人異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說明書 本試劑僅供研究使用? ?????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中異常凝血酶原(APT)的含量。 實驗原理: ? ??本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中 人異常凝血酶原(APT)水平。用純化的人異常凝血酶原(APT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入異常凝血酶原(APT),再與HRP標(biāo)記的異常凝血酶原(APT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的異常凝血酶原(APT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人異常凝血酶原(APT)的含量。
試劑盒組成: 試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存 說明書 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1個 1個 酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2 標(biāo)準(zhǔn)品:90ng/ml 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2 酶標(biāo)試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2 濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2 樣本處理及要求: 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2 地 址: 上海市楊浦區(qū)民京路658 聯(lián)系人: 陳小姐 電 話: 13788942867 傳 真: Email:13788942867@126.com,kanubio@126.com
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