參加Duolink? PLA? 技術webinar，掌握蛋白互作研究利器！
實現在內源表達水平檢測蛋白質-蛋白質之間的相互作用，
想知道更多有關Duolink技術以及它在不同領域中的應用
該系列講座共有5場：
– 時??? 間：9:00AM CST, Tuesday, March 10, 2015
– 主講人：Ola S?derberg博士, 高級講師，Uppsala University
????????????????????Tom Juehne博士, 首席科學家，Sigma-Aldrich
內容簡介：
蛋白互作或信號轉導網絡的動態檢測可通過原位PLA實驗得以呈現，Ola S?derberg博士將詳細講述如何利用原位PLA技術研究蛋白-蛋白互作、蛋白翻譯后修飾和蛋白-DNA互作，配合使用原位PLA技術和鎖式探針，在分析信號轉導的同時還可以進行組織樣品中mRNA表達的基因分型分析。Tom Juehne博士將進一步講述Duolink PLA技術在其他生命科學領域的應用，包括在內源表達水平檢測、定量和定位蛋白互作、蛋白表達和翻譯后修飾，全方位證明Duolink PLA技術是一種強大的多功能檢測工具。
?– 時??? 間：9:00AM CST, Tuesday, March 17, 2015
?– 主講人：Joe Roethele博士, 抗體生產主管, Bethyl Laboratories
– 時??? 間：9:00AM CST, Thursday, March 26, 2015
– 主講人：Eric B. Haura M.D., Moffitt肺癌中心主任, Moffitt Cancer Center
內容簡介：
質譜和Y2H等其他技術雖然可解析癌癥等疾病相關的蛋白復合體或較大的蛋白互作，但因此得到的信息很難應用到人類樣本的研究中。為了攻克此難題，Eric博士的團隊利用PLA技術直接檢測人類腫瘤組織、小鼠異種移植模型中EGFR信號轉導相關復合體，揭示了EGFR和GRB2的互作在EGFR和MAPK信號轉導通路中的作用。他們研究了近300個腫瘤PDX模型，發現EGFR/GRB2信號轉導相關復合體水平異常的腫瘤對EGFR抗體藥物治療方法更敏感。最終結果表明，對癌癥組織中信號轉導相關蛋白復合體的研究，不僅可以揭示疾病的致病機理，更有利于發現更有效的癌癥治療方案。
– 時???間：9:00AM CST, Tuesday, April 14, 2015
?–? 主講人：Vikas Palhan博士, 高級研究員, Sigma-Aldrich
內容簡介：
??????? 在基因組水平研究諸如DNA或組蛋白甲基化等表觀遺傳學標記的方法很多，但隨著科學的發展，科學家需要進一步可視化單個細胞中單個基因位點的表觀遺傳學標記，而這類研究亟待需要一種具有極高靈敏度的檢測方法。為了實現該目的，研究者綜合運用原位雜交、近位連接技術和顯微成像等技術成功檢測了SEPTIN9啟動子的DNA甲基化，而SEPTIN9啟動子甲基化是結腸癌的已知生物標記。
??????? 在該實驗中，作者利用生物素標記的核酸探針特異雜交SEPTIN9啟動子的CpG島，隨后使用生物素和甲基化抗體進行Duolink實驗，通過熒光顯微鏡成像分別顯示了轉移性前列腺癌DU145細胞(Chr17二倍體)中有2個陽性信號，結腸癌SW480細胞(Chr17三倍體)中有3個陽性信號。此外，通過Duolink實驗還可以監測前列腺癌細胞(DU145)中，EZH2組蛋白甲基化轉移酶和H3K27me3表觀遺傳學標記的相互作用，以及SAHA和GSK343抑制劑對EZH2活性的影響。
??????? 在該實驗中，作者利用生物素標記的核酸探針特異雜交SEPTIN9啟動子的CpG島，隨后使用生物素和甲基化抗體進行Duolink實驗，通過熒光顯微鏡成像分別顯示了轉移性前列腺癌DU145細胞(Chr17二倍體)中有2個陽性信號，結腸癌SW480細胞(Chr17三倍體)中有3個陽性信號。此外，通過Duolink實驗還可以監測前列腺癌細胞(DU145)中，EZH2組蛋白甲基化轉移酶和H3K27me3表觀遺傳學標記的相互作用，以及SAHA和GSK343抑制劑對EZH2活性的影響。
?– 時??? 間：9:00AM CST, Tuesday, April 28, 2015
– 主講人：J. Matthew Rhett博士, Medical University of South Carolina
內容簡介：
???????間隙連接(Gap junctions)是大的細胞間通道聚合體，有利于小分子和離子在細胞間相互傳遞。間隙連接是由半通道相互作用形成的，在多種組織功能中，間隙連接和半通道都發揮著重要的生理和病理學作用，包括心臟動作電位傳播、腫瘤生長和轉移、炎癥反應和適應性免疫、傷口愈合以及中樞神經系統中的電突觸傳遞等。表達最廣泛的連接蛋白異構體是Cx43，其在上述組織功能中的調控已經成為間隙連接研究的焦點。
???????作者利用Duolink PLA技術研究了培養的細胞中Cx43的互作，該技術的特異性和亞細胞定位顯示，結合使用共聚焦熒光顯微鏡技術，使研究者對間隙連接的超微結構、動作電位傳導和Cx43穿梭的調控機制等都有了更深刻的認識。
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???????作者利用Duolink PLA技術研究了培養的細胞中Cx43的互作，該技術的特異性和亞細胞定位顯示，結合使用共聚焦熒光顯微鏡技術，使研究者對間隙連接的超微結構、動作電位傳導和Cx43穿梭的調控機制等都有了更深刻的認識。
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