植物氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用? ?????目的：本試劑盒用于測定植物組織，細胞及其它相關樣本中氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）含量。
實驗原理：
? ?本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）水平。用純化的植物氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT），再與HRP標記的氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中植物氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）濃度。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
|
說明書 |
1份 |
1份 |
|
|
封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
|
|
密封袋 |
1個 |
1個 |
|
|
酶標包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
|
標準品：180 U/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
|
標準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2 |
|
酶標試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
|
濃縮洗滌液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2 |
標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟：
1.???????? 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為120 U/L<