人肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用? ?????目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab）的含量。
實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab）水平。用純化的人肝細(xì)胞核因子4α抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab），再與HRP標(biāo)記的肝細(xì)胞核因子4α抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人肝細(xì)胞核因子4α抗體（HNF4α Ab）濃度。
試劑盒組成：
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試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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說明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
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密封袋 |
1個 |
1個 |
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酶標(biāo)包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
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標(biāo)準(zhǔn)品：360ng/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2 |
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酶標(biāo)試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
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20倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
30ml×1瓶 |
2 |
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過