腫瘤壞死因子-α（TNF-α）是免疫炎癥反應(yīng)中極具代表性的多效性細胞因子。作為TNF/TNFR超家族的核心成員，TNF-α在免疫介導(dǎo)的炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮核心調(diào)控作用[1]。從類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病到銀屑病、多發(fā)性硬化，TNF-α的信號通路紊亂廣泛參與各類自身免疫疾病的病理進程。
TNF-α的功能復(fù)雜性，首先源于其兩條結(jié)構(gòu)迥異、作用機制相互制衡的的受體通路：TNFR1與TNFR2。
TNF-α/TNFR信號通路示意圖
TNFR1廣泛表達于幾乎所有有核細胞，其胞內(nèi)段含有一個關(guān)鍵的死亡結(jié)構(gòu)域，當TNF-α與TNFR1結(jié)合后，可激活NF-κB通路介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，并可誘導(dǎo)細胞凋亡或壞死性凋亡[2]。在炎癥性疾病中，TNFR1通路的過度激活是組織損傷、滑膜增生和關(guān)節(jié)破壞的直接誘因。全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS）已證實，TNF超家族多個基因（包括LTA、TNFSF4等）的多態(tài)性與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘等疾病的易感性顯著相關(guān)[1]。
與TNFR1截然不同，TNFR2的表達高度局限于Treg等免疫細胞，且不含死亡結(jié)構(gòu)域，主要通過激活NF-κB通路和PI3K/Akt等通路維持Treg細胞擴增、存活和功能維持[2]。這意味著，非選擇性地阻斷TNF-α，在抑制炎癥的同時，也可能誤傷TNFR2介導(dǎo)的免疫平衡，干擾機體正常修復(fù)機制。
臨床研究為這一機制風(fēng)險付出了慘痛的教訓(xùn)。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和炎癥性腸病中大獲成功的非選擇性TNF抑制劑（如阿達木單抗），在治療多發(fā)性硬化患者的臨床試驗中因同時阻斷TNFR2而破壞了Treg介導(dǎo)的免疫穩(wěn)態(tài)，導(dǎo)致病情惡化，相關(guān)臨床試驗被迫提前終止[3]。
基于這一臨床局限，新一代抗炎藥物研發(fā)迎來全新方向：開發(fā)能夠精準區(qū)分TNFR1和TNFR2的選擇性抑制劑，旨在有效遏制病理性炎癥的同時，保留TNFR2介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)和組織修復(fù)功能。
如果說TNF-α是炎癥的核心調(diào)控因子，那么IL-6就是炎癥級聯(lián)放大進程中的關(guān)鍵效應(yīng)分子。作為TNF-α下游重要效應(yīng)細胞因子，兩者在炎癥調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中形成緊密的級聯(lián)關(guān)系[4]。大量研究表明，在細胞因子風(fēng)暴、急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征中，TNF-α的升高常先于IL-6，而IL-6 持續(xù)高表達，則是導(dǎo)致組織損傷和多器官衰竭的主要直接執(zhí)行者[4]。
IL-6信號系統(tǒng)的獨特之處在于其雙模態(tài)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制[5]：
IL-6雙模態(tài)信號傳導(dǎo)機制示意圖
IL-6與膜結(jié)合型IL-6R（mIL-6R）結(jié)合，進而招募gp130二聚化啟動JAK/STAT等下游通路。這一模式主要局限于表達mIL-6R的免疫細胞和肝細胞，介導(dǎo)急性期反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)功能，具有生理保護性作用[6]。
IL-6與可溶性IL-6R（sIL-6R）結(jié)合形成的復(fù)合物，進而結(jié)合幾乎所有細胞表面都表達的gp130。由于gp130廣泛分布，反式信號能夠激活傳統(tǒng)IL-6R陰性的細胞（如內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、某些神經(jīng)元），是IL-6促炎和致病效應(yīng)的主要途徑[6]。
正是由于這種雙模態(tài)特性，直接全面阻斷IL-6雖然有效，但易干擾機體正常生理免疫功能。因此，新一代IL-6靶向療法的研發(fā)方向是選擇性阻斷反式信號通路，精準抑制病理炎癥，最大程度保留免疫監(jiān)視和組織修復(fù)功能。
