?SSH是一項可以快速獲取兩個不同生物材料中差異表達(dá)基因的分子生物學(xué)技術(shù),是快速篩選差異表達(dá)基因的有效方法,也是尋找新基因的重要手段。該技術(shù)尤其適合以
genome尚不完全清晰的物種或者以特殊材料為研究對象的科研工作者。是基因芯片技術(shù)的有效補(bǔ)充。
? ?基本流程:通過差減文庫構(gòu)建,文庫驗證和篩選(逆向斑點雜交),獲得陽性克隆,對陽性克隆測序及生物信息分析,可判定差異基因的情況。另外結(jié)合RACE技術(shù)可進(jìn)一步克隆所獲得的差異基因的cDNA全長序列,并可用Northern blot 或Real-Time PCR加以驗證。
? 抑制性消減雜交文庫技術(shù)
是一種革命性的差異表達(dá)基因篩選技術(shù)。該方法結(jié)合了抑制性PCR和消減雜交技術(shù),即御用PCR反應(yīng)鏈內(nèi)退火有限于鏈間退火的特點和分子雜交二級動力學(xué)原理,經(jīng)過體系不斷優(yōu)化建立起來的快捷、有效的差異基因篩選方法。與傳統(tǒng)的DD—PCR、SAGE及cDNA—RNA等技術(shù)相比,具有低豐度mRNA富集效率高、假陽性低、靈敏度高重復(fù)性好等特點。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于動植物發(fā)育和分化、疾病易感性差異、抗藥性差異和組織(病理和正常樣本)差異及微生物基因分型差異的研究。
技術(shù)方法成熟有效
不需要利用傳統(tǒng)的物理方法對單鏈、雙鏈cDNA進(jìn)行分離。只要目的序列存在,就能進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增,篩選出差異基因片段。
放大稀有轉(zhuǎn)錄本
本技術(shù)在同一操作下完成轉(zhuǎn)錄本豐度平衡和差減,在我們的模型實驗中,稀有轉(zhuǎn)錄本至少被放大了5000倍,也就是說,利用本及時可以極大地增加獲得表達(dá)差異地稀有轉(zhuǎn)錄本地可能性。
僅僅需要500ng的poly A+ RNA
與其他的消減雜交方法不同,應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)只需要0.5-2的poly A+ RNA即可進(jìn)行有效實驗。如果您只有極少量(50ng-100ng)的總RNA,我們可以通過poly A+ RNA的高保真線性放大技術(shù)來合成足量的cDNA來進(jìn)行抑制性消減雜交實驗。
美國光譜即用型透析袋優(yōu)惠促銷
(2016-04-20T17:13 瀏覽數(shù):25814)
MD18(2000)高精度即用型透析袋優(yōu)惠大促銷,買一送一
(2010-05-28T00:00 瀏覽數(shù):28111)
MD45(2000)高精度即用型透析袋優(yōu)惠大促銷
(2010-04-19T00:00 瀏覽數(shù):26973)
Real Time pcr(熒光定量pcr)技術(shù)服務(wù)促銷
(2010-03-22T00:00 瀏覽數(shù):32510)
上海基星生物耗材優(yōu)惠大促銷
(2010-03-17T00:00 瀏覽數(shù):28030)
上?;歉呔燃从眯屯肝龃黉N中
(2010-03-17T00:00 瀏覽數(shù):23839)
SSH抑制性消減雜交文庫構(gòu)建方法介紹
(2008-05-24T00:00 瀏覽數(shù):25993)
抑制性消減雜交文庫(SSH)技術(shù)服務(wù)
(2008-03-10T00:00 瀏覽數(shù):27010)
Real-Time PCR (熒光實時定量PCR)
(2008-03-10T00:00 瀏覽數(shù):27240)
RT-PCR技術(shù)服務(wù)
(2008-02-27T00:00 瀏覽數(shù):27586)