創傷性腦損傷(traumatic brain injury,TBI)是神經外科常見危重病,病死率和致殘率居各類創傷之首。TBI 后常伴隨腦內微循環障礙,被公認為是TBI 后繼發性腦損害的關鍵環節和影響神經功能恢復的重要因素。針灸是一種古老的中藥療法,目前已在世界范圍內被廣泛用于多種疾病的治療。并且,世界衛生組織認為針灸可以改善術后恢復,骨關節炎,偏頭痛,關節痛,中風和創傷后應激障礙。
手十二井穴刺絡放血療法作為中醫傳統急救措施,對多種神經疾病患者的顱內血流動力學具有雙向調節作用。多項臨床研究證實,井穴放血在臨床對于一氧化碳中毒和創傷性腦梗死患者均有確切療效。對于 TBI 患者昏迷促醒以及傷后的功能恢復具有積極作用。盡管人們為開發有效的治療方法付出了許多努力,目前尚未有足夠有效的干預措施可改善TBI發病機理和進展。
TBI引起的昏迷是包括死亡在內的不良臨床預后的關鍵因素。當腦干網狀結構上行激活系統抑制,或丘腦的非特異性投射系統受損,或兩側大腦皮質廣泛性損害時,覺醒狀態減弱,意識內容減少或改變,即可造成意識障礙。因此,神經刺激劑通常通過外科手術植入腦干或脊髓中以誘導刺激,從而促進昏迷患者的意識。盡管一些先導性臨床試驗表明這些手術方法有些有效,但只有在患者生命體征穩定后才能進行。因此,仍然需要安全和實用的治療策略,使施救者可以緊急應用。
天津中醫藥大學針灸學院郭義、徐枝芳教授課題組利用手十二井穴(HTWP)刺絡法對創傷性腦損傷(TBI)引起的昏迷的影響,探討刺絡放血療法在TBI中的腦保護作用。 基因芯片結果顯示,HTWP針灸主要激活了調節神經元投射(P2rx7,P2rx3,Trpv1,Tacr1和Cacna1d),蛋白質分泌(Exoc1,Exoc3l1,Fgb和Fgr)以及中腦中央灰質(vPAG)中的多巴胺(DA)受體D3(Drd3)的基因,其中P2rx7的表達率最明顯。針灸還增加了DA和P2RX7神經元的表達和興奮性,并且DA神經元在vPAG中表達了P2RX7,P2RX3和TRPV1。腦室內加用P2RX7,P2RX3或TRPV1拮抗劑可阻斷針灸引起的知覺,隨后將P2RX7拮抗劑注入vPAG核也可抑制這種作用。研究結果提供了針灸通過vPAG中表達P2RX7的DA神經元減輕TBI誘導昏迷的證據,從而揭示了HTWP針灸改善TBI臨床療效的細胞和分子機制。 利用TissueGnostics公司TissueFAXS系統對兔腦組織樣本進行全景成像和TissueQuest組織流式定量分析。 1 首先通過TG精準的細胞識別算法在DAPI染色通道上識別所有細胞核,借助組織流式的二維散點圖射門圈選方法可以排除細胞碎片及黏連細胞。 2 分別針對Alexa Fluor 488和Alexa Fluor 594表達的亞細胞定位,以細胞核為核心,對其染色區域進行形態學識別,分別獲得其染色面積及平均像素強度。 3 利用組織流式定量技術的正反向回溯功能,結合層層圈門的方法確定單個通道和雙通道共標Marker的陽性率閾值。 Fig.1(D–F)c-fos平均染色強度和面積(um2),對照組、HTWP針灸TBI組和無HTWP針灸組P2RX7,P2RX3和TRPV1的共定位定量分析。 Fig.2 (B-C)c-fos平均染色強度和面積(um2),對照組、HTWP針灸TBI組和無HTWP針灸組的共定位定量分析。