目前，IL-6/IL-6R作為靶點的臨床價值已得到充分驗證。托珠單抗（Tocilizumab）和薩特利珠單抗（Satralizumab）已在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、CAR-T治療相關(guān)的細胞因子釋放綜合征（CRS）以及視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病等適應(yīng)癥中獲得批準[7]。
TNF-α與IL-6在炎癥通路中構(gòu)成緊密的上下游調(diào)控關(guān)系：TNF-α通過激活NF-κB直接上調(diào)IL-6的轉(zhuǎn)錄和分泌；IL-6則通過STAT3通路放大和維持炎癥反應(yīng)。
這一協(xié)同關(guān)系對藥物開發(fā)提出了關(guān)鍵問題：單一靶點阻斷是否足夠？ 臨床實踐表明，部分對TNF抑制劑響應(yīng)不佳的患者，換用IL-6抑制劑后仍可獲益，提示IL-6存在TNF-α非依賴性的活化途徑。
在此背景下，在藥物篩選階段完成TNF-α/TNFR1、TNF-α/TNFR2和IL-6/IL-6R三大核心節(jié)點的系統(tǒng)性平行評估，已成為新一代差異性抗炎藥物研發(fā)的必要策略。
結(jié)合炎癥通路的復(fù)雜調(diào)控機制與創(chuàng)新藥物研發(fā)的迫切需求，ACROBiosystems百普賽斯依托于成熟的TR-FRET技術(shù)平臺，全新上線三款抑制劑篩選試劑盒，覆蓋TNF-α/TNFR1、TNF-α/TNFR2和IL-6/IL-6R核心作用節(jié)點，為您提供高通量、高效率、高靈敏的藥物篩選工具。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 |
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Human TNF-alpha / TNFR1 Inhibitor Screening Kit (TR-FRET)NEW |
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Human TNF-alpha / TNFR2 Inhibitor Screening Kit (TR-FRET)NEW |
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Human IL-6 / IL-6R Inhibitor Screening Kit(TR-FRET)NEW |
Q：為什么ACRO選擇深度開發(fā)TR-FRET抑制劑篩選試劑盒，而不是ELISA？
在抑制劑篩選場景中，ELISA雖應(yīng)用廣泛，但其核心設(shè)計初衷為樣本含量檢測，并非分子互作阻斷效應(yīng)評價。將其直接用于抑制劑篩選，存在明顯局限：操作流程繁瑣，洗板步驟密集，難以適配高通量自動化篩選；反復(fù)洗滌易流失弱結(jié)合活性分子，人為誤差干擾較大，可能無法客觀反映弱親和力抑制劑的真實作用效果。
而TR-FRET（時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）是一種先進的均相檢測技術(shù)，該技術(shù)巧妙地結(jié)合了時間分辨熒光（TRF）與熒光能量共振轉(zhuǎn)移（FRET）兩種原理的優(yōu)勢：通過使用鑭系元素（如Eu、Tb）作為長壽命供體熒光，延遲檢測窗口，從而有效消除培養(yǎng)基、化合物或生物樣品自身熒光帶來的背景干擾，大幅提升信噪比和檢測靈敏度。TR-FRET將復(fù)雜的檢測方法開發(fā)過程簡化為“稀釋-混合-孵育-檢測”的簡易流程，支持在微孔板中直接進行均相檢測，無需洗滌，極大地提高了實驗效率、結(jié)果的可靠性與重復(fù)性，是實現(xiàn)高通量藥物篩選和精準生物學(xué)研究的強大工具。
驗證數(shù)據(jù)
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試劑盒性能經(jīng)真實上市藥物驗證
Human TNF-alpha / TNFR1 Inhibitor Screening Kit(TR-FRET)
Cat. No. FRT-P022
The kit is suitable for the detection and characterization of TNF-alpha / TNFR1 inhibitors. It was shown that the anti-TNF-alpha antibody (Adalimumab) disrupted the interaction, with an IC50 of 0.6675 nM. The anti-TNFR1 antibody (Atrosab) disrupted the interaction, with an IC50 of 1.165 nM. The anti-TNFR2 antibody showed no significant inhibitory effect in the assay as expected.
