兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）酶聯免疫分析（ELISA）-分析方法-資訊-生物在線

兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）酶聯免疫分析（ELISA）

試劑盒使用說明書

本試劑僅供研究使用? ?????目的：本試劑盒用于測定兔血清，血漿及相關液體樣本中核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）的含量。

實驗原理：

? 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）水平。用純化的兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65），再與HRP標記的核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）濃度。

試劑盒組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個	1個
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標準品：450ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標準品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（

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