摘 要
流感病毒具有季節(jié)性流行、傳播迅速、易致高危人群發(fā)生重癥等特點(diǎn)，對人民群眾健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。我國既往關(guān)于流感治療和藥物預(yù)防的推薦多基于專家共識，缺乏系統(tǒng)的循證醫(yī)學(xué)指南。近年來，除神經(jīng)氨酸酶抑制劑等傳統(tǒng)抗病毒藥物外，RNA聚合酶抑制劑等新型抗病毒藥物的研究證據(jù)不斷積累，為流感的臨床治療提供了更多選擇，亟需對現(xiàn)有的用藥建議進(jìn)行系統(tǒng)梳理和科學(xué)歸納。基于此，我國相關(guān)專業(yè)領(lǐng)域的多學(xué)科專家依循STAR推薦制修訂決策框架，制訂了本指南。本指南重點(diǎn)圍繞流感的抗病毒治療、輔助治療和藥物預(yù)防，系統(tǒng)總結(jié)并更新了不同人群的治療指征、藥物選擇、給藥方案、療程及安全性管理，特別對兒童、孕產(chǎn)婦等重點(diǎn)人群提出具體建議，并明確了季節(jié)性高峰期藥物預(yù)防和暴露后預(yù)防的適用條件與策略，最終形成21條推薦意見，以期為我國流感治療與藥物預(yù)防提供了系統(tǒng)性、可操作的循證指導(dǎo)。
前 言
流行性感冒（以下簡稱“流感”）是一種急性呼吸道傳染病，傳播迅速、季節(jié)性流行顯著，對兒童、老年人、孕產(chǎn)婦以及慢性基礎(chǔ)性疾病患者等高危人群的健康威脅尤為嚴(yán)重，可導(dǎo)致重癥甚至死亡，給社會(huì)帶來沉重的疾病負(fù)擔(dān)。然而，我國在流感抗病毒治療和藥物預(yù)防方面的臨床實(shí)踐長期依據(jù)專家共識，缺乏系統(tǒng)性循證指南，影響了診療決策的規(guī)范性與科學(xué)性。
近年來，隨著RNA聚合酶抑制劑等新型抗病毒藥物的臨床試驗(yàn)不斷開展，以及神經(jīng)氨酸酶抑制劑（neuraminidase inhibitor，NAI）等傳統(tǒng)抗病毒藥物的真實(shí)世界研究不持續(xù)積累，流感治療和藥物預(yù)防的循證證據(jù)日益豐富。為促進(jìn)臨床實(shí)踐規(guī)范化，我國相關(guān)專業(yè)領(lǐng)域的多學(xué)科專家依循臨床實(shí)踐指南的方法學(xué)，制訂了《中國流感治療與藥物預(yù)防臨床實(shí)踐指南（2025版）》（以下簡稱“本指南”）。本指南旨在為臨床醫(yī)師提供科學(xué)、循證的決策依據(jù)，以提高流感抗病毒治療和藥物預(yù)防的規(guī)范性與可操作性。本指南不具備強(qiáng)制性，不具備法律效力，僅供相關(guān)醫(yī)護(hù)人員參考。
第一部分 指南制訂方法學(xué)
本指南由中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)發(fā)起制訂并組織撰寫，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院循證評價(jià)與指南研究創(chuàng)新單元、蘭州大學(xué)健康數(shù)據(jù)科學(xué)研究院提供指南的方法學(xué)指導(dǎo)。指南目標(biāo)人群為流感患者與有流感藥物預(yù)防需求的人群，普遍適用于各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)，供臨床醫(yī)師、藥師、護(hù)師和其他相關(guān)人員使用。本指南已在國際實(shí)踐指南注冊與透明化平臺（Practice guideline REgistration for transPAREncy，PREPARE，http：//www.guidelines-registry.org）注冊并上傳計(jì)劃書（注冊號：PREPARE-2025CN1551），設(shè)計(jì)與制訂參照指南科學(xué)性（Scientific）、透明性（Transparent）和適用性（Applicable）的評級（Rankings）（簡稱“STAR”）推薦制修訂決策框架進(jìn)行。