細(xì)胞結(jié)團(tuán)的原因及解決辦法-低分子量葡聚糖硫酸鈉(DSS)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞結(jié)團(tuán)，此時(shí)的細(xì)胞大多是輪廓模糊、透光性差，甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體，伴有細(xì)胞碎片，這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變，狀態(tài)不佳。
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是什么導(dǎo)致了細(xì)胞結(jié)團(tuán)？
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1. 過度消化，某些用于組織分解的酶，如胰蛋白酶，如果過量使用會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)塊；
2. 環(huán)境壓力，物理壓力和反復(fù)的溫度變化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，從而導(dǎo)致細(xì)胞的“粘性”的DNA分子將相鄰的細(xì)胞連接在一起；
3. 組織分解，在制備單細(xì)胞懸浮液時(shí)，使用酶、機(jī)械或化學(xué)分解策略可使細(xì)胞破裂，從而導(dǎo)致碎片的聚團(tuán)；
4. 過度生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)胞在其培養(yǎng)基中密度過大的時(shí)候，細(xì)胞將開始溶解并釋放碎片，碎片中的粘性因子會(huì)將細(xì)胞聚集到一起；
5. 污染，某些細(xì)菌和真菌病原體導(dǎo)致細(xì)胞溶解，結(jié)塊通常是細(xì)胞培養(yǎng)物被污染的跡象。
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怎樣減少細(xì)胞結(jié)團(tuán)？
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1. 低密度傳代。將已聚集的細(xì)胞進(jìn)行消化傳代，連續(xù)傳三次，細(xì)胞抱團(tuán)就會(huì)越來越小，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時(shí)間能將細(xì)胞逐漸傳成單個(gè)細(xì)胞；
2. 選擇適當(dāng)?shù)碾x心轉(zhuǎn)速和時(shí)間離心聚團(tuán)細(xì)胞。通常情況下，較快的速度可以離心散細(xì)胞，但在高速下也必須考慮細(xì)胞的脆弱性，所以適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)離心的時(shí)間也不失為一種較好的將懸浮聚團(tuán)細(xì)胞離心散開的方法，但轉(zhuǎn)速及時(shí)間要通過實(shí)驗(yàn)來把握。
3. 添加DNA酶I的內(nèi)切酶。可以混合到培養(yǎng)基中，從破裂的細(xì)胞中分離DNA，分解這些多余的碎片有助于保持靶細(xì)胞生長(zhǎng)的空間。但是，dna酶I使用過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞突變，最終會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果，所以不到萬一，不建議使用。
4. 添加低分子量葡聚糖硫酸鈉鹽。可以混合到培養(yǎng)基中，通過改變細(xì)胞表面電荷，促使單個(gè)細(xì)胞懸浮，防止結(jié)團(tuán)，安全有效。例如CHO細(xì)胞，推薦濃度10~50mg/L以達(dá)到防止結(jié)團(tuán)的效果。
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翌圣生物提供高品質(zhì)葡聚糖硫酸鈉
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葡聚糖硫酸鈉（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚陰離子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反應(yīng)形成，以鈉鹽形式提供，并通過添加少量磷酸鹽進(jìn)行穩(wěn)定。
Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000 葡聚糖硫酸鈉，平均分子量約5 kD，可通過改變細(xì)胞表面的電荷，來促使單個(gè)細(xì)胞懸浮，防止細(xì)胞結(jié)團(tuán)，支持細(xì)胞高密度培養(yǎng)，提高細(xì)胞活力。
圖1.硫酸葡聚糖鈉鹽結(jié)構(gòu)式
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產(chǎn)品特點(diǎn)
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1、 性能優(yōu)良：純度高（98%），含硫量16~20%；
2、 穩(wěn)定性高：聚陰離子復(fù)合物，可溶于水，形成無色溶液，形似天然粘多糖；
3、 安全無毒：可被自然降解，對(duì)細(xì)胞傷害較小。
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更多應(yīng)用場(chǎng)景
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1、 支持高密度培養(yǎng)，阻止細(xì)胞結(jié)團(tuán)，提高細(xì)胞活力；
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