目前世界有著諸多關(guān)于腎臟慢性移植功能障礙（CTD）與持續(xù)性的免疫炎癥最終導(dǎo)致組織重塑（包括肝內(nèi)動(dòng)脈中新內(nèi)膜的形成）。研究表明，受體來源的α-SMA +平滑肌樣細(xì)胞存在于異源移植腎臟CTD中。含有骨髓細(xì)胞的人體PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）在體外α-SMA +具有分化能力，但是原始細(xì)胞的表型是未知的。
本研究旨在發(fā)現(xiàn)包含細(xì)胞與平滑肌樣細(xì)胞的單細(xì)胞亞群的分化能力，是否腎移植受體CTD的單核細(xì)胞亞群會(huì)發(fā)生變化。實(shí)驗(yàn)中，以CD14、CD16的表達(dá)為基礎(chǔ)分選健康對(duì)照組的單核細(xì)胞亞群，研究骨髓間質(zhì)標(biāo)記物α-SMA和SM22α的基因表達(dá)水平。
CD14+/CD16++顯示對(duì)比增加的α-SMA和SM22αmRNA表達(dá)水平與CD14++/ CD16-得到增加的分化潛能接近于平滑肌樣細(xì)胞。流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示非CTD移植患者的CD14+ /CD16 ++比例減少，而且CTD患者的減少比例更高。為了確定CD14+/CD16 ++單核細(xì)胞和體外α-SMA +細(xì)胞生長(zhǎng)潛力之間的關(guān)聯(lián)性，健康對(duì)照組和CTD移植受體，非CTD移植受體的PBMC在指定條件下培養(yǎng)，最終確定其顯著相關(guān)性（P = 0.0002，r= 0.62）。雙染色的α-SMA和CD16顯示CTD患者腎臟移植中α-SMA + CD16 +細(xì)胞的存在，即使數(shù)量很低。
數(shù)據(jù)結(jié)果表明，相比于CD14++CD16?，平滑肌樣細(xì)胞相關(guān)基因的CD14+CD16++表達(dá)增加。CTD腎移植患者的單核細(xì)胞亞群減少，可能是由于移植中的選擇性遷移的結(jié)果。
在對(duì)細(xì)胞的定量分析與α-SMA的表達(dá)表現(xiàn)測(cè)定時(shí)，利用奧地利TissueGnostics公司Tissue FAXS顯微鏡成像系統(tǒng)，TissueQuest軟件分析系統(tǒng)。
圖像獲取部分：
Fig.5，腎臟移植中熒光染色的CD16與α-SMA的聯(lián)合表達(dá)。（A）人體脾臟中CD16/CD68, CD68/α-SMA和CD16/α-SMA的雙重?zé)晒鈽?biāo)記。其中(B) CD16/CD68, (C) CD16/CD68 , (D) CD16/α-SMA。每項(xiàng)中上行non-Tx代表非移植人類腎臟，下行IF/TA代表腎臟移植。（D）中箭頭指向圈出區(qū)域CD16+α-SMA+雙陽性細(xì)胞。
Fig 3 腎臟移植受體和健康對(duì)照組中單細(xì)胞亞群特征。（A）散點(diǎn)圖中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正向回溯。得到細(xì)胞亞群的數(shù)量（1）總活細(xì)胞數(shù)量（2）單細(xì)胞數(shù)（3）淋巴細(xì)胞（B）健康對(duì)照組，CTD腎臟移植受體和非CTD腎臟移植受體中活細(xì)胞CD14+頻率。（C）PBMC中CD14和CD16表達(dá)類型。區(qū)域2中的數(shù)據(jù)。（D）健康對(duì)照組與腎臟移植受體的單細(xì)胞亞群的頻率。