Human TNF-alpha / TNFR2 Inhibitor Screening Kit(TR-FRET)
Cat. No. FRT-P028
The kit is suitable for the detection and characterization of TNF-alpha/TNFR2 inhibitors. It was shown that the anti-TNF-alpha antibody (Adalimumab) disrupted the interaction, with an IC50 of 0.8714 nM. The anti-TNFR1 antibody (Atrosab) showed no significant inhibitory effect in the assay as expected.
Human IL-6 / IL-6R Inhibitor Screening Kit(TR-FRET)
Cat. No. FRT-P023
The kit is suitable for the detection and characterization of IL-6 / IL-6 R alpha inhibitors. It was shown that the two anti-IL-6 antibodies (FRTP023-C03 & Siltuximab) disrupted the interaction, with an IC50 of 0.4261 & 0.4943 nM. The anti-IL-6 R antibody (Tocilizumab) disrupted the interaction, with an IC50 of 3.348 nM. The anti-TNF-alpha (Adalimumab) showed no significant inhibitory effect in the assay as expected.
產(chǎn)品列表
三款全新TR-FRET試劑盒的核心組分均源自從ACRO自主研發(fā)生產(chǎn)的TNF-α、TNFR、IL-6、IL-6R系列重組蛋白。從源頭把控品質(zhì)，為穩(wěn)定、精準的篩選結(jié)果筑牢基礎(chǔ)：
> 高純度與天然構(gòu)象：經(jīng)SEC-MALS驗證，保障蛋白天然聚合狀態(tài)與空間結(jié)構(gòu)
> 高生物活性：經(jīng)ELISA、SPR、BLI及細胞水平實驗驗證，免費提供protocol
> 低內(nèi)毒素：低于1.0 EU/μg，適配動物免疫、細胞及功能學(xué)實驗
> 高批間一致性：嚴格標準化QC體系，保證實驗可重復(fù)性
> 多場景適配：覆蓋多種屬、多樣化標簽，可靈活滿足種屬交叉驗證、免疫檢測、功能研究等各類實驗需求。
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參考文獻：
[1]. Veerasubramanian PK, Wynn TA, Quan J, Karlsson FJ. Targeting TNF/TNFR superfamilies in immune-mediated inflammatory diseases. J Exp Med. 2024;221(11):e20240806. doi:10.1084/jem.20240806
[2]. Doss GP, Agoramoorthy G, Chakraborty C. TNF/TNFR: drug target for autoimmune diseases and immune-mediated inflammatory diseases. Front Biosci (Landmark Ed). 2014 Jun 1;19(7):1028-40. doi: 10.2741/4265. PMID: 24896334.
[3]. Pegoretti V, Baron W, Laman JD and Eisel ULM (2018) Selective Modulation of TNF–TNFRs Signaling: Insights for Multiple Sclerosis Treatment. Front. Immunol. 9:925. doi: 10.3389/fimmu.2018.00925
[4]. ingran Chen, Weihua Lu, Ying Li, Zhanchen Guo, Qian Liu, Weiwei Liu, Lisheng Wang, Zhen Liu,Tri-specific molecularly imprinted lysosomal nanodegrader enables synergistic therapy of cytokine storm, Chemical Science, Volume 16, Issue 42, 2025, Pages 20002-20011, ISSN 2041-6520,https://doi.org/10.1039/d5sc04757a.
[5]. Villar-Fincheira P, Sanhueza-Olivares F, Norambuena-Soto I, Cancino-Arenas N, Hernandez-Vargas F, Troncoso R, Gabrielli L and Chiong M (2021) Role of Interleukin-6 in Vascular Health and Disease. Front. Mol. Biosci. 8:641734. doi: 10.3389/fmolb.2021.641734
[6]. Schumertl T, Lokau J, Garbers C. IL-6 Signaling in Immunopathology: From Basic Biology to Selective Therapeutic Intervention. Immunotargets Ther. 2025;14:681-695. Published 2025 Jul 5. doi:10.2147/ITT.S485684
[7]. Li X, Zhao C. Interleukin-6 in neuroimmunological disorders: Pathophysiology and therapeutic advances with satralizumab. Autoimmun Rev. 2025;24(7):103826. doi:10.1016/j.autrev.2025.103826
ACROBiosystems
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15117918562
（備注：姓名+公司）