人生長激素釋放多肽(Ghrelin )酶聯免疫分析(ELISA) 試劑盒使用說明書 本試劑僅供研究使用? ?????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中生長激素釋放多肽(Ghrelin )的含量。 實驗原理: 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人生長激素釋放多肽(Ghrelin )水平。用純化的生長激素釋放多肽(Ghrelin )抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入生長激素釋放多肽(Ghrelin ),再與HRP標記的生長激素釋放多肽(Ghrelin )抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長激素釋放多肽(Ghrelin )呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人生長激素釋放多肽(Ghrelin )的含量。
試劑盒組成: 試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存 說明書 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1個 1個 酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 標準品:3600 ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存 樣本處理及要求: 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可
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