3T3細胞是一種來源于小鼠胚胎的成纖維細胞株,于1962年由瑞士細胞生物學(xué)家George Todaro和Howard Green首次從小鼠胚胎繁殖層中分離培養(yǎng)獲得。其名稱來源于“3天傳代,接種體積3x105個細胞”的傳代方法。中華人民共和國藥典中將其作為測定部分細胞因子細胞活性的工具細胞。
3T3細胞的主要特點包括:
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能夠無限增殖,具有長期傳代能力。
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容易培養(yǎng),生長迅速,對培養(yǎng)條件要求低。
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細胞形態(tài)一致,無轉(zhuǎn)化性。
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可作為多種病毒的宿主細胞。
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可用于細胞融合實驗。
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可誘導(dǎo)分化為脂肪細胞。
3T3細胞的傳代培養(yǎng)方法:
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常規(guī)以3-4天為一個傳代周期進行1:4或1:6稀釋傳代。
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用0.25%胰酶消化收集細胞,離心棄上清。
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調(diào)整細胞密度,接種于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中,置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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當細胞生長進入對數(shù)生長期時傳代。
需要注意的事項:
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避免細胞污染。傳代時做好無菌操作。
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傳代時注意細胞狀態(tài),過度生長或老化會影響實驗結(jié)果。
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定期進行細胞活力檢測,確保細胞活力良好。
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細胞復(fù)蘇后需要進行傳代恢復(fù),至少傳代3代以上才可用于實驗。
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傳代時要控制細胞密度,避免細胞過稀或過密。
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傳代周期和比例要根據(jù)實驗需求調(diào)整。