人腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑僅供研究使用? ?????目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
? 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)水平。用純化的人腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)，再與HRP標(biāo)記的腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人腫瘤特異生長(zhǎng)因子(TSGF)濃度。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
|
說(shuō)明書(shū) |
1份 |
1份 |
|
|
封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
|
|
密封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
|
|
酶標(biāo)包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
|
標(biāo)準(zhǔn)品：4500 ng/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
酶標(biāo)試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
|
濃縮洗滌液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2-8℃保存 |
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1.???????? 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為3000ng/L
地 址： 上海市楊浦區(qū)民京路658 聯(lián)系人： 陳小姐 電 話： 13788942867 傳 真： Email：13788942867@126.com,kanubio@126.com
上海卡努生物科技有限公司
商家主頁(yè)