別藻藍蛋白(Allophycocyanin ,APC，以下簡稱APC)是一種從紅藻中提純的高亮度藻膽蛋白分子量104kDa，屬于遠紅色熒光，具有很高的量子產量。激光594 nm和633 nm處激發其發光，在650 nm處吸收峰最大，在660 nm處熒光發射峰最大。APC比普通的化學發光強100倍，在普通應用中，其至少可以提高靈敏度5-10倍，主要用于流式細胞術、微陣列分析、ELISAs等。APC主要優點是發射長波熒光，抗淬滅性強，高水溶性，均質結構，分子量確定。
基本原理：
利用抗體和APC上游離的氨基，采用定向對接偶聯技術將抗體分子與APC共價偶聯，
別藻藍蛋白標記抗體
1).抗體的修飾
a. 取待標記抗體（純度>90%），用標記緩沖液（0.1M PBS pH 7.2）調整到 2mg/ml左右為宜，按照每mg抗體加入一定量抗體修飾試劑溶液，輕輕混勻，在室溫下避光攪拌反應 90分鐘；【如果抗體量太少，抗體修飾試劑溶液加入量不少于0.5ul】
b. 反應完畢后，將其轉入30K MWCO超濾管，用標記緩沖液超濾5-10次（每次12000rpm 1min），每次管芯內液體體積不超過原體積1/4為宜，最后一次超濾完成，管芯內液體即為修飾的抗體。
2).活化APC蛋白與抗體偶聯
a. 將修飾抗體與活化APC蛋白溶液混合（每1mg修飾抗體對應62.5ul活化APC溶液），室溫避光反應1小時；
b. 標記好的抗體分裝，加入適當保護劑，-20℃保存備用。
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貨號 |
產品名稱 |
規格 |
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ARL0023K-1 |
別藻藍蛋白抗體快速標記試劑盒 |
0.5mg |
別藻藍蛋白抗體快速標記試劑盒