流感候選化合物體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)
在藥物發(fā)現(xiàn)過程中，迪福潤(rùn)絲生物科學(xué)家們首先通過體外實(shí)驗(yàn)來快速篩選和優(yōu)化候選藥物，以確定其潛在的療效和機(jī)制。體外藥效評(píng)價(jià)能夠提供快速和初步的信息，有助于減少不必要的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并提高研究效率。在這之后，就要進(jìn)行體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)。
臨床前的藥物發(fā)現(xiàn)階段的體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)主要包括以下幾個(gè)步驟：
1. 模型建立
動(dòng)物模型選擇：根據(jù)藥物靶點(diǎn)和疾病類型選擇合適的動(dòng)物模型。研究藥物致癌作用通常選用大鼠和小鼠；研究過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)時(shí)會(huì)選用易于致敏的豚鼠；研究新藥毒理選用兩種以上不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等。
疾病模型建立：通過基因改造、藥物誘導(dǎo)或其他手段，在動(dòng)物身上建立人類疾病的模擬模型。
2. 小鼠適應(yīng)株改造
除了常規(guī)開發(fā)小鼠感染模型以外，迪福潤(rùn)絲生物可以采用一種新的思路，對(duì)病毒進(jìn)行改造，例如改造Influenza A/California/04/2009 (H1N1) ，使病毒具備在BALB/c 小鼠呼吸道高效復(fù)制的能力，并利用該適應(yīng)病毒株建立小鼠感染模型。
3. 候選藥物給藥
給藥途徑：根據(jù)臨床應(yīng)用的需求選擇合適的給藥途徑，如口服、注射（靜脈、皮下、肌肉）等。
劑量設(shè)計(jì)：選擇合適的劑量范圍，通常包括低、中、高劑量，以評(píng)估藥物的劑量依賴性效應(yīng)。
4. 藥效評(píng)價(jià)及活體成像
觀察和記錄：定期觀察和記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重、行為、臨床癥狀等。
活體成像：通過活體成像儀可以觀察到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)病毒感染情況，可用于病毒組織分布研究、藥物篩選、給藥劑量確定等多種實(shí)驗(yàn)。
生物標(biāo)志物檢測(cè)：通過血液、尿液、組織等樣本檢測(cè)生物標(biāo)志物的變化，以評(píng)估藥物的生物活性。
終點(diǎn)評(píng)價(jià)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定的終點(diǎn)（如存活率、炎癥指標(biāo)等）進(jìn)行評(píng)估。
5. 數(shù)據(jù)分析
統(tǒng)計(jì)分析：對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較不同劑量組之間的差異，確定藥物的有效劑量范圍和最佳劑量。
藥效動(dòng)力學(xué)（PD）分析：通過分析藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間和強(qiáng)度，了解藥物的藥效動(dòng)力學(xué)特征。
6. 報(bào)告撰寫
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、方法、結(jié)果和討論，形成完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
總結(jié)與建議：總結(jié)藥物的藥效和安全性，為后續(xù)的臨床試驗(yàn)提供依據(jù)和建議。
體內(nèi)活性是藥物生物活性的評(píng)價(jià)的金標(biāo)準(zhǔn)，是首次非人體綜合活性的驗(yàn)證。 體內(nèi)藥效評(píng)估對(duì)于候選分子的確認(rèn)，臨床目標(biāo)適應(yīng)癥的篩選具有決定性的作用，是新藥研發(fā)中不可或缺的環(huán)節(jié)。
迪福潤(rùn)絲生物流感體外藥效評(píng)價(jià)
· 服務(wù)內(nèi)容
流感疾病模型的建立
以流感小鼠適應(yīng)株Mouse-adapted California-04（MA-H1N1-CA04）為例，迪福潤(rùn)絲生物通過構(gòu)建流感小鼠適應(yīng)株MA-CA04，可在小鼠模型體內(nèi)研究流感病毒的發(fā)病機(jī)制、病毒復(fù)制、宿主免疫反應(yīng)及抗病毒藥物/疫苗的效力。
用小鼠適應(yīng)株 MA-H1N1-CA04通過滴鼻途徑對(duì)Balb/C小鼠攻毒后，高劑量攻毒組小鼠體重大幅下降，并于攻毒后6天全部死亡；隨著攻毒劑量的減少，小鼠體重下降幅度和死亡率均降低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明該毒株對(duì)小鼠致死，攻毒模型成立，可以用于評(píng)價(jià)體內(nèi)藥效。
流感小鼠適應(yīng)株MA-CA04感染Balb/C小鼠模型
流感攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物保護(hù)實(shí)驗(yàn)（Challenge-Protective Assay）是一種科學(xué)研究方法，主要用于評(píng)估藥物或疫苗等安全性和有效性。這種實(shí)驗(yàn)通常涉及將病原體（如毒株）注射到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，以觀察動(dòng)物的免疫反應(yīng)和保護(hù)效果。通過這種方式，可以了解疫苗是否能有效誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生抗體，以及這些藥物是否具有抗病毒作用，從而提供對(duì)特定疾病的保護(hù)。
通過迪福潤(rùn)絲生物的H1N1-PR8毒株進(jìn)行小鼠體內(nèi)進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)，在流感攻毒保護(hù)藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中，連續(xù)稱重至Day 14并記錄存活情況。G1（模型組）小鼠在攻毒后的6天內(nèi)體重逐漸下降，最終全部死亡（0只/4只）。G2（供試品低劑量組）小鼠感染前1 h經(jīng)SC單次給藥，在攻毒后的6天內(nèi)體重逐漸下降，而后體重整體呈穩(wěn)定上升趨勢(shì)，最終存活率為75.0%（3只/4只）。G3（供試品高劑量組）小鼠感染前1 h經(jīng)SC單次給藥，體重整體呈穩(wěn)定上升趨勢(shì)，最終存活率為100%（4只/4只）。G4（陽(yáng)性對(duì)照組）小鼠感染前1 h經(jīng)灌胃給藥磷酸奧司他韋（連續(xù)5天，每天2次），體重整體呈穩(wěn)定上升趨勢(shì)，最終存活率為100%（4只/4只）。
攻毒實(shí)驗(yàn)后小鼠（G1, G2, G3, G4）體重變化
攻毒實(shí)驗(yàn)后小鼠（G1, G2, G3, G4）生存率變化
流感熒光報(bào)告病毒活體成像
利用迪福潤(rùn)絲生物構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒MA-PR8-NanoLuc，可對(duì)流感抗病毒藥物進(jìn)行評(píng)估。迪福潤(rùn)絲生物構(gòu)建的流感熒光報(bào)告病毒具有很強(qiáng)的熒光信號(hào)，可在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)GFP熒光蛋白，可查看病毒在感染模型體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布情況。
迪福潤(rùn)絲生物毒株資源優(yōu)勢(shì)
結(jié)合迪福潤(rùn)絲生物自身積累的大量抗流感病毒研究案例、WHO推薦毒株，迪福潤(rùn)絲生物建立了較為完善的流感毒株資源庫(kù)（見下表），以供病毒構(gòu)建及小動(dòng)物攻毒模型等服務(wù)。
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