近日，流感進(jìn)入高發(fā)季節(jié)，疊加廣州氣溫明顯下降，不少學(xué)校相繼出現(xiàn)學(xué)生集中缺課的情況。多位家長反映，新一周返校后，孩子班級里因發(fā)熱、咳嗽等癥狀請假的學(xué)生數(shù)量大幅攀升，部分班級缺課人數(shù)接近半數(shù)，學(xué)校不得不臨時(shí)停課。
廣東最新的流感周報(bào)顯示，門急診流感樣病例標(biāo)本流感病毒陽性檢出率達(dá)到30.91%，為近期新高；一周的流感暴發(fā)疫情已達(dá)到14起，也為近期新高。
圖1.廣州婦兒中心兒內(nèi)科門診
圖片來源：CDC疾控人
周報(bào)指出，在檢出流感病毒的陽性標(biāo)本中，A（H3N2）亞型占98.19%，A（H1N1）pdm09亞型占1.20%，B（Victoria）系占0.60%。
目前已有一系列用于應(yīng)對流感的抗病毒藥物，但在面對活躍傳播和多亞型并存的流行格局時(shí)，仍存在靶點(diǎn)有限、耐藥風(fēng)險(xiǎn)上升、覆蓋范圍不足等挑戰(zhàn)。因此，加快更高效、更廣譜的抗病毒藥物研發(fā)依然十分迫切。而從早期發(fā)現(xiàn)到臨床前驗(yàn)證的每一個環(huán)節(jié)，都離不開專業(yè)、高效的技術(shù)支持平臺，為新一代抗病毒藥物的迭代提供關(guān)鍵支撐。
DIFF CRO服務(wù)：為抗流感藥物研發(fā)賦能?
迪福潤絲生物憑借其深厚的病毒學(xué)研究積淀，為抗流感藥物的研發(fā)提供從早期篩選到體內(nèi)驗(yàn)證的全流程CRO服務(wù)。其核心優(yōu)勢體現(xiàn)在以下三個方面：
1、體外藥效篩選：快速驗(yàn)證，精準(zhǔn)優(yōu)化
在抗流感新藥研發(fā)初期，迪福潤絲通過先進(jìn)的體外藥效評價(jià)體系，幫助客戶快速篩選和優(yōu)化候選化合物，其服務(wù)特色包括：
例如，在流感藥物篩選中，采用CPE assay精準(zhǔn)繪制化合物對多種流行株（如H1N1-PR8、耐藥株H1N1-PR8-NA-H274Y等）的劑量抑制曲線，為客戶提供直觀的EC50數(shù)據(jù)，助力早期決策。
2、體內(nèi)藥效驗(yàn)證：模型可靠，數(shù)據(jù)過硬
體外實(shí)驗(yàn)的成功必須經(jīng)過體內(nèi)模型的驗(yàn)證。迪福潤絲的體內(nèi)藥效評價(jià)服務(wù)內(nèi)容全面，模型成熟可靠：
流感體內(nèi)攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)
迪福潤絲的研發(fā)團(tuán)隊(duì)成功建立了流感病毒感染小鼠模型，攻毒后模型組小鼠體重急劇下降并達(dá)到人道終點(diǎn)，驗(yàn)證了模型的可靠性。在此模型上，抗流感藥物磷酸奧司他韋展現(xiàn)出顯著的治療優(yōu)勢：其能有效緩解感染導(dǎo)致的體重下降并促進(jìn)恢復(fù)，顯著提高生存率。
圖7.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的體重變化趨勢
圖8.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的小鼠存活率情況統(tǒng)計(jì)
肺臟病毒載量檢測證實(shí)該流感動物模型建模成功，模型組在第3天即出現(xiàn)極高病毒復(fù)制。關(guān)鍵的是至第8天，給藥組達(dá)菲能極顯著地降低肺組織病毒載量，降幅達(dá)到數(shù)量級。
圖9.H1N1-PR8攻毒模型肺臟灌洗液病毒滴度
流感熒光報(bào)告病毒活體成像
利用迪福潤絲生物構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒MA-PR8-NanoLuc，可對流感抗病毒藥物進(jìn)行評估。迪福潤絲生物構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒具有很強(qiáng)的熒光信號，可在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)GFP熒光蛋白，可查看病毒在感染模型體內(nèi)的動態(tài)分布情況。
