FLT-3L，全稱為FMS樣酪氨酸激酶3配體，也被稱為FLT3配體或Flt3L。其主要功能是通過與細胞表面的FLT3受體結合，激活下游的信號通路，從而調控造血干細胞的增殖、分化和存活。

FLT3L是一種分泌型糖蛋白，屬于I型跨膜蛋白家族，其天然存在膜結合型和可溶性兩種異構體——膜結合型可通過蛋白酶切釋放，形成具有生物活性的可溶性FLT3L，二者均能與細胞表面的FLT3（CD135）受體特異性結合，激活下游信號通路。

Flt3-Ligand廣泛表達于多種組織細胞，如骨髓基質細胞、成纖維細胞、內皮細胞、肝細胞及活化的 T 細胞等，在感染或炎癥狀態下其表達水平會顯著上調。

一、結構特征

1?? 屬于Ⅰ型跨膜蛋白家族

2?? 具有四螺旋束結構的造血細胞因子

3?? 存在膜結合型和可溶型兩種活性形式

4?? 與集落刺激因子結構相似但功能獨特

圖1.  FLT3L蛋白結構

二、生物功能

1.調控造血干 / 祖細胞（HSPCs）的發育

Flt3L 是造血系統的關鍵調節因子，通過激活 Flt3 信號參與 HSPCs 的存活、增殖與分化：

維持干細胞池：與其他細胞因子（如干細胞因子 SCF）協同，促進造血干細胞的自我更新，維持成體骨髓中造血干細胞的數量穩定。

定向分化引導：在髓系分化中，Flt3L 偏向促進粒 - 單核細胞祖細胞向單核細胞、樹突狀細胞（DC）分化，同時對淋巴系祖細胞（如 B 細胞前體）的存活和分化也有支持作用。

2.驅動樹突狀細胞（DC）的生成與功能

Flt3L 是 DC 生成的核心調控因子，其功能直接影響 DC 的數量、亞型及免疫活性：

DC 譜系發育：促進骨髓中 DC 前體細胞（如共同 DC 前體 CDP）的增殖和分化，是體內樹突狀細胞（尤其是經典 DC 和漿細胞樣 DC）生成的關鍵驅動因子。

增強 DC 功能：激活的 Flt3 信號可促進 DC 成熟（上調共刺激分子 CD80、CD86 及 MHCⅡ 類分子），增強其抗原攝取、加工及提呈能力，進而優化 T 細胞的激活效率（如促進 Th1 型免疫應答）。

3.調節免疫應答與免疫穩態

適應性免疫啟動：通過促進 DC 生成和成熟，Flt3L 間接調控 T 細胞、B 細胞的活化與增殖，在抗感染免疫（如病毒、細菌感染）中加速適應性免疫應答的啟動。

免疫耐受維持：在穩態下，Flt3L 通過調控 DC 的數量和功能（如誘導調節性 DC），參與外周免疫耐受的維持，避免過度免疫反應導致自身免疫病。

炎癥與組織修復：在感染或組織損傷時，局部 Flt3L 表達升高，通過募集和激活 DC，協調先天免疫與適應性免疫，促進病原體清除及組織修復。

三、信號通路

Flt3L/Flt3 信號通路是免疫細胞發育的關鍵調節因子，主要驅動造血祖細胞增殖、分化并存活，進而發育成樹突狀細胞（DCs）。Flt3 配體（Flt3L）與 Flt3 酪氨酸激酶受體（CD135）結合，從而激活下游的 PI3K/Akt/mTOR、RAS/MAPK 和 STAT3 信號通路。

FLT3L 信號通路的作用機制

Flt3L 的結合誘導受體二聚化、胞內結構域磷酸化，并激活一系列信號級聯反應，進而抑制細胞凋亡并促進細胞生長。DC 發育的必需條件：該通路對于生成常規樹突狀細胞（cDCs）和漿樣樹突狀細胞（pDCs）至關重要，而這兩類細胞對于 T 細胞功能必不可少。

信號通路網絡

JAK-STAT通路：調控細胞增殖和分化

PI3K-AKT通路：促進細胞存活

MAPK通路：影響細胞功能成熟

圖2.FLT3L信號通路圖^[1]

