1. 將待標(biāo)記的抗體/蛋白(濃度≧1mg/ml)對(duì)標(biāo)記反應(yīng)液 (90mM NaHCO3,10mM Na2CO3,126mM NaCl,pH9.0) 于4℃透析三次。
2. 將FITC(Frdbio)溶于DMSO中,濃度為20mg/ml。每次交聯(lián)使用的FITC均應(yīng)新鮮配制,避光。
3. (抗體/蛋白質(zhì):FITC)=1mg:150μg的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中,邊加邊輕輕晃動(dòng)使其與抗體混合均勻,避光4℃反應(yīng)8h。
4. 加入5M的NH4Cl至終濃度50mM,4℃終止反應(yīng)2h。
5. 將標(biāo)記產(chǎn)物在PBS中透析4次以上,至透析液清亮。
6. 交聯(lián)物的鑒定
蛋白濃度(mg/ml)=[A280–0.31×A495]/1.4
抗體/蛋白質(zhì):FITC比例=3.1×A495/(A280–0.31×A495),該值應(yīng)介于2.5~6.5之間。
7. FITC標(biāo)記的蛋白應(yīng)置于pH7.4的磷酸鹽緩沖液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,30%甘油,短期保存于4℃避光,長(zhǎng)期應(yīng)該-20℃避光保存。
你知道怎樣選購(gòu)卡那霉素(Kanamycin)么?
(2026-05-11T00:00 瀏覽數(shù):4258)
FITC快速標(biāo)記及計(jì)算(含計(jì)算工具)
(2026-05-07T00:00 瀏覽數(shù):8084)
“一站式”解決單抗融合
(2026-04-30T00:00 瀏覽數(shù):11521)
辣根過(guò)氧化物酶穩(wěn)定劑
(2026-04-30T00:00 瀏覽數(shù):10522)
抗體生物素標(biāo)記,真正難的不是“標(biāo)上去”,而是標(biāo)得穩(wěn)、背景低、效率可驗(yàn)證
(2026-04-28T00:00 瀏覽數(shù):12432)
堿性磷酸酶-抗體快速標(biāo)記試劑盒
(2026-04-24T00:00 瀏覽數(shù):10046)
SDS-PAGE 上看不清的兔多抗輕鏈,到底咋回事?
(2026-04-23T00:00 瀏覽數(shù):11199)
生物素標(biāo)記及效率檢測(cè)試劑盒
(2026-04-22T00:00 瀏覽數(shù):9332)
Frdbio水溶性納米佐劑
(2026-04-22T00:00 瀏覽數(shù):11678)
福因德簡(jiǎn)報(bào)
(2026-04-21T00:00 瀏覽數(shù):10172)