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技術(shù)介紹 | 乙酰化修飾蛋白組學(xué)
作者：上海阿趣生物科技有限公司 2021-11-24T14:35 (訪問(wèn)量:12163)
;PingFang SC", "Hiragino Sans GB", "Microsoft YaHei UI", "Microsoft YaHei", Arial, sans-serif; font-size: 17px; font-style: normal; font-variant-ligatures: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: 400; letter-spacing: 0.544px; orphans: 2; text-align: justify; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 2; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; background-color: rgb(255, 255, 255); text-decoration-style: initial; text-decoration-color: initial;">參考文獻(xiàn)下載鏈接
https://pan.baidu.com/s/1hbW_MxElgSSpaWoNpZ61qw 提取碼：srng
蛋白質(zhì)乙酰化(Acetylation)是蛋白在乙酰基轉(zhuǎn)移酶(或非酶)的催化下，將乙酰基團(tuán)轉(zhuǎn)移并添加在蛋白賴氨酸殘基或蛋白N端上的過(guò)程，在調(diào)控蛋白質(zhì)功能、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)中起重要作用。
乙酰化修飾主要分為兩類：蛋白N端的乙酰化修飾和蛋白賴氨酸上的乙酰化修飾。N端乙酰化修飾大部分發(fā)生在真核生物的蛋白上，由N乙酰轉(zhuǎn)移酶(NATs)催化；賴氨酸上的乙酰化修飾是一個(gè)可逆的過(guò)程，主要由賴氨酸乙酰化酶(KATs)和賴氨酸去乙酰化酶(KDACs)催化。
應(yīng)用方向
- 乙酰化修飾與細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、表觀調(diào)控、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性等生理過(guò)程研究；
- 乙酰化引起的代謝疾病、代謝紊亂，腫瘤發(fā)生等疾病機(jī)理研究。
乙酰化生物學(xué)意義
- 調(diào)節(jié)DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用；
- 與其他PTMs發(fā)生crosstalk；
- 調(diào)節(jié)酶活性；
- 調(diào)控蛋白亞細(xì)胞定位。
實(shí)驗(yàn)流程
技術(shù)參數(shù)
寄樣要求
動(dòng)物及臨床組織標(biāo)本：200 mg/sample
血清、血漿：500 uL/sample
細(xì)胞﹑微生物：1× 108cells/sample
植物嫩葉、嫩芽：10g/sample
植物種子、果實(shí)：10g/sample
- 液氮或-80℃保存
- 足量干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融
案例分享
Title(標(biāo)題):Fungal-induced protein hyperacetylation in maize identified by acetylome profiling
發(fā)表期刊:PNAS
影響因子:9.504
技術(shù)方法:iTRAQ、乙酰化修飾定量蛋白組
| 研究?jī)?nèi)容
賴氨酸乙酰化是一種關(guān)鍵的翻譯后修飾，調(diào)節(jié)一系列生物過(guò)程中涉及的多種蛋白質(zhì)。已知編碼乙酰轉(zhuǎn)移酶的病原體效應(yīng)蛋白可以直接乙酰化宿主蛋白從而改變免疫過(guò)程。胭脂蟲毒素(HCT),一種由真菌玉米圓斑病菌種1(C. carbonum race 1)產(chǎn)生的組蛋白去乙酰化酶抑制劑,可以增強(qiáng)病原體感染玉米植物的能力。
組蛋白乙酰化狀態(tài)的改變?cè)谒拗?病原體相互作用中起著核心作用。關(guān)于HCT如何實(shí)際促進(jìn)毒性的機(jī)理仍然未知。因此作者選擇hmlA玉米突變株作為研究對(duì)象，該突變株是編碼依賴NADPH的HC-毒素還原酶(HCTR)缺陷型，不能使HCT失活，表現(xiàn)出對(duì)C. carbonum race 1的易感。應(yīng)用iTRAQ標(biāo)記蛋白組和乙酰化修飾蛋白組技術(shù)研究玉米真菌誘導(dǎo)機(jī)制。
| 富集抗體
Anti-acetyl-lysine antibody(lmmuneChem-lCP0388)
| 技術(shù)路線
| 研究結(jié)果
發(fā)生乙酰化修飾的玉米蛋白
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