使用推薦意見分級的評估、制訂及評價(jià)（Grading of Recommendations Assessment，Development and Evaluation，GRADE）方法對證據(jù)體和推薦意見進(jìn)行分級，見表1。本指南方法學(xué)內(nèi)容已上傳至PREPARE平臺（https//www.guidelines-registry.org/guide/54f0abb1-fd7c-4195-ac04-73f151033daf）。指南制訂工作于2025年8月啟動(dòng)，2025年11月定稿。
第二部分 抗病毒藥物劑量療程匯總
本指南推薦意見中關(guān)于藥物劑量療程的內(nèi)容匯總形成表3、4，供指南使用者快速查詢參考。
第三部分 流感的抗病毒治療
舉例臨床問題：在疑似或確診為非重癥流感、且無高危因素的患者中，是否推薦常規(guī)使用抗病毒治療？若應(yīng)給予，最佳的給藥時(shí)機(jī)及推薦的用藥方案為何？
推薦意見1：對于疑似或確診為非重癥流感、且無高危因素的患者，若癥狀出現(xiàn)不足48 h，為縮短流感癥狀緩解時(shí)間，可考慮使用抗病毒治療（2B）。若癥狀出現(xiàn)超過48 h，僅在流感癥狀（如發(fā)熱）持續(xù)不緩解，同時(shí)病毒核酸檢測仍為陽性時(shí)，考慮使用抗病毒治療（2D）。
推薦意見2：對于疑似或確診為非重癥流感、且無高危因素的患者，若決定啟動(dòng)抗病毒治療，可選擇的抗病毒藥物包括NAI［奧司他韋（2B），靜脈帕拉米韋（2C）］，PA亞基帽依賴性核酸內(nèi)切酶抑制劑（瑪巴洛沙韋、瑪舒拉沙韋、瑪硒洛沙韋，2C），PB2亞基帽結(jié)合域抑制劑（昂拉地韋，僅用于甲流患者，2C），PB1 RNA合成抑制劑（法維拉韋，2D）和病毒入侵抑制劑（阿比多爾，2D）。
證據(jù)概述：2025年一項(xiàng)系統(tǒng)評價(jià)和薈萃分析顯示，在疑似或?qū)嶒?yàn)室確診的非重癥流感患者中，起病48 h內(nèi)啟動(dòng)抗病毒治療，包括奧司他韋［22項(xiàng)隨機(jī)對照試驗(yàn)（randomized controlled trial，RCT）（9 078例），MD=-18.0 h，95%CI：-22.3~-13.7］、帕拉米韋［5項(xiàng)RCT（1 046例），MD=-22.8 h，95%CI：-30.7~-14.9］、瑪巴洛沙韋［3項(xiàng)RCT（1 855例），MD=-24.5 h，95%CI：-33.8~-15.1］、法維拉韋［2項(xiàng)RCT（1 317例），MD=-11.0 h，95%CI：-23.0~0.7］和阿比多爾［1項(xiàng)RCT（210例），MD=-26.4 h，95%CI：-37.7~-15.1］，可縮短臨床癥狀緩解時(shí)間，但對住院率和死亡率的影響不明顯。2024—2025年的多項(xiàng)設(shè)計(jì)嚴(yán)格的RCT顯示，我國自主研發(fā)的流感RNA聚合酶抑制劑，包括瑪舒拉沙韋（591例，臨床癥狀緩解時(shí)間較安慰劑縮短21 h，較安慰劑組縮短33%，P=0.002）、瑪硒洛沙韋（457例，臨床癥狀緩解時(shí)間較安慰劑縮短23.5 h，較安慰劑組縮短37.4%，P<0.001）和昂拉地韋（750例，臨床癥狀緩解時(shí)間較安慰劑縮短24.5 h，較安慰劑組縮短38.5%，P<0.000 1）可縮短確診非重癥流感、且無高危因素患者的臨床癥狀緩解時(shí)間約1 d。
