抗原特異性T細(xì)胞的活化，是適應(yīng)性免疫應(yīng)答的核心環(huán)節(jié)。這一過(guò)程始于主要組織相容性復(fù)合體（Major histocompatibility complex，MHC）通過(guò)非共價(jià)相互作用與肽抗原結(jié)合，在抗原呈遞細(xì)胞（Antigen presenting cell，APC）表面形成pMHC復(fù)合物，這些復(fù)合物可在次級(jí)淋巴組織或炎癥局部被特異性T細(xì)胞群體識(shí)別。
T細(xì)胞的激活與功能發(fā)揮依賴于兩個(gè)關(guān)鍵信號(hào)的協(xié)同作用：第一信號(hào)來(lái)源于T細(xì)胞受體（TCR）/CD3復(fù)合物識(shí)別APC表面的pMHC復(fù)合物。這一步驟確保了T細(xì)胞能夠特異性地識(shí)別外來(lái)抗原或自身異常抗原。第二信號(hào)則來(lái)自協(xié)同刺激分子間的相互作用，如CD28/B7、LFA-1/ICAM-1等。這些分子的結(jié)合為T(mén)細(xì)胞提供了額外的活化信號(hào)，確保T細(xì)胞在識(shí)別抗原的同時(shí)，也獲得了足夠的刺激以啟動(dòng)其活化程序。
T細(xì)胞活化信號(hào)（Source：Nat Rev Immunol.）
在上述激活路徑中，多肽與MHC分子之間的親和力是成功啟動(dòng)免疫應(yīng)答的首要決定因素。MHC分子如同一個(gè)“展示平臺(tái)”，只有那些與之具有足夠高親和力的多肽才能被穩(wěn)定地結(jié)合并呈遞到細(xì)胞表面，從而形成pMHC復(fù)合物。因此，篩選能夠與特定MHC分子（如HLA-A*02:01）高親和力結(jié)合的多肽，已成為開(kāi)發(fā)新型疫苗、免疫療法及診斷工具的核心環(huán)節(jié)與關(guān)鍵步驟。
盡管基于多肽置換生成pMHC復(fù)合物是一項(xiàng)成熟技術(shù)，但其在置換效率的精準(zhǔn)監(jiān)控、操作通量以及復(fù)合物的穩(wěn)定性方面仍面臨顯著瓶頸。為此，ACROBiosystems百普賽斯基于肽交換原理，開(kāi)發(fā)了HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒（Cat. No. HEP-0201），為高效篩選肽段與MHC單體的結(jié)合能力提供了創(chuàng)新解決方案。
該檢測(cè)方法將目標(biāo)肽段、特有的肽置換因子及含有特殊退出肽的MHC I類(lèi)單體（HLA-A*02:01）共同孵育。該策略能高效驅(qū)動(dòng)交換反應(yīng)，隨后通過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)可在96孔板中對(duì)肽交換效率進(jìn)行精確定量。該方法用途廣泛，覆蓋了從MHC結(jié)合肽初篩、親和力評(píng)估和抗原表位鑒定等一系列關(guān)鍵應(yīng)用，是新藥研發(fā)的重要工具。
HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒檢測(cè)原理
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高通量定量篩選：基于96孔板，6小時(shí)快速、定量篩選目標(biāo)肽；
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高檢測(cè)靈敏度： 參考肽IC50值為6.237 μM；
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卓越的數(shù)據(jù)一致性：預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值符合率高達(dá)88%。
參考肽與生物素化MHC I 類(lèi)單體的交換實(shí)驗(yàn)
??靈敏度驗(yàn)證：IC50達(dá)6.237 μM
使用HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒（Cat. No. HEP-0201），將HLA-A*02:01 參考肽 (Cat. No. HEP-0201-C04) 進(jìn)行系列稀釋?zhuān)?:3 倍比稀釋?zhuān)瑵舛确秶鷱?200μM 至 0.05 μM），然后與生物素化MHC I類(lèi)單體 (HLA-A*02:01) (Cat. No. HEP-0201-C02) 混合。在該夾心ELISA檢測(cè)中，其半數(shù)抑制濃度（IC50）為 6.237 μM。通常，在200 μM濃度下，其肽交換率可達(dá) 93.1%。（此數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制測(cè)試驗(yàn)證）
??預(yù)測(cè)與實(shí)測(cè)高度一致：IC50值符合率高達(dá)88%
在所測(cè)試的多肽中，預(yù)測(cè)與實(shí)測(cè)的IC50值顯示出高度一致性，符合率高達(dá)88%（42條中有37條與預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)相符）。
MHC-多肽復(fù)合物產(chǎn)品及開(kāi)發(fā)服務(wù)
為滿足客戶多樣化需求，ACROBiosystems百普賽斯依托成熟的蛋白天然結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)平臺(tái)和真核蛋白表達(dá)技術(shù)平臺(tái)，開(kāi)發(fā)出一系列經(jīng)流式細(xì)胞驗(yàn)證的高生物活性天然結(jié)構(gòu)MHC-復(fù)合物，并且可提供定制開(kāi)發(fā)服務(wù)，覆蓋單體、四聚體以及多種熒光標(biāo)記類(lèi)型，可根據(jù)具體需求個(gè)性化定制。
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