大黃（Rhubarb）屬于蓼科植物，作為中藥（TCM）在臨床上用于治療發(fā)燒，腹瀉，解毒和消腫已有數(shù)千年的歷史。
除用作瀉藥外，大黃在保護(hù)腸道屏障，維持腸道微生態(tài)環(huán)境和防止腸細(xì)菌移位方面也起著重要的作用。 大黃的主要作用歸因于其具有2%-5%的蒽醌類(lèi)衍生物（包括大黃酸，大黃素，大黃酚，蘆薈大黃素和大黃素甲醚）能夠促進(jìn)腸道運(yùn)動(dòng)和最優(yōu)含水量，常被用于治療便秘。
眾所周知，大多數(shù)由杯狀細(xì)胞（GC）分泌的粘蛋白在胃腸道中產(chǎn)生，其關(guān)鍵特性是能夠形成凝膠，保護(hù)腸道免受感染和促進(jìn)運(yùn)動(dòng)。由于粘蛋白在保護(hù)潛在的上皮細(xì)胞中起關(guān)鍵作用，因此粘液分泌的任何變化都可能改變?cè)摲烙琳希哂兄匾纳硪饬x。
隨著杯狀細(xì)胞移至結(jié)腸隱窩，它們通過(guò)調(diào)節(jié)分泌來(lái)合成、儲(chǔ)存和分泌粘蛋白（secrete mucin-2）。 類(lèi)似乙酰膽堿（ACh）和血清素等內(nèi)源性因素，可以觸發(fā)結(jié)腸杯狀細(xì)胞分泌粘蛋白。
鑒于大黃提取物RE對(duì)結(jié)腸粘液分泌的具體影響仍然模糊，這項(xiàng)研究的目的是研究RE在結(jié)腸GC的粘液分泌及其潛在機(jī)制。
研究表明，隨著不同劑量的RE加入伴隨著肥大細(xì)胞的累積和增加干擾素（IFN）-γ 或3或降低白介素（IL）-10 的水平，糞粒的數(shù)量和含水量增加。此外，RE可以誘導(dǎo)結(jié)腸組織中乙酰膽堿和粘蛋白（mucin-2）的釋放以及糞便中的組胺水平。 以上研究結(jié)果表明，RE誘導(dǎo)的結(jié)腸粘液分泌影響著肥大細(xì)胞活化和某些細(xì)胞因子。
此文章于2019年12月18日發(fā)表在Scientific Reports上。
在CD79a陽(yáng)性細(xì)胞的識(shí)別和分析中，利用TissueGnostics公司StrataQuest軟件對(duì)DAB染色進(jìn)行定量分析。軟件可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照或操作人員經(jīng)驗(yàn)設(shè)定cutoff線(xiàn)，隨即自動(dòng)分析信號(hào)和背景強(qiáng)度。軟件的轉(zhuǎn)錄運(yùn)算法將形態(tài)學(xué)信息和多通道類(lèi)流式分析能力相結(jié)合，對(duì)虛擬組織切片進(jìn)行精準(zhǔn)的定量分析。結(jié)果顯示CD79a總細(xì)胞數(shù)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞百分比。（ROI=0.5mmX0.5mm，4個(gè)大鼠1組）
在本研究中，DAB染色陽(yáng)性的CD79+細(xì)胞數(shù)量較少且分散，且腸上皮細(xì)胞在組織中互相擠壓，形態(tài)不規(guī)則導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)染色區(qū)域范圍不等，如何判斷細(xì)胞核周邊的細(xì)胞質(zhì)形態(tài)，以及區(qū)分多個(gè)相鄰細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，成為了在組織原位進(jìn)行定量分析的難題。
TissueFAXS Cytometry技術(shù)為首都醫(yī)科大學(xué)徐敬東老師實(shí)驗(yàn)組補(bǔ)充關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，2個(gè)月時(shí)間成功見(jiàn)刊。
TissueFAXS Cytometry定量分析技術(shù)，可以在精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞核的基礎(chǔ)上，以細(xì)胞核為核心尋找核周有DAB染色的區(qū)域，對(duì)區(qū)域歸屬進(jìn)行自動(dòng)劃分，再結(jié)合二維散點(diǎn)圖的正反向即時(shí)聯(lián)動(dòng)回溯校驗(yàn)功能，對(duì)有效DAB染色的細(xì)胞質(zhì)區(qū)域面積/染色強(qiáng)度進(jìn)行篩選，最終獲得整張玻片組織中CD79+細(xì)胞的百分比。
作為Nature旗下刊物，編輯審核會(huì)對(duì)文章數(shù)據(jù)的擁有著極高的要求和標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)病理評(píng)估對(duì)于散在的不規(guī)則信號(hào)，主要通過(guò)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行若干視野的計(jì)算去推測(cè)整張樣本的染**況。利用TissueFAXS Cytometry技術(shù)，不但可以獲得整張樣本切片的全景分析數(shù)據(jù)，還極大提高了分析的效率，使研究者更快拿到更準(zhǔn)確的分析數(shù)據(jù)，滿(mǎn)足更高的科研需求。這一切仍然是基于經(jīng)典的抗原-抗體染色方法，無(wú)需額外付出切片染色成本！