值得注意的是，2014年一項(xiàng)RCT提示，若患者起病48 h后啟動(dòng)治療，奧司他韋組與安慰劑組癥狀緩解時(shí)間相當(dāng)［1 190例，3（2，5）d比3（1，5）d，P=0.04］，但奧司他韋組在入組后第2天（54%比67%，P=0.008 7）和第4天（25%比38%，P=0.007 9）的病毒培養(yǎng)檢出率均低于安慰劑組。目前尚無研究評估帕拉米韋或RNA聚合酶抑制劑在起病48 h后使用的治療獲益。
在安全性方面，2項(xiàng)系統(tǒng)評價(jià)和薈萃分析顯示，在疑似或?qū)嶒?yàn)室確診的非重癥流感患者中，使用奧司他韋會(huì)增加治療相關(guān)不良事件的風(fēng)險(xiǎn)［12項(xiàng)RCT（6 782例），RR=1.23，95%CI：1.10~1.39］，以惡心和嘔吐較為常見，但不會(huì)增加嚴(yán)重不良事件的發(fā)生率［22項(xiàng)RCT（14 718例），RD=0.0，95%CI：-0.003~0.002］。2025年一項(xiàng)薈萃分析以及新藥的RCT顯示，帕拉米韋、瑪巴洛沙韋、瑪舒拉沙韋、瑪硒洛沙韋、昂拉地韋、法維拉韋和阿比多爾耐受性良好，不會(huì)增加治療相關(guān)不良事件和嚴(yán)重不良事件的發(fā)生率。使用RNA聚合酶抑制劑，包括瑪巴洛沙韋（9.7%）、瑪舒拉沙韋（0.9%）、瑪硒洛沙韋（4.1%）可能會(huì)增加攜帶PA位點(diǎn)氨基酸替代耐藥株的發(fā)生率，其中最常見的是I38T替代。
推薦說明：對于無高危因素的流感患者，臨床多表現(xiàn)為輕癥，一周內(nèi)可自行緩解，但部分患者癥狀持續(xù)時(shí)間較長，影響生活質(zhì)量。基于現(xiàn)有證據(jù)，對于確診或疑似的非重癥、且無高危因素的流感患者，在起病48 h以內(nèi)啟動(dòng)抗病毒治療可縮短癥狀緩解時(shí)間。然而，此類患者總體病情較輕，進(jìn)展為重癥或發(fā)生并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)較低，部分患者進(jìn)行抗病毒治療的臨床獲益可能有限。因此，決策時(shí)應(yīng)綜合評估患者的病情、潛在獲益及用藥意愿。多數(shù)臨床試驗(yàn)均在患者起病48 h內(nèi)啟動(dòng)抗病毒治療。有限證據(jù)提示，奧司他韋于48 h后使用，其療效與安慰劑相近；帕拉米韋及RNA聚合酶抑制劑在48 h后使用的獲益尚不明確。本指南認(rèn)為，若患者起病超過48 h，流感癥狀（如發(fā)熱）持續(xù)不緩解且病毒核酸檢測仍為陽性，提示其可能存在病情進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)，可考慮給予抗病毒治療。
在藥物選擇方面，NAI、RNA聚合酶抑制劑和病毒入侵抑制劑均可有效縮短癥狀持續(xù)時(shí)間。但需注意，昂拉地韋僅適用于甲型流感病毒感染；法維拉韋用于其他抗病毒藥物無效或效果不佳的患者；帕拉米韋為靜脈制劑，主要用于無法口服或口服耐受性較差的患者。安全性方面，奧司他韋可能增加輕度惡心、嘔吐等不良反應(yīng)；PA亞基帽依賴性核酸內(nèi)切酶抑制劑可能增加耐藥變異的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。除此之外，PA亞基帽依賴性核酸內(nèi)切酶抑制劑半衰期較長（≥3 d），單次口服即可完成療程，在治療依從性方面存在優(yōu)勢；奧司他韋應(yīng)用廣泛、價(jià)格較低且可在各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用。臨床應(yīng)根據(jù)患者的耐受性、病情特點(diǎn)及意愿，綜合決策選擇合適藥物。盡管世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）、美國疾病控制與預(yù)防中心（Centers for Disease Control and Prevention，CDC）和美國感染病學(xué)會(huì)（Infectious Diseases Society of America，IDSA）等機(jī)構(gòu)發(fā)布的國際指南還推薦吸入型扎那米韋作為備選藥物，但其在我國可及性極低，本指南暫不做推薦。
