你知道怎樣選購卡那霉素（Kanamycin）么？
今天實驗室同事讓小編采購一點卡那霉素，小編打開Sigma官網搜索“卡那霉素”，徹底迷茫了，那么多種類。
做分子克隆，卡那霉素到底買哪一種？
一句話明示：普通 KanR 質粒篩選，買 Kanamycin sulfate（Kanamycin A sulfate salt）即可。
做分子克隆時，很多人第一次采購卡那霉素都會被目錄繞暈：Kanamycin sulfate、Kanamycin A、Kanamycin B、Kanamycin C、USP 標準品、HPLC 對照品……名字很多，看起來像一道復雜選擇題。其實，如果你的用途只是用于含有卡那抗性質粒載體改造，帶 KanR 的大腸桿菌質粒篩選，答案非常簡單。
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采購結論：常規分子克隆選 Kanamycin sulfate / Kanamycin A sulfate salt，分子生物學級、BioReagent 級或細胞培養級均可。Merck/Sigma 體系里，K1377 可作為首選，K4000 也可用于常規篩選。很多國產的也能用。 |
A、B、C到底是什么意思？
卡那霉素屬于氨基糖苷類抗生素。供應商目錄中出現的 Kanamycin A、B、C，更多是化學組成、發酵相關組分或分析檢測語境下的細分名稱。對分子克隆來說，我們關心的不是研究哪一個異構體，而是能否穩定篩選帶有 KanR 抗性基因的菌株。
因此，實驗室常規使用的“卡那霉素”通常就是 Kanamycin sulfate，產品同義名里常寫作 Kanamycin A / Kanamycin sulfate salt。看到這個組合，就基本選對了。
哪些不要優先買？
• Kanamycin B / Kanamycin C：除非你要做成分分析、藥典研究或特定抗生素機制研究，否則不建議作為克隆篩選常規采購對象。
• USP/EP 標準品、HPLC 對照品：這些更適合質量控制、含量測定或法規檢測，價格和用途都不適合普通平板篩選。
• 臨床注射劑或復雜制劑：輔料、濃度、滅菌方式和保存體系不一定適合分子生物學實驗。
卡那霉素的配制與保存
配制方法：
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稱取 Kanamycin sulfate，用無菌水配成 50 mg/mL。
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用 0.22 μm 濾膜除菌，不要高壓滅菌。Merck 頁面也建議無菌過濾制備無菌溶液。
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分裝，-20°C 保存更穩妥。
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用時按 1:1000 加入培養基：例如 100 mL LB 加 100 μL 50 mg/mL 卡那霉素儲液，即 50 μg/mL。
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倒平板時等 LB agar 冷到約 50–55°C 再加抗生素。
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項目 |
推薦做法 |
備注 |
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儲液濃度 |
50 mg/mL |
用無菌水或ddH2O溶解 |
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除菌方式 |
0.22 μm濾膜過濾 |
不要高壓滅菌 |
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平板/液體終濃度 |
50 μg/mL |
大多數E. coli KanR質粒適用 |
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加入比例 |
1:1000 |
100 mL培養基加100 μL儲液 |
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保存 |
分裝避光，-20°C更穩妥 |
短期可按供應商建議冷藏 |
結語
所以，采購時不要被 A、B、C 和各種標準品名稱帶偏。只要是常規 KanR 質粒篩選，認準“Kanamycin sulfate / Kanamycin A sulfate salt”即可。真正需要花精力確認的，反而是質粒圖譜上抗性標記是否為 KanR、培養基終濃度是否合適，以及抗生素儲液是否新鮮、無菌、未反復凍融。
參考資料
[1] Merck/Sigma-Aldrich. Kanamycin sulfate from Streptomyces kanamyceticus, K1377 product page. 該頁面列出同義名 Kanamycin A / Kanamycin sulfate salt，并注明 BioReagent、粉末、細胞培養/植物細胞培養適用，以及水中溶解度和過濾除菌說明。
[2] Merck/Sigma-Aldrich. Kanamycin sulfate from Streptomyces kanamyceticus, K4000 product page. 該頁面說明 Kanamycin sulfate 為來源于 Streptomyces kanamyceticus 的廣譜氨基糖苷類抗生素，可作為培養基添加劑。
[3] Addgene. Pouring LB Agar Plates / Molecular Biology Reference. 常用抗生素表中推薦 Kanamycin 儲液 50 mg/mL，工作濃度 50 μg/mL。