圖10.H1N1-PR8在感染模型體內(nèi)的動態(tài)分布情況
HE染色及病理檢測:
肺部：HE染色清晰揭示了肺組織的中低度彌漫性病變。其優(yōu)勢在于能精準(zhǔn)定位炎性浸潤主要集中于血管及氣管周，并可鑒別浸潤細(xì)胞類型，如發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞比例輕度上升。同時(shí)，該方法直觀顯示了肺泡積液、出血、淤血及結(jié)構(gòu)塌陷等關(guān)鍵病理改變的嚴(yán)重程度（如塌陷區(qū)域達(dá)2/5）和空間分布，為評估組織損傷提供了全面的形態(tài)學(xué)依據(jù)。
氣管：通過HE病理檢測，可精確認(rèn)定氣管上皮損傷輕微，其優(yōu)勢體現(xiàn)在能清晰區(qū)分氣管周中低度炎性浸潤與管腔內(nèi)血性淤積、脫落上皮細(xì)胞等混合性病變。此外，該方法還能有效觀察周邊結(jié)構(gòu)，如發(fā)現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)中度活化這一系統(tǒng)性炎癥證據(jù)，從而從局部到整體全面評估感染與免疫應(yīng)答狀態(tài)，凸顯了其宏觀與微觀相結(jié)合的獨(dú)特價(jià)值。
細(xì)胞因子檢測：
圖11.qRT-PCR相對定量方法檢測了肺組織中IL-6關(guān)鍵細(xì)胞因子的mRNA相對表達(dá)量
本研究采用qRT-PCR法定量檢測肺組織關(guān)鍵炎癥因子mRNA表達(dá)。該方法的優(yōu)勢在于其高靈敏度與特異性，能精準(zhǔn)捕獲感染早期（3dpi）炎癥應(yīng)答的瞬時(shí)上調(diào)，并動態(tài)監(jiān)測到后期（8dpi）給藥組的調(diào)控趨勢。這有力地揭示了藥物在抑制病毒復(fù)制之外，可能通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)路徑減輕病理損傷的潛在機(jī)制。
3、 資源完備：覆蓋廣泛的病毒資源庫與耐藥株平臺?
迪福潤絲生物不僅建立了完善的流感病毒毒株資源庫，還持續(xù)構(gòu)建包括高致病性病毒假病毒及特定藥物耐藥株在內(nèi)的多種資源。基于此平臺，公司可進(jìn)行系統(tǒng)的機(jī)制驗(yàn)證：通過將野生型病毒與耐藥株進(jìn)行平行對比，可快速甄別并驗(yàn)證藥物是否具備克服原有耐藥性的潛力。同時(shí)，依托資源庫中的不同病毒亞型，還可開展廣譜效價(jià)評估，為藥物適應(yīng)癥的拓展提供關(guān)鍵的數(shù)據(jù)支持。
表1.迪福潤絲生物流感毒株資源庫
表2.迪福潤絲生物的流感耐藥株毒庫
迪福潤絲抗病毒新藥藥效評價(jià)服務(wù)嚴(yán)格遵循國家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，已建立覆蓋項(xiàng)目全流程的標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量控制體系。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均確保真實(shí)、可溯源、可重復(fù)，能夠直接用于支持新藥的IND申報(bào)、注冊備案及技術(shù)合作，為您的創(chuàng)新成果提供從實(shí)驗(yàn)室到臨床的堅(jiān)實(shí)橋梁。
流感新藥的研發(fā)成功，離不開可靠、高效的藥效學(xué)證據(jù)支持。迪福潤絲生物“DIFF+”一站式藥效評價(jià)方案，依托完備的資源庫與前沿的技術(shù)平臺，為客戶提供從抗病毒藥物篩選到體內(nèi)藥效驗(yàn)證的全鏈條數(shù)據(jù)支撐，助力改良型抗病毒藥物降本增效，加速上市進(jìn)程。