此外，對于癥狀持續(xù)超過48 h的非重癥、且無高危因素的流感患者，是否應(yīng)給予抗病毒治療缺乏證據(jù)，依賴臨床醫(yī)師的專業(yè)判斷。為進(jìn)一步提升治療有效性和安全性，建議在有條件的單位開展研究，持續(xù)積累該人群的循證證據(jù)，以優(yōu)化臨床用藥策略。
第四部分 流感的輔助治療
舉例臨床問題：在疑似或確診為重癥流感的患者中，是否推薦常規(guī)使用糖皮質(zhì)激素治療？
推薦意見1：對于疑似或確診為重癥流感的患者，不推薦將糖皮質(zhì)激素作為流感本身的常規(guī)治療手段（1C），除非有其他明確的臨床適應(yīng)癥（2C）。
證據(jù)概述：2019年一項(xiàng)薈萃分析顯示，糖皮質(zhì)激素輔助治療與流感患者死亡率增加相關(guān)［15項(xiàng)觀察性研究（2 212例），OR=3.90，95%CI：2.31~6.60，I²=68%］，并且會(huì)增加院內(nèi)感染風(fēng)險(xiǎn)［7項(xiàng)觀察性研究（6 114例），OR=2.74，95%CI：1.51~4.95，I²=90%］。2019年一項(xiàng)薈萃分析提示，使用糖皮質(zhì)激素與ICU住院時(shí)間延長相關(guān)［10項(xiàng)觀察性研究（6 548例），MD=2.14 d，95%CI：1.17~3.10 d，P<0.000 1］。兩項(xiàng)觀察性研究分別發(fā)現(xiàn)，治療哮喘或COPD加重時(shí)應(yīng)用全身糖皮質(zhì)激素可導(dǎo)致流感病毒排毒時(shí)間延長［H3N2（147例）：aOR=5.44，95%CI：1.86~15.89，P<0.002；H1N1（64例）排毒延長率：激素使用組比未使用組50%比21%，P=0.05］。需注意，一項(xiàng)多中心回顧性觀察性研究（607例）表明，在多元邏輯回歸分析中，激素使用與較高的住院死亡率相關(guān)；但經(jīng)傾向評分匹配及校正ICU住院期間組間時(shí)間依賴性差異后，兩組死亡率無顯著差異，提示需控制影響生存的混雜因素才能更準(zhǔn)確評估激素療效。此外，一項(xiàng)觀察性研究分析了2009年H1N1流感大流行期間因感染H1N1而入住兒科ICU的患兒（838例），結(jié)果顯示，使用大劑量糖皮質(zhì)激素（每日≥2 mg/kg甲潑尼龍或等效劑量）顯著增加死亡風(fēng)險(xiǎn)（RR=3.5，95%CI：2.2~5.4）。
在合并ARDS的重癥流感患者中，既有的臨床研究提示激素使用時(shí)機(jī)和劑量的對患者結(jié)局有顯著影響。一項(xiàng)2017年的觀察性研究（2 141例2009年甲型H1N1流感患者）顯示，低至中劑量激素（每日25~150 mg）可降低氧合指數(shù)（PaO?/FiO?）<300 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）患者的死亡率（30 d死亡率HR=0.49，95%CI：0.32~0.77；60 d死亡率HR=0.51，95%CI：0.33~0.78），但對PaO?/FiO?≥300 mmHg的患者無獲益甚至可能增加風(fēng)險(xiǎn)（30 d死亡率HR=3.09，95%CI：0.95~10.12；60 d死亡率HR=3.70，95%CI：1.20~11.34）；同時(shí)，無論劑量高低，使用激素都會(huì)增加醫(yī)院感染發(fā)生率（低中劑量組16.8%，高劑量組24.8%，對照組僅4.1%）。另一項(xiàng)2020年的觀察性研究（241例ICU內(nèi)需機(jī)械通氣、合并ARDS的重癥流感患者）顯示，早期使用激素會(huì)導(dǎo)致住院死亡率顯著增加（OR=5.02，95%CI：2.39~10.54）且院感風(fēng)險(xiǎn)升高（OR=2.37，95%CI：1.01~5.56）；該研究還指出更早用藥與更高累計(jì)劑量會(huì)帶來更差的結(jié)局。
