技術(shù)介紹 | UHPLC-QTOF-MS非靶標代謝組學-技術(shù)前沿-資訊-生物在線

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技術(shù)介紹 | UHPLC-QTOF-MS非靶標代謝組學

作者:上海阿趣生物科技有限公司 2022-01-12T16:12 (訪問量:9681)


通過液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)方法檢測生物體受外界刺激前后體內(nèi)大多數(shù)小分子代謝物的動態(tài)變化,重點尋找在實驗組和對照組中有顯著變化的代謝物,進而研究這些代謝物與生理病理變化的相關(guān)關(guān)系,其研究對象大都是分子量1500Da以內(nèi)的小分子物質(zhì)。

技術(shù)優(yōu)勢

? 較高的靈敏度、分辨率

? 較寬的動態(tài)范圍

? 適合于生物樣本中復雜代謝產(chǎn)物的檢測和潛在標志物的鑒定

? 適合對標本中未知代謝物的探索研究

? 定性準:6D質(zhì)控體系

技術(shù)路線

技術(shù)參數(shù)

樣本要求

血清、血漿:200 μL/sample

尿液:1 mL/sample

組織:200 mg/sample

糞便、腸道內(nèi)容物:200 mg/sample

細胞、微生物:1X 107 cells/sample

培養(yǎng)液:200 μL/sample


生物學重復

樣本數(shù)量:植物和微生物n≥6,動物樣本n≥10,臨床樣本n≥30,所有重復樣本獨立分析

其他種類的樣品在收集之前請聯(lián)系我司銷售工程師


檢測平臺

UHPLC-QTOF-MS(Agilent 1290 UHPLC-Agilent 6550/SCIEX 6600)


常規(guī)項目周期

45個自然日,含基礎(chǔ)數(shù)據(jù)分析(從收到客戶預付款并收到樣品之日起)


應用方向

? 表型和生理功能研究

? 疾病病理研究

? 臨床診斷及治療

? 藥物研究

? 中醫(yī)理論研究

? 食品科學與營養(yǎng)學研究

? 畜牧與農(nóng)林業(yè)研究

? 環(huán)境毒理研究



案例分析


標題:膳食膽固醇通過調(diào)節(jié)腸道微生物群和代謝物驅(qū)動脂肪肝相關(guān)肝癌

研究對象: 小鼠

期刊: Gut

影響因子: 19.819

時間: 2020年


研究背景

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是全世界日趨普遍的慢性肝病。隨著肥胖和代謝綜合征在全球的流 行,近20年亞洲國家NAFLD增長迅速,在上海、北京、廣州和香港等地區(qū)成人NAFLD患病率約在30% 左右。NAFLD可進展為非酒精性脂肪性肝炎, 進而發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。NAFLD相關(guān)肝癌的發(fā)病率在 過去10年增加了4倍,相應的醫(yī)療保健費用也在逐步增加。


研究結(jié)果

發(fā)現(xiàn)了長期的高膽固醇飲食,會通過調(diào)節(jié)腸道菌群來誘導小鼠NAFLD-HCC形成和發(fā)展。膽固醇通過腸道菌群的變化使TCA升高、IPA降低,促進脂質(zhì)積累和肝細胞增殖,從而導致NAFLD-HCC的發(fā)展。而通過降膽固醇治療,可以阻止高膽固醇飲食誘導的NAFLD-HCC。這意味著,調(diào)控膽固醇和腸道菌群及其相關(guān)代謝產(chǎn)物可能為以后預防NAFLD-HCC提供有效策略。


研究思路

結(jié)果展示

膳食膽固醇含量與血清代謝物有顯著差異(圖A)。膽酸生物合成是高膽飲食的小鼠改變的關(guān)鍵途徑(圖B)。在HFHC喂養(yǎng)的小鼠中,初級膽汁酸包括牛磺醛膽酸(TCA)、牛磺醛脫氧膽酸(TUDCA)、糖膽酸(GCA)和牛磺醛脫氧膽酸(TCDCA)等小鼠的代謝物異常上調(diào)(圖C)。在微生物色氨酸代謝中,3-惰基丙酸(IPA)是一種HFHC喂養(yǎng)的小鼠中異常下調(diào)的代謝物(圖C)。與HFLC喂養(yǎng)的小鼠相比,HFHC喂養(yǎng)的小鼠血清脂多糖(LPS)濃度升高,結(jié)腸e-鈣粘蛋白丟失(圖D),表明膳食膽固醇可能損害腸道屏障功能。進行了相關(guān)性分析,確定了HFHC改變的微生物和代謝物之間的潛在關(guān)聯(lián)(圖E)。


LC-MS非靶代謝組學分析血清代謝譜

參考文獻

Xiang Zhang, et al. Dietary cholesterol drives fatty liver- associated liver cancer by modulating gut microbiota and metabolites[J]. Gut ,2020.


有興趣采用UHPLC-QTOF-MS非靶標代謝組學進行樣本檢測分析的老師,歡迎垂詢服務熱線:400-664-9912



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