NC(Nitrocellulose,**纖維素)膜在免疫層析檢測技術起著至關重要的作用。因其具有高蛋白結合能力和優秀的層析性能,可用作免疫層析檢測試劑中檢測線T和質控線C的固相支撐介質。通過免疫反應顯色,用戶可以直接在膜上判讀結果。 ? ? 受國家政策的引導和市場需求的推動,近年來POCT廠商對NC膜的需求急速攀升。作為核心原材料,NC膜的質量和性能將直接影響檢測結果的準確性和可靠性。那么POCT廠商應該如何對不同供應商的NC膜進行評價和選擇呢? 通常,影響NC膜性能的指標包括: 外觀 厚度 幅寬 背襯 爬速 蛋白吸附 外觀 外觀可在光源下進行目視檢查。膜表面如果不平整、光滑,有異物、粉塵、針眼、劃痕或壓痕等缺陷,一方面會影響C/T線質量,造成斷線、粗細不均等缺陷;另一方面,則會影響液體在膜內的流動,導致液流不規則。 質量合格的膜 有缺陷的膜 劃膜缺陷示意 厚度 厚度可采用測厚儀進行測量,在NC膜上選擇幾個點進行測量以考察其均勻性。厚度若不均勻,會導致劃出來的C/T線寬窄不一。在捕獲試劑用量不變的情況下,膜越厚C/T線越窄,反之亦然。 幅寬 幅寬可采用普通直尺或游標卡尺測量。常用的幅寬有20mm和25mm兩種規格,廠家可根據實際生產工藝的需求進行選擇,特殊的規格也可與供方協商定制。 背襯 NC膜有無背襯和帶背襯兩種類型。由于材質本身特性,無背襯NC膜很脆,容易破裂,加工過程存在一定的難度。帶背襯NC膜是直接將**纖維素聚合物澆筑在透明的基帶上成型后得到。 得益于背襯的存在,一方面使得NC膜強度得到提高,易于生產、加工操作;另一方面,在粘貼到PVC膠板后,背襯可以有效地阻隔膠內物質遷移進入NC膜,避免對性能造成影響。 爬速 起泡點測試是表征濾膜孔徑最常用的方法,但是它只適用于測定垂直流動方向的膜孔徑,對測定側向流動方向的膜孔徑并不適用。 目前,行業內統一采用爬速測試的方法來表征側向流動方向的膜孔徑。爬速可以用秒表測定純化水從膜的底部通過毛細作用“爬”到4cm頂端所用的時間(s)得到。根據爬速的不同,NC膜一般可分為快流速、中流速和慢流速三類。流速越快,意味著孔徑越大。 爬速測試示意 爬速是非常重要的指標,其影響主要包括: 一定范圍內,流速越快,檢測時間越短; 流速加快,反應時間縮短,分析物表觀濃度降低,導致靈敏度降低; 流速越慢,發生非特異性結合的可能性就越大。 所以,實際在開發免疫層析檢測試劑時需要綜合考慮上述影響以達到性能的最佳平衡。 蛋白吸附 如何將捕獲分子持續、牢固的結合在檢測線T和質控線C,是生產一個靈敏、可靠的免疫層析檢測試劑的關鍵。雖然NC膜自第一次制備以來至今已有一百余年,但是其與蛋白結合的真實機理科學家們仍未達成共識。目前普遍認同的是,NC膜與蛋白的結合是彼此之間疏水作用力、氫鍵以及靜電吸力三者共同作用的結果。蛋白與膜結合能力的強弱將直接影響檢測靈敏度和C/T線的寬度。 一般來說,影響NC膜和蛋白結合的因素包括: 1)制膜材料本身的性質; 2)比表面積; 3) 表面活性劑的含量。 制膜材料的影響。不同廠家生產的NC膜雖然都是由**纖維素制成,但是不同原材料在性能上存在一定差異,會導致與蛋白的結合能力有不所同。 比表面積。比表面積越大,意味著膜內聚合物表面積越大,可與蛋白進行結合位點越多,蛋白結合能力越強。 表面活性劑含量。表面活性劑對NC膜起到潤濕的作用,但是濃度過高則可能會影響NC膜與蛋白的結合。 除了按供方提供的質量標準和檢驗方法對NC膜的各項性能指標進行驗證外,POCT廠商還可以結合自己的生產工藝對其性能(如靈敏度、特異性等)進行確認,從而選擇一款滿足實際生產需求的NC膜。
如何進行NC膜的評價和選型?
作者:浙江泰林生物技術股份有限公司 2022-04-21T15:06 (訪問量:14155)
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