一層啦......著實讓人應接不暇。
畢竟細胞作為一種體外培養的物質,受許多外界的影響,培養基、血清、孵育溫度等等,還有一種影響因素就是抗生素,一般來說,抗生素不是細胞培養的必須品,注意無菌操作,實驗室使用的新潔爾滅擦拭消毒、紫外照射都可以保證細胞的安全性,但對于新手小白來說,無菌操作一旦細節做得不到位,細胞會出現各種各樣的情況,這時候我們可以用抗生素針對性的來解決這些問題。在原代細胞培養中,由于污染風險較高,通常會建議使用如青霉素-鏈霉素(雙抗溶液)來減少污染發生的幾率。我們來了解一些常見的抗生素種類及其作用。

青霉素和鏈霉素:這是最常使用的雙抗(Penicillin-Streptomycin),通常被推薦用于細胞培養液中。其工作濃度分別為青霉素100U/ml和鏈霉素0.1mg/ml,主要是針對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌。

慶大霉素:與青霉素和鏈霉素一起使用時,形成三抗,這種組合可以更有效地防止微生物污染,工作濃度一般為50 μg/ml

兩性霉素B:有時也會與青霉素和鏈霉素結合使用,形成三抗,以增強抗真菌效果。
卡那霉素:這是一種廣譜抗生素,常用于細胞培養基中,以防止細菌污染。
氯霉素、紅霉素、四環素:這些抗生素通過抑制蛋白質或核酸合成來發揮作用,從而影響微生物的生長,雖然它們在某些情況下可用于細胞培養,但一般不推薦常規使用。
但還是要提醒大家注意的是,抗生素也是有毒性的,有部分抗生素的藥效濃度水平和毒性濃度還是比較接近的,對細胞有一定的影響。長期添加抗生素也會促使耐藥株的產生,導致輕度污染一直存在,一旦暫停抗生素的使用,隨之而來的嚴重污染可能會波及整個實驗室。
所以污染問題還是要做好細胞房的消毒管理以及提高細胞培養過程中的無菌操作意識!