推薦說明：糖皮質(zhì)激素為臨床常用藥物，其價(jià)格相對低廉、供應(yīng)充足，在不同地區(qū)、不同級別的醫(yī)療機(jī)構(gòu)均可獲得，常用于重癥社區(qū)獲得性肺炎患者的治療。然而，其在重癥流感中的療效與安全性仍存在較大爭議。現(xiàn)有證據(jù)主要來自于證據(jù)等級較低的觀察性研究及基于觀察性研究的薈萃分析，提示在重癥流感患者中常規(guī)使用糖皮質(zhì)激素可能與死亡率升高、繼發(fā)感染風(fēng)險(xiǎn)增加、機(jī)械通氣及ICU住院時(shí)間延長、病毒排毒時(shí)間延長等不良結(jié)局相關(guān)。本指南不建議將糖皮質(zhì)激素作為流感本身的常規(guī)治療措施，這與WHO、CDC、IDSA等機(jī)構(gòu)發(fā)布的權(quán)威指南的核心推薦方向一致。
然而，有證據(jù)表明當(dāng)重癥流感出現(xiàn)特定的并發(fā)癥時(shí)，例如哮喘或慢性阻塞性肺疾病急性加重（需激素控制氣道炎癥）、腎上腺功能不全（需補(bǔ)充生理劑量氫化可的松）、難治性感染性休克（需激素糾正休克狀態(tài)）等，在特定的窗口期使用激素可能有潛在獲益。此外，2024年WHO發(fā)布的流感指南強(qiáng)調(diào)，在合并ARDS時(shí)，糖皮質(zhì)激素治療可能帶來重要益處。WHO指南主要參考的一項(xiàng)觀察性研究提示低至中等劑量激素（每日25~150 mg甲潑尼龍或等效劑量）在短期使用時(shí)（不超過2周）可能對特定重癥流感人群（如PaO?/FIO?<300 mmHg的低氧血癥患者）有生存獲益，可降低該類患者的30 d和60 d死亡率。但是，對于使用高劑量激素治療重癥流感合并的ARDS，目前多數(shù)研究中均顯示出明確危害，因此即使存在該臨床適應(yīng)癥，也應(yīng)優(yōu)先選擇低劑量激素，避免不必要的高劑量使用。綜上，本指南認(rèn)為在具有上述明確的糖皮質(zhì)激素使用適應(yīng)證時(shí)，可以考慮組織多學(xué)科（呼吸、感染、重癥等）會(huì)診，綜合評估患者病情嚴(yán)重程度、合并癥控制需求、激素使用風(fēng)險(xiǎn)，制定個(gè)體化激素治療方案，明確告知患者及家屬激素使用的目的與潛在風(fēng)險(xiǎn)。使用激素期間，需密切監(jiān)測患者流感相關(guān)癥狀、病毒排毒情況、繼發(fā)感染征象及激素相關(guān)代謝不良反應(yīng)，并進(jìn)行規(guī)范的抗病毒治療；定期評估激素療效，一旦合并癥得到控制，及時(shí)逐漸減量至停用激素，避免長期使用。
第五部分 流感的藥物預(yù)防
臨床問題舉例：在社區(qū)環(huán)境中，是否推薦抗病毒藥物作為流感暴露前預(yù)防的策略之一？它與接種流感疫苗的關(guān)系是什么？
推薦意見1：接種流感疫苗是流感預(yù)防最有效的手段，常規(guī)使用抗病毒藥物進(jìn)行暴露前預(yù)防并不可取。（1C）
推薦意見2：對于以下情況可以考慮使用抗病毒藥物進(jìn)行暴露前流感預(yù)防：（1）流感高危人群，且有流感疫苗接種禁忌證、無法獲得流感疫苗或預(yù)計(jì)接種流感疫苗后效力低下（2C）；（2）當(dāng)流感高危患者無法接種流感疫苗并且自身無法進(jìn)行抗病毒藥物預(yù)防時(shí)，可以對上述高危患者未接種流感疫苗的密切接觸人群進(jìn)行抗病毒藥物預(yù)防（2C）。
推薦意見3：進(jìn)行流感暴露前抗病毒藥物預(yù)防，首選奧司他韋（2C）。對于反復(fù)暴露風(fēng)險(xiǎn)高且藥物耐受良好的高危人群，可適當(dāng)延長療程（2D）。
