以下是蘸花法的protocol（徐遠濤,徐強 2018）：
材料與試劑
培養缽、保鮮膜、營養土 (泥炭土:蛭石:牛糞=1:1:1)、帶有目的基因載體的農桿菌菌株、苗齡5周左右的擬南芥植株、蔗糖、Silwet-77、含抗生素的LB培養基、VB、
儀器設備
剪刀、生長室、震蕩培養箱、離心機、分光光度計
實驗步驟
- 長日照 (光照16 h、黑暗8 h) 環境下種植健壯的擬南芥植株 (約5周)。
- 剪掉最開始抽出的1-5 cm長的初生主花序 (促進長出更多的側生花序)。修剪后一個星期內進行滲透轉化 (一般3~5 d)。并且在滲透轉化的前1 d植株需充分澆水，以便植物氣孔在轉化時充分張開。
- 準備農桿菌液。通常先用1 ml 含抗生素的LB培養基培養已經轉化了目的表達載體的農桿菌液，然后再吸取150 μl培養過夜的菌液加入到150 ml 新鮮的液體LB培養基中28 °C環境下震蕩培養24 h。
- 4,000 x g，20 min離心菌液，然后將菌重懸于120 ml滲透液 (10%蔗糖 + 400 μl/L Silwet-77，蘸花前充分混勻，OD600=0.8-1.0) 中。與此同時，剪掉植株上的果莢和已經完全開放的花。
- 將植株的地上部分浸入菌液中1 min，輕微震蕩。
- 用保鮮膜將侵染過的植株罩起來以保持濕度，暗培養1 d，然后置于正常培養條件，2~3 d后可去掉保鮮膜，轉化后1周左右方可澆水，并定期繼續侵染幾次。
- 繼續培養至植物成熟，收種子放在干燥環境中1周左右，即可篩選轉化子。
- 在去除初生花序后，次生花序約2-10 cm時最適宜侵染。因為此時有許多可用來侵染的花蕾。
- 滲透液濃度在0.15~1.74之間時，轉化率沒有明顯變化。
- Silwet L-77濃度在0.02%~0.1%時，轉化率是0.005%時的10-20倍，故一般采用的濃度為0.05%。但是，值得注意的是利用高濃度的Silwet L-77進行侵染時，在某些環境下會導致植物組織壞死。
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1. 徐遠濤 , 徐強 . (2018). 擬南芥蘸花侵染. Bio-101: e1010203. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010203.
