CUTANA? CUT&Tag Kit添新品啦!助您輕松應對CUT&Tag實驗
EpiCypher推出新品CUTANA? CUT&Tag Kit,為組蛋白翻譯后修飾(PTM)的超靈敏定位提供了全面的解決方案。CUTANA? CUT&Tag Kit使用專有的Direct-to-PCR策略,在一個管中即可完成從細胞到PCR文庫擴增,無需傳統的文庫制備流程,最大限度地減少樣本損失。與多道移液器兼容,提高了通量和重復性。
蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 通過功能基團或蛋白質的共價添加、調節亞基的蛋白水解切割或整個蛋白質的降解來增加蛋白質組的功能多樣性。這些修飾包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞**化、甲基化、乙酰化、脂質化和蛋白水解,幾乎影響正常細胞生物學和發病機制的所有方面。染色質免疫共沉淀技術(ChIP)作為用于研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的常用技術,仍然具有相當的局限性。近年來,基因組學和表觀遺傳學領域引入了兩種新穎的染色質分析方法,即核酸酶靶向切割和釋放技術(CUT&RUN)與靶向剪切及轉座酶技術(CUT&Tag),克服了ChIP法的諸多缺點,令研究人員能夠用更低的成本、更高的效率得到信噪比更高、重復性更好的實驗結果。
欣博盛生物是EpiCypher授權全國代理商,如需咨詢相關產品或咨詢技術問題,請聯系我們!
什么是CUT&Tag技術?
CUT&Tag全稱Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag),是基于CUT&RUN的新興姊妹技術。在EpiCypher的CUT&Tag實驗流程中,孵育結合好特異性抗體與靶標蛋白后,加入蛋白 A、蛋白G與Tn5的復合物(pAG-Tn5),使得轉座體進入細胞并與抗體結合,間接地固定在靶蛋白上;激活Tn5酶的切割活性,將靶蛋白結合的DNA區域切斷,從而達到提取DNA、進行PCR擴增、構建文庫的目的。在Tn5上融合了protein A/G抗體結合功能域的轉座體pAG-Tn5是該技術的核心,使研究者不必碎裂染色質并跳過了傳統的文庫準備步驟(end repair, adapter ligation)。

CUT&Tag技術有何特色?
精簡化的工作流程跳過了傳統ChIP-seq具有挑戰性的步驟,包括染色質碎片和抗體下拉,用更少的細胞和測序讀段生成高分辨率數據。
◆ 更短的實驗周期
在兩天內能夠完成從細胞到文庫的建立,而傳統的ChIP-seq需要五天(或更長時間)。

◆ 更少的細胞需求量與更低的成本
CUTANA?CUT&Tag分析僅使用10000-100000個細胞核即可生成高分辨率的圖譜,甚至可用于單細胞水平測序,便于單細胞或珍貴樣本的分析;與傳統ChIP-seq(需要約3000萬次讀取)相比,CUT&Tag檢測僅需要500-800萬次測序讀段,節省實驗成本。

◆ 更高的信噪比
CUTANA?CUT&Tag使用較少的起始細胞、更少的測序讀段,也能得到較低的背景信號和較強的目的信號。
◆ 無需文庫準備步驟
測序文庫的準備工作既費時又昂貴。通過在抗體結合的目標位點添加測序適配器,能夠實現跳過傳統的文庫準備步驟(end repair, adapter ligation),極大地簡化了實驗流程。EpiCypher的CUTANA?CUT&Tag分析通過直接從反應混合物中擴增標記DNA進一步簡化了這一策略,實現在一個管中完成從細胞到PCR文庫擴增。
產品信息
|
貨號 |
品名 |
規格 |
|
14-1102 |
CUTANA? CUT&Tag Kit , Primer Set 1 |
48 reactions |
|
14-1103 |
CUTANA? CUT&Tag Kit , Primer Set 2 |
48 reactions |
CUTANA? CUT&Tag試劑盒:用戶友好的表觀基因組分析工具
試劑盒內包括CUT&Tags實驗所需所有組分與對照品:
? 對照抗體 (Control antibodies)
? spike-in對照 (Nucleosome spike-in controls)
? 詳細的質控分析評價指標 (Detailed quality control metrics)
? 故障排除小貼士 (Troubleshooting tips)
試劑盒組分(藍色的為EpiCypher特有的組分)
| 名稱 |
貨號 |
|
pAG-Tn5 |
15-1017 |
|
H3K27me3 Positive Control Antibody |
13-0055t |
|
Rabbit IgG Negative Control Antibody |
13-0042t |
|
Anti-Rabbit Secondary Antibody |
13-0047 |
|
SNAP-CUTANA? K-MetStat Panel |
19-1002t |
|
ConA Beads |
21-1401 |
|
Non-Hot Start 2X PCR Master Mix |
15-1018 |
|
8-strip Tubes |
10-0009t |
|
4.5 M NaCl |
21-1013 |
|
0.5 M EDTA |
21-1014 |
|
1 M MgCl2 |
21-1015 |
|
TAPS Buffer |
21-1016 |
|
SDS Release Buffer |
21-1017 |
|
SDS Quench Buffer |
21-1018 |
|
0.1X TE Buffer |
21-1019 |
|
Pre-Wash Buffer |
21-1020 |
|
Pre-Nuclear Extraction Buffer |
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