證據(jù)概述：一項(xiàng)1999年的RCT（1559例未接種疫苗的健康成人）顯示，在社區(qū)流感活動(dòng)高峰期連續(xù)6周口服奧司他韋（75 mg/次，每日1次或2次）進(jìn)行預(yù)防，與安慰劑組相比，流感發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)明顯降低（每日1次：1.2%、每日2次：1.3%、安慰劑：4.8%）。合并兩組奧司他韋數(shù)據(jù)后，其在所研究地點(diǎn)的保護(hù)效力為74%（95%CI：53%~88%）。與安慰劑相比，其惡心（每日1次12.1%、每日2次：14.6%、安慰劑：7.1%）和嘔吐（每日1次2.5%、每日2次：2.7%、安慰劑：0.8%）的發(fā)生率更高。三組提前停用藥物或安慰劑的發(fā)生率相當(dāng)（3.1%~4.0%）。
推薦說明：流感病毒傳播速度快、人群易感性高，可通過飛沫、密切接觸及氣溶膠傳播，在社區(qū)環(huán)境中，易在學(xué)校、寫字樓、養(yǎng)老院等人員密集場所暴發(fā)。預(yù)防是控制流感傳播的核心手段，包括疫苗接種與抗病毒藥物預(yù)防等。其中，流感疫苗能有效降低感染風(fēng)險(xiǎn)及重癥發(fā)生率，是國際公認(rèn)的最有效、最經(jīng)濟(jì)的預(yù)防措施。而抗病毒藥物預(yù)防只作為“補(bǔ)充手段”。
考慮到在社區(qū)范圍內(nèi)常規(guī)使用抗病毒藥物進(jìn)行暴露前預(yù)防可能誘導(dǎo)病毒耐藥、增加社會(huì)總成本，并伴隨潛在藥物不良反應(yīng)，其經(jīng)濟(jì)效益和安全性不足，因此本指南不推薦常規(guī)開展此類預(yù)防措施。僅在特定情境下，可酌情使用抗病毒藥物進(jìn)行暴露前預(yù)防，以保護(hù)高危人群。適用人群主要包括對流感疫苗成分過敏、接種后未產(chǎn)生免疫應(yīng)答、疫苗株與流行株明顯不匹配的高危人群，以及高危人群無法預(yù)防（如有疫苗接種禁忌，且同時(shí)對奧司他韋有嚴(yán)重超敏反應(yīng)或明確耐藥）時(shí)，對未接種流感疫苗的密切接觸者進(jìn)行預(yù)防來提供間接保護(hù)。在臨床工作中醫(yī)護(hù)人員必須向患者及家屬普及“疫苗優(yōu)先”的理念，說明藥物預(yù)防的適用的特殊場景與風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)格避免濫用抗病毒藥物進(jìn)行暴露前預(yù)防。
藥物選擇方面，首選奧司他韋。對于暴露前預(yù)防，奧司他韋的保護(hù)效力高達(dá)74%，雖然可引起輕度惡心、嘔吐等不良反應(yīng)，但總體耐受性尚可。UpToDate臨床顧問網(wǎng)站流感預(yù)防章節(jié)及瑞典流感指南推薦奧司他韋用于暴露前抗病毒預(yù)防的療程為7~10 d，但對于反復(fù)暴露風(fēng)險(xiǎn)高且藥物耐受良好的高危人群，可適當(dāng)延長療程。若接受暴露前預(yù)防的患者出現(xiàn)流感癥狀，需進(jìn)行流感核酸檢測，確診后改用治療劑量，避免延誤治療。盡管各部指南還推薦使用扎那米韋，但鑒于其在我國可及性極低，本指南暫不做推薦。新型核酸內(nèi)切酶抑制劑如瑪巴洛沙韋，雖已獲批用于非妊娠成人的流感暴露后預(yù)防，但目前尚無高質(zhì)量RCT證實(shí)其可用于暴露前預(yù)防。
這份權(quán)威指南為抗流感藥物的臨床應(yīng)用設(shè)立了清晰的終點(diǎn)，而新藥的研發(fā)則是通往這一終點(diǎn)的起點(diǎn)。「DIFF CRO」服務(wù)正是連接起點(diǎn)與終點(diǎn)的橋梁，為抗流感藥物研發(fā)賦能。
「DIFF CRO」服務(wù)：為抗流感藥物研發(fā)賦能?
