在病毒快速變異、研發(fā)周期緊迫的傳染病領(lǐng)域，面對(duì)病毒變異與研發(fā)提速的雙重挑戰(zhàn)，「DIFF CRO」以“深度定制”為核心，依托靈活可配置的技術(shù)平臺(tái)，為每位客戶量身打造從早期篩選到體內(nèi)驗(yàn)證的一站式解決方案，直面項(xiàng)目復(fù)雜與獨(dú)特性挑戰(zhàn)。以下是「DIFF CRO」部分服務(wù)案例介紹：
01 RSV體外檢測(cè)：24小時(shí)精準(zhǔn)出結(jié)果
呼吸道合胞病毒（RSV）是嬰幼兒下呼吸道感染的首要病原，同時(shí)其臨床株的抗原多樣性為疫苗研發(fā)帶來(lái)極大挑戰(zhàn)?！窪IFF CRO」針對(duì)RSV疫苗效果評(píng)價(jià)，推出基于熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法（FFA）的中和抗體檢測(cè)服務(wù)，24小時(shí)內(nèi)即可獲得精準(zhǔn)結(jié)果，遠(yuǎn)快于傳統(tǒng)方法的3–6天。
圖1.RSV中和抗體檢測(cè)流程圖
該技術(shù)通過(guò)DIFF-GFP熒光報(bào)告病毒系統(tǒng)，直接識(shí)別早期感染和低水平病毒復(fù)制，無(wú)需等待細(xì)胞病變效應(yīng)，顯著提升檢測(cè)效率與靈敏度。平臺(tái)配備豐富的RSV毒株資源，更真實(shí)地模擬自然感染環(huán)境，確保疫苗評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)的可靠性。
表1.「DIFF CRO」擁有全面廣泛的RSV毒株庫(kù)資源
注：*代表為臨床株
平臺(tái)可根據(jù)客戶疫苗或藥物的特定靶點(diǎn)，靈活匹配并快速提供最相關(guān)的臨床株或工程株，確保評(píng)價(jià)模型與研發(fā)目標(biāo)高度一致。對(duì)比傳統(tǒng)方法，熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法在靈敏度、特異性和自動(dòng)化程度方面均占優(yōu)，適用于高通量樣本篩查。
RSV中和抗體檢測(cè)（體外藥篩）服務(wù)案例：
圖2.熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)儀的斑點(diǎn)計(jì)數(shù)結(jié)果
圖3.受試樣本中和抗體檢測(cè)結(jié)果
圖4.Nirsevimab對(duì)rRSV/A2-GFP1株的抑制率曲線
圖5.Ziresovir對(duì)rRSV/A2-GFP1株的抑制率曲線
02新冠假病毒：BSL-2安全高效篩選
面對(duì)新冠病毒持續(xù)變異（如JN.1系列毒株）與BSL-3實(shí)驗(yàn)室的高門(mén)檻限制，「DIFF CRO」開(kāi)發(fā)了VSV載體新冠假病毒技術(shù)，可在BSL-2環(huán)境下安全操作，兼具高通量篩選與活體示蹤能力，大幅降低成本與風(fēng)險(xiǎn)。
該技術(shù)將VSV病毒的G蛋白替換為新冠病毒刺突蛋白（S蛋白），并嵌入eGFP或熒光素酶報(bào)告基因，精準(zhǔn)模擬病毒入侵機(jī)制。假病毒缺乏復(fù)制能力，安全性高，卻能與真病毒一樣在hACE2轉(zhuǎn)基因小鼠中引發(fā)一致感染表型，數(shù)據(jù)可靠重復(fù)性高。
圖6.「DIFF CRO」新冠假病毒構(gòu)建策略與體內(nèi)外藥效評(píng)價(jià)應(yīng)用示意圖
表2.VSV新冠假病毒——產(chǎn)品目錄
“除目錄產(chǎn)品外，平臺(tái)支持根據(jù)客戶指定的新興變異株S蛋白序列，快速定制構(gòu)建假病毒，幫助客戶搶占新毒株研發(fā)先機(jī)。
服務(wù)案例：
圖7.新冠疫苗評(píng)價(jià)-hACE2 小鼠模型體重變化及存活率（疫苗接種后）
圖8.DIFF新冠假病毒模擬攻毒體重變化及存活率（攻毒后）
03 流感耐藥株：一站式藥效驗(yàn)證
流感病毒耐藥株的涌現(xiàn)（如NA-H275Y、PA-I38T突變）常導(dǎo)致治療方案失效。「DIFF CRO」基于定向進(jìn)化+反向遺傳學(xué)聯(lián)合技術(shù)，其核心優(yōu)勢(shì)在于可根據(jù)客戶遇到的臨床耐藥情況，或針對(duì)特定藥物靶點(diǎn)（如PA、NA、PB1等），定向構(gòu)建包含單一或組合突變的耐藥株模型，用于機(jī)制研究與方案突破。
體內(nèi)藥效驗(yàn)證采用BALB/c小鼠模型，通過(guò)體重變化、存活率、病毒載量及肺部病理切片（HE染色）等多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)。
表3.「DIFF CRO」流感毒株資源庫(kù)
表4.「DIFF CRO」流感耐藥株毒庫(kù)
服務(wù)案例：
CPE法檢測(cè)：
圖9.瑪巴洛沙韋對(duì)PR8的抑制率曲線
圖10.Baloxavir Marboxil對(duì)PR8-NA-H274Y-PA-I38T株的抑制率曲線
體內(nèi)攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn):
圖11.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的體重變化趨勢(shì)
圖12.小鼠流感攻毒模型(H1N1/PR8)給藥后的小鼠存活率情況統(tǒng)計(jì)
流感熒光報(bào)告病毒活體成像:
圖13.H1N1-PR8在感染模型體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布情況
HE染色及病理檢測(cè)：
圖14.肺部與氣管組織的HE染色及病理檢測(cè)
肺臟病毒載量檢測(cè)：
圖15.H1N1-PR8攻毒模型肺臟灌洗液病毒滴度
細(xì)胞因子檢測(cè)：
圖16.qRT-PCR相對(duì)定量方法檢測(cè)了肺組織中IL-6關(guān)鍵細(xì)胞因子的mRNA相對(duì)表達(dá)量
「DIFF CRO」以病毒學(xué)前沿技術(shù)為核心，融合定制化設(shè)計(jì)理念，在RSV、新冠、流感等復(fù)雜項(xiàng)目中展現(xiàn)出卓越的技術(shù)適應(yīng)性與快速響應(yīng)能力。無(wú)論是24小時(shí)出結(jié)果的RSV檢測(cè)服務(wù)、BSL-2安全的假病毒模型，還是一站式耐藥株平臺(tái)，均致力于為客戶縮短研發(fā)周期、降低風(fēng)險(xiǎn)，為突破傳染病防治瓶頸提供堅(jiān)實(shí)支撐。
選擇「DIFF CRO」，讓每一次合作都成為技術(shù)創(chuàng)新的加速器！