四、在細胞與基因治療領域的應用

1.造血干細胞（HSC）體外擴增

在CD34+造血干細胞體外培養體系中，聯合SCF、TPO、IL-3、IL-6等細胞因子，可顯著促進HSC的快速擴增，提升細胞活力，同時維持HSC的自我更新能力，為造血干細胞移植提供充足的細胞來源。

圖3.體外造血干細胞擴增培養組分^[2]

2.誘導多能干細胞（iPSC）向HSC分化

聯合SCF、TPO、FGF basic、VEGF165等因子，可顯著促進iPSC分化為造血干細胞樣細胞（HSPC），高表達CD34、CD45等造血干細胞標志物，為再生醫學、造血功能障礙治療提供新的細胞來源。

3.樹突狀細胞（DC）疫苗制備

DC細胞是腫瘤免疫治療的核心抗原呈遞細胞，在體外培養體系中添加GMP級重組人FLT3L，可高效擴增DC細胞前體，誘導DC細胞成熟，提升其抗原呈遞能力，用于制備DC疫苗，聯合腫瘤抗原、免疫檢查點抑制劑等，增強抗腫瘤免疫應答，已在急性髓系白血病（AML）等腫瘤治療中開展臨床研究。

4.樹突狀細胞（DC）疫苗制備

在CAR-T細胞體外培養過程中，添加FLT3L可優化抗原呈遞步驟，提升T細胞的活化與擴增效率，增強CAR-T細胞的抗腫瘤活性，改善治療效果。

五、翌圣GMP級重組人FLT3L蛋白介紹

為滿足細胞治療藥物不同開發階段的需求，翌圣開發了科研級和GMP級重組人FLT3L。我們對GMP級FLT3L進行了全面的質量控制測試，保證產品的純度、活性、安全性和一致性的嚴格標準。YEASEN的GMP級重組人Human FLT3L蛋白，使用CHO細胞表達，高活性、高純度、無動物源性污染。

產品優勢

高純度：>95%，避免宿主蛋白（HCP）或DNA殘留導致的免疫反應。

超低內毒素：<10 EU/mg，減少發熱或炎癥風險。

批次間一致性：確保細胞培養的穩定性和可重復性。

合規性：滿足細胞治療產品的監管要求，支持IND申報。

無動物源性：無動物病毒、無致病物質、無外源因子污染，安全性高。

遵循監管準則

GMP級蛋白的生產和質控符合以下體系及流程：

1.符合《中華人民共和國藥典》2020年版三部通則：生物制品生產用原材料及輔料質量控制

2.符合USP Chapter <92> Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing

3.符合Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products.

質量管理體系

1.GMP蛋白在經ISO 13485:2016認證的質量管理體系下生產、檢測和放行，確保批間一致性、材料可追溯性。

2.具有批準質量證書（COA）

3.無動物源性材料和生產環境

4.醫藥產品原輔料生產基地

5.支持線上/線下審計

產品安全性質檢體系

內毒素：<10 EU/mg

宿主DNA殘留：< 20 ng/mg

宿主蛋白殘留：< 0.5 ng/μg

無菌檢測：陰性

支原體檢測：陰性

外源病毒檢測：陰性

六、產品數據

1.SDS-PAGE

Figure 5. The purity is greater than 95% as determined by SDS-PAGE under reduced condition.

2. Cell Based Assay

Figure 6. The ED50 as determined by a cell proliferation assay using human AML5 cells is less than 2.0 ng/mL.

相關產品信息

*參考文獻

[1] Anna O、Fabian G、Diane Z, et al.FLT3 Gene Involvement in B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia (B-ALL).Immunity .2010,October 29, Volume 33, Issue 4p580-582.

[2] Grace A Meaker , Adam C Wilkinson .Ex vivo hematopoietic stem cell expansion technologies: recent progress, applications, and open questions.Exp Hematol.2024 Feb,Volume 130:104136.

[3] Mohsen E, Mehdi F, Setareh R, et al.Differentiation of human induced pluripotent stem cells into erythroid cells.Stem Cell Research & Therapy.2020, 16 November, Volume 11, number 483.