「DIFF CRO」憑借其深厚的病毒學(xué)研究積淀，為抗流感藥物的研發(fā)提供從早期篩選到體內(nèi)驗(yàn)證的全流程CRO服務(wù)。其核心優(yōu)勢體現(xiàn)在以下三個(gè)方面：
1、體外藥效篩選：快速驗(yàn)證，精準(zhǔn)優(yōu)化
在抗流感新藥研發(fā)初期，「DIFF CRO」通過先進(jìn)的體外藥效評價(jià)體系，幫助客戶快速篩選和優(yōu)化候選化合物，其服務(wù)特色包括：
例如，在流感藥物篩選中，采用CPE assay精準(zhǔn)繪制化合物對多種流行株（如H1N1-PR8、耐藥株H1N1-PR8-NA-H274Y等）的劑量抑制曲線，為客戶提供直觀的EC50數(shù)據(jù)，助力早期決策。
圖1.瑪巴洛沙韋對PR8的抑制率曲線
圖2.Baloxavir Marboxil對PR8-NA-H274Y-PA-I38T株的抑制率曲線
2、體內(nèi)藥效驗(yàn)證：模型可靠，數(shù)據(jù)過硬
體外實(shí)驗(yàn)的成功必須經(jīng)過體內(nèi)模型的驗(yàn)證。「DIFF CRO」體內(nèi)藥效評價(jià)服務(wù)內(nèi)容全面，模型成熟可靠：
流感體內(nèi)攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)
「DIFF CRO」研發(fā)團(tuán)隊(duì)成功建立了流感病毒感染小鼠模型，攻毒后模型組小鼠體重急劇下降并達(dá)到人道終點(diǎn)，驗(yàn)證了模型的可靠性。在此模型上，抗流感藥物磷酸奧司他韋展現(xiàn)出顯著的治療優(yōu)勢：其能有效緩解感染導(dǎo)致的體重下降并促進(jìn)恢復(fù)，顯著提高生存率。
圖3.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的體重變化趨勢
圖4.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的小鼠存活率情況統(tǒng)計(jì)
肺臟病毒載量檢測證實(shí)該流感動(dòng)物模型建模成功，模型組在第3天即出現(xiàn)極高病毒復(fù)制。關(guān)鍵的是至第8天，給藥組達(dá)菲能極顯著地降低肺組織病毒載量，降幅達(dá)到數(shù)量級。
圖5.H1N1-PR8攻毒模型肺臟灌洗液病毒滴度
流感熒光報(bào)告病毒活體成像
利用「DIFF CRO」研發(fā)團(tuán)隊(duì)構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒MA-PR8-NanoLuc，可對流感抗病毒藥物進(jìn)行評估。「DIFF CRO」研發(fā)團(tuán)隊(duì)構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒具有很強(qiáng)的熒光信號，可在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)GFP熒光蛋白，可查看病毒在感染模型體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布情況。
圖6.H1N1-PR8在感染模型體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布情況
HE染色及病理檢測：
肺部：HE染色清晰揭示了肺組織的中低度彌漫性病變。其優(yōu)勢在于能精準(zhǔn)定位炎性浸潤主要集中于血管及氣管周，并可鑒別浸潤細(xì)胞類型，如發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞比例輕度上升。同時(shí)，該方法直觀顯示了肺泡積液、出血、淤血及結(jié)構(gòu)塌陷等關(guān)鍵病理改變的嚴(yán)重程度（如塌陷區(qū)域達(dá)2/5）和空間分布，為評估組織損傷提供了全面的形態(tài)學(xué)依據(jù)。
氣管：通過HE病理檢測，可精確認(rèn)定氣管上皮損傷輕微，其優(yōu)勢體現(xiàn)在能清晰區(qū)分氣管周中低度炎性浸潤與管腔內(nèi)血性淤積、脫落上皮細(xì)胞等混合性病變。此外，該方法還能有效觀察周邊結(jié)構(gòu)，如發(fā)現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)中度活化這一系統(tǒng)性炎癥證據(jù)，從而從局部到整體全面評估感染與免疫應(yīng)答狀態(tài)，凸顯了其宏觀與微觀相結(jié)合的獨(dú)特價(jià)值。
細(xì)胞因子檢測：
圖7.qRT-PCR相對定量方法檢測了肺組織中IL-6關(guān)鍵細(xì)胞因子的mRNA相對表達(dá)量
本研究采用qRT-PCR法定量檢測肺組織關(guān)鍵炎癥因子mRNA表達(dá)。該方法的優(yōu)勢在于其高靈敏度與特異性，能精準(zhǔn)捕獲感染早期（3dpi）炎癥應(yīng)答的瞬時(shí)上調(diào)，并動(dòng)態(tài)監(jiān)測到后期（8dpi）給藥組的調(diào)控趨勢。這有力地揭示了藥物在抑制病毒復(fù)制之外，可能通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)路徑減輕病理損傷的潛在機(jī)制。
3、 資源完備：覆蓋廣泛的病毒資源庫與耐藥株平臺?
「DIFF CRO」不僅建立了完善的流感病毒毒株資源庫，還持續(xù)構(gòu)建包括高致病性病毒假病毒及特定藥物耐藥株在內(nèi)的多種資源。基于此平臺，公司可進(jìn)行系統(tǒng)的機(jī)制驗(yàn)證：通過將野生型病毒與耐藥株進(jìn)行平行對比，可快速甄別并驗(yàn)證藥物是否具備克服原有耐藥性的潛力。同時(shí)，依托資源庫中的不同病毒亞型，還可開展廣譜效價(jià)評估，為藥物適應(yīng)癥的拓展提供關(guān)鍵的數(shù)據(jù)支持。
表1.「DIFF CRO」流感毒株資源庫
表2.「DIFF CRO」流感耐藥株毒庫
我們的抗病毒新藥藥效評價(jià)服務(wù)嚴(yán)格遵循國家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，已建立覆蓋項(xiàng)目全流程的標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量控制體系。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均確保真實(shí)、可溯源、可重復(fù)，能夠直接用于支持新藥的IND申報(bào)、注冊備案及技術(shù)合作，為您的創(chuàng)新成果提供從實(shí)驗(yàn)室到臨床的堅(jiān)實(shí)橋梁。
流感新藥的研發(fā)成功，高度依賴于可靠、高效的藥效學(xué)證據(jù)支持。「DIFF CRO」一站式藥效評價(jià)方案，正是以完備的資源庫與前沿的技術(shù)平臺為驅(qū)動(dòng)，為客戶提供從抗病毒藥物篩選到體內(nèi)藥效驗(yàn)證的全鏈條數(shù)據(jù)支撐，助力抗病毒藥物研發(fā)降本增效，加速上市進(jìn)程。
參考文獻(xiàn)：
中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì). 中國流感治療與藥物預(yù)防臨床實(shí)踐指南（2025版）[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志，2025，106(00):1-18.